不穩定型心絞痛患者血清HMGB1 的水平及臨床意義

張岳雯 王小敏 劉長江 寧佳 蔡連鎖 劉玉茹

不穩定型心絞痛是臨床上常見的冠心病類型，屬于急性冠脈綜合征的范疇，主要機制是由于冠狀動脈粥樣斑塊形成或其破裂出血，導致冠狀動脈閉塞或狹窄，而出現臨床表現。目前研究認為，炎性因子與冠心病冠狀動脈病變程度明顯相關，與動脈粥樣硬化發生、發展關系密切，高遷移率族蛋白B1 (HMGB1)為真核生物細胞核內的結合蛋白，是一種炎癥介質在動脈粥樣硬化和損傷血管的發生過程中起主要作用，白介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)為常見的炎癥反應介質，本研究通過檢測不同類型冠心病患者血清HMGB1 和IL-6、TNF-α 水平及其相關性，以探討HMGB1 在不穩定型心絞痛患者中的變化及其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 70 例冠心病心絞痛患者均為2014年3 月至2014 年6 月在我院醫院治療，經冠狀動脈造影、冠脈CTA 等檢查確診為冠心病的患者。70 例冠心病心絞痛患者作為CHD 組:男43 例，女27 例;年齡45 ～83 歲，平均年齡(61.7 ±11.2)歲。其中34 例表現為穩定型心絞痛作為SAP 組:男20 例，女14 例;年齡46 ～80 歲，平均年齡(59.8 ±11.6)歲;病程3 個月～20 年;合并高血壓病14 例，陳舊性心肌梗死10 例，腦血管病7 例，糖尿病9 例。36 例表現為不穩定型心絞痛作為UAP 組:男23 例，女13 例;年齡45 ～83 歲，平均年齡(61.6 ±11.7)歲，病程5 個月～18 年;合并高血壓病15 例，陳舊性心肌梗死8 例，腦血管病9例，糖尿病11 例。選取同期50 例健康體檢者作為對照組，男31 例，女19 例;年齡49 ～80 歲，平均年齡(61.2 ±10.5)歲;經詢問病史、體格檢查、心電圖及其他實驗室檢查無異常。3 組患者間年齡、性別比、吸煙史、飲酒史及血脂、血糖、高血壓等并發疾病情況比較，差異無統計學意義(P ＞0.05)，具有可比性。

1.2 診斷及排除標準 所有冠心病心絞痛患者診斷標準參照《不穩定性心絞痛和非ST 段抬高心肌梗死診斷與治療指南》［1］并行冠脈造影確診，至少一支心外膜下冠狀動脈或其主要分支直徑狹窄超過50%。心電圖檢查符合:心絞痛發作時心電圖檢查有缺血性改變或于靜息心電圖有明顯缺血改變及運動試驗心電圖陽性。排除患者存在外周血管疾病、慢性心力衰竭、腎臟及肝臟疾病、血液病、甲狀腺疾病、惡性腫瘤、自身免疫性疾病以及近期發熱、感染性疾病、血栓、近期(1 個月內)手術史及經皮冠脈介入治療、結締組織性疾病等病史。

1.3 檢測方法 對照組于清晨，冠心病心絞痛患者于入院次日清晨，空腹采集肘靜脈血4 ml 注入一次性未加抗凝劑的真空潔凈玻璃管內，在37℃水浴箱中靜置1 h 左右以3 000 r/min 離心10 min 分離血清，取上清液，置于－ 20℃冰箱待測。采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清高遷移率族蛋白B1(HMGB1)、白細胞介素(IL-6)、腫瘤壞死因子α(TNF-α);試劑盒由美國R＆D 公司提供，按照試劑盒說明步驟進行操作。

1.4 治療方法 所有冠心病心絞痛患者均給予常規治療，如臥位、吸氧、心電監護、抗血小板聚集、減少心肌耗氧、硝酸甘油擴冠等，并給予β-受體阻滯劑、鈣拮抗劑以及他汀類藥等，治療4 周后觀察指標變化情況。

