右旋酮洛芬氨丁三醇速釋緩釋雙層片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究*

李月婷，侯靖宇，胡 杰，潘 潔，黃 勇，鄭 林＊＊

(1.貴州醫(yī)科大學(xué) 貴州省藥物制劑重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴州 貴陽 550004;2.貴州醫(yī)科大學(xué) 藥學(xué)院，貴州 貴陽 550004;3.貴州醫(yī)科大學(xué) 民族藥與中藥開發(fā)應(yīng)用教育部工程研究中心，貴州 貴陽 550004)

右旋酮洛芬氨丁三醇(dexketoprofen trometamol，DKPF)是非甾體抗炎藥(nonsteroidal anti-inflammatory drugs，NSAIDs)酮洛芬的右旋對映體右旋酮洛芬的水溶性氨丁三醇鹽［1］，具有明顯的抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛作用［2］。為讓口服DKPF 片劑在體內(nèi)吸收時間延長、血藥濃度平穩(wěn)，達(dá)到減少服藥次數(shù)和提高療效的效果［3－7］，本研究以速釋、緩釋材料研制的DKPF 雙層片，在保證速釋層的藥物能迅速釋放發(fā)揮療效的同時又能控制釋藥速度［8］。為有效控制DKPF 速釋緩釋雙層片的質(zhì)量，本研究建立紫外分光光度(UV)法對DKPF 雙層片的含量進(jìn)行測定，對DKPF 溶出度、釋放度及穩(wěn)定性進(jìn)行研究，報告如下。

1 儀器、試劑及藥物

1.1 儀器

UV－2401PC 紫外分光光度計(日本島津公司)，CQ250A－TS 超聲波清洗機(jī)(上海躍進(jìn)醫(yī)用光學(xué)機(jī)械廠)，THZ－82 恒溫水浴振蕩器(鎮(zhèn)江市科密儀表有限公司)，EL204 電子分析天平(梅特勒－托利多儀器上海有限公司)，RC806 智能溶出儀(天津市天大天發(fā)科技有限公司)，PHS－3C 酸度計(上海精密科學(xué)儀器有限公司)，WD－A 型藥物穩(wěn)定性檢查儀(天津藥典標(biāo)準(zhǔn)儀器廠)。

1.2 試劑與藥物

DKPF 原料藥(批號20110301，純度99.8%，武漢遠(yuǎn)成共創(chuàng)科技有限公司)，DKPF 速釋緩釋雙層片(批號20111009、20111010、20111011，貴州省藥物制劑重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室)，羥丙甲基纖維素(HPMC K4M，上海Colorcon 公司)，乙基纖維素(EC 20cps，上海Colorcon 公司)，藥用乳糖、微晶纖維素及羧甲基淀粉鈉(上海運(yùn)宏化工輔料制劑技術(shù)有限公司)，實(shí)驗(yàn)用水為超純水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 輔料干擾試驗(yàn)和測定波長

對照品溶液的制備:稱取DKPF 原料藥0.059 3 g，置100 mL 容量瓶中，用溶出介質(zhì)溶解、定容至刻度，得對照品溶液。空白溶液的制備:按處方比例稱取各輔料，加入少量溶出介質(zhì)，超聲5 min 溶解，0.8 μm 微孔濾膜濾過，取濾液于100 mL 量瓶中，以溶出介質(zhì)定容至刻度。供試液制備:精密稱取粉DKPF 雙層緩釋片粉末適量(約相當(dāng)于DKPF 50 mg)，置100 mL 量瓶中，加適量水，超聲10 min，用水稀釋，定容至刻度，用0.8 μm 微孔濾膜濾，棄去初濾液，量取續(xù)濾液1 mL，置50 mL 容量瓶中，加水稀釋至刻度。取對照品溶液和空白溶液，以純水為空白對照，紫外分光光度計在190 ～400 nm 范圍內(nèi)進(jìn)行掃描。結(jié)果顯示，對照品在260 nm 波長處有最大吸收，輔料有少量吸收，故輔料在此條件下無干擾。

2.2 方法學(xué)考察

2.2.1 線性關(guān)系 按“2.1”項(xiàng)下制備對照品溶液，量取對照品溶液0.1、0.3、0.5、0.8、1.0、1.2、1.5 及1.8 mL 于50 mL 量瓶中，加水稀釋，定容至刻度。在260 nm 波長處分別測定吸光度，以濃度C 作為橫坐標(biāo)，吸光度A 為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算回歸方程為A=0.042 3 C+0.002，r=0.999 9，結(jié)果表明DKPF 對照品濃度在1.19 ～21.49 mg/L范圍內(nèi)與溶液的之間吸光度呈良好的線性關(guān)系。

2.2.2 精密度試驗(yàn) 取“2.2.1”項(xiàng)下3 個濃度的對照品(17.90 mg/L、9.47 mg/L、3.62 mg/L)溶液，按上述建立的UV 法24 h 內(nèi)重復(fù)測5 次測定吸光度值，計算日內(nèi)精密度，平均相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.23%;連續(xù)測定5 d，計算日間精密度，平均RSD 為0.77%，說明該方法精密度良好。

2.2.3 回收率試驗(yàn) 分別稱取標(biāo)示量的80%，100%，120%的DKPF 空白輔料，置于100 mL 量瓶中，加水溶解、稀釋至刻度，用0.8 μm 微孔濾膜過濾，量取續(xù)濾液1 mL 于50 mL 量瓶中，加水稀釋至刻度，在260 nm 波長處測定吸光度，計算加樣回收率，結(jié)果表明回收率為99.8%～100.6%，RSD 為0.34%～1.02%，說明此方法有良好的回收率。

