HPLC法測(cè)定腦血栓片中阿魏酸含量

郭淑霞,張秀麗(.朝陽(yáng)健康藥業(yè)有限公司,遼寧 朝陽(yáng) 000；.朝陽(yáng)市食品藥品檢驗(yàn)所,遼寧 朝陽(yáng) 000)

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HPLC法測(cè)定腦血栓片中阿魏酸含量

郭淑霞1,張秀麗2
(1.朝陽(yáng)健康藥業(yè)有限公司,遼寧 朝陽(yáng) 122000；2.朝陽(yáng)市食品藥品檢驗(yàn)所,遼寧 朝陽(yáng) 122000)

目的：采用高效液相色譜法測(cè)定腦血栓片中阿魏酸的含量。方法：采用Kromasil C18(4.6mm×250mm,5μm)色譜柱；以甲醇-2%醋酸溶液(20∶80)為流動(dòng)相；流速:1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)λ=323nm；柱溫:28℃。結(jié)果：阿魏酸線性范圍為10.05～201.00μg/mL (r=0.999 5),平均回收率為99.27%，RSD為1.2% (n=6)。結(jié)論：該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于腦血栓片的質(zhì)量控制。

腦血栓片；HPLC法；阿魏酸；含量測(cè)定；質(zhì)量控制

腦血栓片收載于衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十九冊(cè)，是由川芎、 紅花、當(dāng)歸、水蛭(制)等10味中藥制備而成的片劑，具有活血化瘀、醒腦通絡(luò)、潛陽(yáng)熄風(fēng)之功效，對(duì)于因瘀血﹑肝陽(yáng)上亢出現(xiàn)的中風(fēng)先兆，如肢體麻木﹑頭暈?zāi)垦５燃澳X血栓形成出現(xiàn)的中風(fēng)不語(yǔ)﹑口眼歪斜﹑半身不遂等癥具有預(yù)防和治療作用。腦血栓片原質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)過于簡(jiǎn)單，為了更好地控制其質(zhì)量，本試驗(yàn)增加了川芎的含量測(cè)定項(xiàng)[1-6]。

1 儀器與試藥

島津LC-2010A型高效液相色譜儀(包括LC-2010型紫外檢測(cè)器、LC solution色譜工作站)；島津UV-2550紫外分光光度計(jì)；阿魏酸(批號(hào)：111773-201012)；對(duì)照品購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；腦血栓片(吉林一晟達(dá)藥業(yè)有限公司，批號(hào)：20120101、 20120304、 20130401)；甲醇為色譜純，其它為分析純；水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Kromasil C18(4.6mm×250mm；5μm)；流動(dòng)相：甲醇-2%醋酸溶液(18∶82)；柱溫：28℃;流速：1.0mL/min；進(jìn)樣量：10μL；理論塔板數(shù)以阿魏酸計(jì)不低于8 000。

2.2 溶液制備

取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取約2.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入40%乙醇-冰醋酸(20∶1)混合溶液25 mL，稱定重量，置水浴上加熱回流1h，放冷，再稱定重量，用40%乙醇-冰醋酸(20∶1)混合溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，離心，取上清液經(jīng)0.45μm濾過即得供試品溶液。取阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，加40%乙醇-冰醋酸(20∶1)混合溶液制得每1mL含10.05μg的對(duì)照品溶液。按處方及工藝制備不含川芎的陰性樣品，同供試品溶液的制備方法制備陰性對(duì)照溶液。

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 陰性干擾試驗(yàn) 取“2.2”項(xiàng)下3種溶液各10μL，分別注入高效液相色譜儀，結(jié)果見圖1，顯示待測(cè)峰與其它峰分離度大于1.5，峰形良好，陰性無(wú)干擾。

圖1 腦血栓片HPLC色譜

2.3.2 線性關(guān)系考察 分別精密吸取對(duì)照品溶液1、5、10、15、20μL，分別注入液相色譜儀中，測(cè)定峰面積。以進(jìn)樣量(X)為橫坐標(biāo)，色譜峰面積(Y)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得阿魏酸線性回歸方程為Y=314 614.5X-101 902(r=0.999 6)，線性范圍為10.05～201.00μg/mL。

2.3.3 精密度試驗(yàn) 精密吸取對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，每次進(jìn)樣10μL，測(cè)定峰面積，結(jié)果阿魏酸峰面積的RSD為1.03%，表明儀器精密度良好。