1.5 統計學分析 應用SPSS 13.0 統計軟件，計量資料以±s 表示，組間比較應用t 檢驗，計數資料組間比較應用χ2檢驗，相關性分析采用Spearman 秩相關分析，P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 CHD 組與對照組血清HMGB1 和IL-6、TNF-α水平比較情況 CHD 組患者血清HMGB1、IL-6、TNFα 水平較對照組明顯增高，差異有統計學意義(P ＜0.05);其中UAP 組患者血清HMGB1、IL-6、TNF-α 水平與SAP 組及對照組之間相比較，差異有統計學意義(P ＜0.05);SAP 組患者血清HMGB1、IL-6、TNF-α 水平與對照組之間比較，差異有統計學意義(P ＜0.05)。見表1。

表1 冠心病心絞痛患者血清HMGB1 和IL-6、TNF-α 水平比較± s

表1 冠心病心絞痛患者血清HMGB1 和IL-6、TNF-α 水平比較± s

注:與對照組比較，* P ＜0.05;與SAP 組比較，#P ＜0.05

組別 HMGB1(μg/L) IL-6(ng/L) TNF-α(ng/L)對照組(n =50)30.51 ±8.17 5.46 ±1.97 0.87 ±0.21 CHD 組(n =70) 62.18 ±18.20* 17.65 ±3.17* 1.96 ±0.25*UAP 組(n =36) 79.45 ±12.5* # 23.37 ±4.85* # 3.12 ±0.31* #SAP 組(n =34) 47.62 ±9.49* 11.12 ±3.14* 1.43 ±0.22*

2.2 治療后CHD 組與對照組血清HMGB1 和IL-6、TNF-α 水平比較情況 治療后患者血清HMGB1 和IL-6、TNF-α 水平與治療前比較均有明顯下降，均具有顯著性差異(P ＜0.05)，但UAP 組患者HMGB1 和IL-6、TNF-α 與對照組比較仍明顯增高，差異有統計學意義(P ＜0.05)。見表2。

表2 冠心病心絞痛患者血清HMGB1 和IL-6、TNF-α 水平比較 ± s

注:組間比較，* P ＜0.05;與對照組比較，#P ＜0.05

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2.3 CHD 患者血清HMGB1 和IL-6、TNF-α 相關性CHD 患者血清HMGBl 與IL-6、TNF-α 水平經相關性分析，呈正相關性(r=0.387，r=0.306;均P ＜0.05)，UAP 組患者血清HMGBl 與IL-6、TNF-α 水平經相關性分析，呈正相關性(r=0.461，r=0.328;均P ＜0.05)，但SAP 組患者血清HMGBl 與IL-6、TNF-α 水平經相關性分析，無相關性(r=0.142，r=0.127;均P ＞0.05)。

3 討論

冠心病是由冠狀動脈病變所引起的心臟病，多為冠狀動脈粥樣硬化所致，其有較高的發病率及病死率。不穩定型心絞痛是常見的冠心病類型，介于穩定型心絞痛、急性心肌梗死及猝死之間的急性冠脈綜合征。研究表明，炎性反應與冠狀動脈病變程度密切相關，炎性反應是動脈粥樣硬化(AS)發生、發展過程中主要的機制，可引起粥樣斑塊不穩定，導致內皮細胞活化，使炎性因子及白細胞黏附分子的表達增多，從而使血小板聚集、斑塊不穩定甚至破裂，從而導致冠狀動脈閉塞或狹窄或血栓形成［2，3］。