2.3 樣品含量測定

取DKPF 速釋緩釋雙層片 3 批(批號20111009，20111010，20111011)，每批分別取20 片研細(xì)，混合均勻。按“2.1”項(xiàng)下制備樣品溶液，以蒸餾水為空白，按上述建立的UV 法測定吸光度值，計算片劑中藥物的含量。結(jié)果見表1。

表1 DKPF 速釋緩釋雙層片含量測定結(jié)果Tab.1 Determination results of drug content of DKPF immediate-release and sustained-release tablets

2.4 釋放度和溶出度的測定

2.4.1 雙層片釋放度的測定［9］采用《中國藥典》2010 版，第一法裝置(籃法)，以1 000 mL 脫氣蒸餾水作溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速100 r/min，溫度為37.5 ℃。測定DKPF 速釋緩釋雙層片樣品(批號20111010)釋放度，分別于5、15、30 min 和1、2、4、6、8、10 及12 h取樣，每次5 mL，并用0.8 μm 微孔濾膜過濾，量取續(xù)濾液2 mL 于10 mL 容量瓶中，加水稀釋、定容至刻度，在260 nm 波長處測定吸收度，并計算累計釋放量。根據(jù)測定結(jié)果，繪制體外釋藥曲線，對本品0 ～12 h 的釋藥行為進(jìn)行擬合，方程為:ln(100－F)= －0.270 6t+4.444 2，r=0.993 8，表明其釋藥行為更符合一級動力學(xué)方程。測定結(jié)果見表2、圖1。

表2 DKPF 速釋緩釋雙層片釋放度的測定結(jié)果(n=6)Tab.2 Determination result of release uniformity of DKPF double layer tablets

圖1 DKPF 速釋緩釋雙層片體外釋放曲線Fig.1 The release curve of DKPF double layer tablet in vitro

2.4.2 雙層片溶出度測定 照“2.4.1”項(xiàng)下方法，分別測定3 批樣品中DKPF 的溶出度，結(jié)果表明3批樣品均能在30 min 內(nèi)迅速釋放藥物，即達(dá)到速釋要求;之后持續(xù)釋放，12 h 后基本釋放完全，達(dá)到所設(shè)計的緩釋要求，且3 批樣品釋放曲線比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P ＞0.05)，表明其工藝重現(xiàn)性良好。見表3、圖2。

表3 三批DKPF 雙層片溶出度測定結(jié)果Tab.3 Determination result of dissolution degree of DKPF double layer tablets in three batches

圖2 雙層片溶出度測定Fig.2 Dissolution curves of DKPF double layer tablets in three batches

2.5 雙層片的初步穩(wěn)定性

2.5.1 高溫試驗(yàn) 取樣品(批號20111010)適量，于60 ℃，密閉容器中放置10 d，分別于第5 天和第10 天取樣，按照檢查項(xiàng)目檢定，結(jié)果顯示其含量范圍在99.05%～99.76%、性狀，釋放度在12 h 內(nèi)均無明顯變化，表明本品對熱穩(wěn)定。

2.5.2 高濕試驗(yàn) 取DKPF 速釋緩釋雙層片(批號20111010)適量，于25 ℃，相對濕度RH 75%條件下放置10 d，分別于第5 天和第10 天取樣，測定吸濕增重，結(jié)果表明第5 天和第10 天，增重分別為2.8%、5.2%，含量分別為97.2%、95.5%。說明藥物在相對濕度RH 75%條件下存在較嚴(yán)重的吸濕現(xiàn)象，含量有所下降，釋藥速率降低。

2.5.3 光照試驗(yàn) 取DKPF 速釋緩釋雙層片(批號20111010)適量置于表面皿中，于室溫、照度為(4 500±500)Lx 的光照箱內(nèi)放置10 d，分別于第5 天和第10 天取樣，按檢查項(xiàng)目檢定。結(jié)果樣品含量在98.8%～99.5%范圍，釋放度在12 h 內(nèi)均無明顯變化，表明其對光照穩(wěn)定。

3 討論

DKPF 在紫外區(qū)有較好的吸收，并且輔料在此條件下無干擾，采用UV 法測定DKPF 雙層片的溶出度、釋放度，結(jié)果良好，且均能反映DKPF 速釋緩釋雙層片在體內(nèi)快速釋藥、快速吸收、并能夠長時間維持藥效的特性。故認(rèn)為UV 法對DKPF 速釋緩釋雙層片中DKPF 含量、溶出度、釋放度及不同介質(zhì)中的穩(wěn)定性等進(jìn)行評價，為制劑的處方篩選、含量測定等，提供了方便、快捷、可靠的分析方法，表明此方法準(zhǔn)確率高，重復(fù)性好，能較好滿足DKPF 速釋緩釋雙層片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的各項(xiàng)分析要求。

通過DKPF 速釋緩釋雙層片穩(wěn)定性影響因素試驗(yàn)考察發(fā)現(xiàn)，本品在光照、高溫條件均穩(wěn)定，在75%RH 條件下吸濕嚴(yán)重，因此應(yīng)選擇防潮性能良好的藥品包裝材料貯存DKPF 速釋緩釋雙層片，并在貯存過程中注意控制其濕度條件。本研究將繼續(xù)進(jìn)行加速穩(wěn)定性試驗(yàn)和長期穩(wěn)定性試驗(yàn)，以全面考察該產(chǎn)品的穩(wěn)定性，為其質(zhì)量提供保證。

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