2.3.4 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批(批號(hào)為20120101)樣品2.0g，按“2.2”項(xiàng)下供試品溶液制備方法平行制備6份供試品溶液，依法測(cè)定，結(jié)果貝阿魏酸的RSD為0.95%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.3.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一批供試品溶液(批號(hào)為20120101)10μL，按上述色譜條件，分別于0、2、4、 8、12、24h時(shí)測(cè)定，結(jié)果阿魏酸峰面積的RSD為0.89%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.6 加樣回收率試驗(yàn) 取已知含量的供試品溶液(批號(hào)20120101，阿魏酸含量為0.1835mg/g)6份，每份約1.0g，精密稱定，分別精密加入阿魏酸對(duì)照品，按供試品溶液方法制備，依法測(cè)定含量并計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

表1 阿魏酸回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.4 樣品含量測(cè)定

取3批樣品，依法測(cè)定，采用外標(biāo)法計(jì)算樣品中阿魏酸的含量，批號(hào)20120101、20120304、20130401樣品中阿魏酸含量分別為：0.183 5mg/g、0.179 4mg/g、0.180 2mg/g；RSD分別為0.87%、1.01%、0.76%。

3 討論

3.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

取阿魏酸對(duì)照品溶液，在200～400nm范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，結(jié)果在波長(zhǎng)323nm處有最大吸收，所以選323nm作為測(cè)定波長(zhǎng)。3.2 流動(dòng)相的選擇

分別以甲醇-水(18∶82)、乙腈-水(18∶82)、甲醇-2%醋酸溶液(18∶82)作為流動(dòng)相進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果以甲醇-2%醋酸溶液(18∶82)為流動(dòng)相時(shí)，分離度大于1.5，峰形良好，所以選甲醇-2%醋酸溶液(18∶82)為流動(dòng)相。3.3 提取時(shí)間的選擇

比較加熱回流提取30、60、90min的提取效果，結(jié)果表明加熱回流提取60min提取率最高。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì). 中國(guó)藥典[S].一部.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：274.

[2] 閆建坤，李紅英，于得才，等.HPLC測(cè)定溫腎調(diào)經(jīng)顆粒中阿魏酸的含量[J].包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2014,30(2):9-10.

[3] 張祖亮,梁健健.HPLC法測(cè)定催乳顆粒中阿魏酸的含量[J].海峽藥學(xué),2014,26(4):70-71.

[4] 胡小云,馬海平,趙吉平.HPLC法測(cè)定頭痛糖漿中阿魏酸的含量[J].湖北中醫(yī)雜志,2014,36(5):67-68.

[5] 鄭江平,雷震,黃良永.川芎及其配方顆粒中阿魏酸的含量比較[J].中醫(yī)藥信息,2014,31(2):73-76.

[6] 竇金鳳.HPLC法測(cè)定宮炎康膠囊中阿魏酸的含量[J].藥學(xué)研究,2014，33(4):206-207.

(責(zé)任編輯：宋勇剛)

Determination of Ferulic Acid in Cerebral Thrombosis Tablets by HPLC

Guo Shuxia1,Zhang Xiuli2
(1.Chaoyang Health Pharmaceutical Co., Ltd., Liaoning 122000,China; 2.Chaoyang Food and Drug Inspection Institute, Liaoning 122000, China)

Objective:To develop a HPLC method for the determination of ferulic acid in Naoxueshuan table. Methods:The separation was performed at 28℃ on a Kromasil C18column(4.6mm×250mm,5μm) with a mobile phase of methanol-2% acetic acid(18∶82)； The flow rate was 1.0mL/min , and the detecting wavelength was set at 323nm;Results:The linear rang of Schisandrin was from 10.05～201.00μg/mL。The average recovery of Schisandrin was 99.27%,RSDwas 1.2%(n=6);Conclusion:The method is simple and can accuraate with good reproducibility，It can be used for quality control of Naoxueshuan table.

Naoxueshuan Table；HPLC；Ferulic Acid； Content Determination ；Quality Control

2015-03-25

郭淑霞(1966-),女，朝陽(yáng)健康藥業(yè)有限公司主管中藥師，研究方向中藥鑒定。

R284.2

A

1673-2197(2015)15-0047-02

10.11954/ytctyy.201515019