HMGBl 基因定位于染色體13q12 帶，相對分子量約為30 kDa，廣泛分布于真核生物細胞核內的結合蛋白，是一種炎性介質，參與了膿毒血癥的發生、發展，且其在急性肺炎、關節炎、自身免疫性疾病等疾病中起著主要作用［4］。HMGBl 釋放途徑可以從單核-巨噬細胞中主動分泌或從壞死細胞中被動釋放而啟動炎癥反應，其在動脈粥樣硬化方面起重要的調節作用，Oozawa等［5］研究發現，HMGBl 在人類動脈粥樣硬化斑塊內表達明顯增高，HMGB1 可能參與動脈粥樣硬化發病機制并且起關鍵作用。李曼等［6］研究發現HMGBl與冠狀動脈粥樣硬化關系密切。Umahara 等［7，8］研究表明，血管內皮細胞和泡沫細胞中存在大量的HMGBl，當細胞受損和壞死時其可被大量釋放，刺激平滑肌細胞增殖、移行，參與動脈粥樣硬化以及血管成形后再狹窄等過程。Souza 等［9］研究發現隨著冠心病的嚴重程度不斷增加，而HMGBl 濃度的增高也越明顯，提示HMGBl 與冠心病嚴重程度及和死亡率關系密切。本研究結果顯示，冠心病患者血清HMGBl 水平較對照組明顯升高，不穩定型心絞痛患者血清HMGBl 水平較穩定型心絞痛明顯升高，表明隨著冠心病患者病情嚴重程度增加，HMGBl 濃度呈升高趨勢。

IL-6 也被稱作前炎性細胞因子，作為炎性反應的調節者，在血管損傷和急性心肌缺血中起主要作用，常常通過細胞及體液免疫介導炎癥和防御。IL-6 可能導致各種不同病因的CHF 患者心肌損傷及功能障礙的進展，在多種心血管疾病病理生理過程中起核心作用。IL-6 可以促使巨噬細胞分泌單核細胞趨化蛋白，使單核細胞進入血管內皮下參與斑塊形成;也可使肝細胞產生血漿纖溶酶原激活物抑制物(PAI)及急性期反應蛋白，導致冠狀動脈血栓形成［10］。Sarrafzadegan 等［11］研究發現不穩定心絞痛患者血清中IL-6 水平較穩定型心絞痛患者明顯升高，表明IL-6 在缺血性心臟疾病的發生、發展有關，研究還發現IL-6 表達水平與心血管事件的發生、發展及疾病的預后密切相關［12，13］，Wang 等［14］研究認為IL-6 是冠狀動脈硬化斑塊中的炎癥標記物，與動脈粥樣硬化和斑塊破裂的發生密切相關，不穩定型心絞痛血清中的IL-6 表達水平較穩定型心絞痛顯著升高，IL-6 的水平與斑塊的穩定性具有相關性。腫瘤壞死因子-α(TNF-α)作用于血管內皮細胞，損傷內皮細胞或導致血管功能紊亂，使血管損傷和血栓形成，通過兩種途徑作用于血管內皮細胞:一是直接損傷內皮細胞，使血中膽固醇易于在管壁內沉積從而形成動脈粥樣硬化斑塊;二是通過促使產生血小板源性生長因子促進血栓形成［15］。Li 等［16］研究發現，不穩定型心絞痛血清中TNF-α 表達水平與冠狀動脈粥樣硬化斑塊纖維帽的厚度呈負相關，胡玉華等［17］研究，不穩定型心絞痛患者CRP、TNF-α 表達水平較穩定型心絞痛患者顯著升高，其表達能夠在冠心病患者的診斷與預后判斷中發揮積極作用。本研究結果顯示，冠心病患者血清IL-6、TNF-α 水平較對照組明顯升高，不穩定型心絞痛患者血清IL-6、TNF-α 水平較穩定心絞痛明顯升高，表明隨著冠心病患者病情嚴重程度增加，IL-6、TNF-α 濃度呈升高趨勢，冠心病患者通過治療后，血清HMGBl 與IL-6、TNF-α 水平較治療前明顯降低，但不穩定型心絞痛患者血清HMGBl 與IL-6、TNF-α 水平仍明顯高于正常水平。Lin 等［18］研究發現，通過采用抗HMGBl 抗體可以抑制HMGBl 介導的IL-6、TNF-α 合成，但不能阻斷TNF-α 誘導巨噬細胞釋放IL-6，本研究通過相關性分析進一步發現，不穩定型心絞痛患者血清HMGBl 水平與IL-6、TNF-α 水平均具有正相關性。

綜上所述，血清HMGB1 參與了不穩定型心絞痛的發生、發展，可能通過與IL-6、TNF-α 協同作用有關，其升高的程度可以作為冠性病病情嚴重的判斷指標，有助于不穩定型心絞痛的病情判斷及治療效果評估。

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