張媛 戚磊 韓方偉 崔力兵 黃紹華 朱愛華



摘 ?要:為了解徐州地區雞群白血病的感染情況,從2013年3月到2013年12月在徐州部分地區的雞場隨機采樣500份,通過酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測gp27抗原陽性率以及J亞型白血病(ALV-J)和AB亞型白血病(ALV-AB)的抗體陽性率。調查顯示,徐州大多數雞場均存在白血病的感染,其中ALV-J為陽性的雞場有8所,ALV-J最高陽性率達28.6%,ALV-AB最高陽性率為23.3%,ALV-AB感染的年齡段存在一定差異,感染率最高的年齡段是75周齡;肉雞ALV-J、ALV-AB感染率較高,蛋雞也存在ALV-J感染的情況,說明ALV-J的宿主范圍正在擴大。
關鍵詞:禽白血病;ELISA;血清;gp27
中圖分類號:S858.31 ? ? 文獻標識碼:B ? ? 文章編號:1673-1085(2015)03-0048-03
禽白血病( Avian leucosis,AL) 是由禽白血病/肉瘤病毒群的病毒引起的禽類(主要是雞)各種良性和惡性腫瘤的一群疾病[1]。白血病病毒(ALV)是反轉錄病毒,目前發現有10種亞群,其中A、B、C、D、E和J亞群常見于雞,A亞群、B亞群和J亞群是最為常見的外源性病毒,也是危害養雞業最大的三個亞群。
J亞群禽白血病(AL-J)是由J亞群禽白血病病毒(ALV-J)引起的以骨髓細胞瘤為特征的雞的種源性傳染病[2],J亞群禽白病病毒是20世紀80年代末 Payne等[3]首先從肉用型雞中分離鑒定出來的禽白血病病毒新的亞群,也是發現最晚的亞群。AL可通過兩種方式傳播感染雞群,水平方式和垂直方式。雞群感染此病會導致嚴重的經濟損失,一是產生腫瘤,導致雞的死亡;二是生產指標下降,表現為產生非腫瘤綜合征[4]。如性成熟推遲、母雞產蛋率下降、蛋重下降、受精率下降和孵化率下降,由此嚴重影響養雞業的經濟效益。
本實驗采用ELISA法檢測樣本,因為ELISA法能高效檢測到蛋清中的ALSV抗原,具有敏感、簡便、快捷、適用于大面積檢測的特點,在種群凈化中得到了廣泛的應用。在對抗原的檢測中,我們檢測的是所有亞群病毒所共同擁有的核衣殼蛋白gp27。不論外源性病毒或內源性的E亞群病毒都可以產生gp27,而且在一些雞的基因組中還可能含有能表達gp27的基因片段,也能產生gp27,從而干擾了檢測結果。但如果我們同時結合抗體檢測,則可確定該雞群確實發生或有過相應的外源性禽白血病感染;另一方面,ELISA診斷試劑盒在我國還未實現商品化。隨著我國養禽業的發展以及科研、生產和檢疫的需要,建立高效、實用的禽白血病檢測方法,研究和控制禽白血病將是今后的重要任務。
因此,無論從經濟角度考慮,還是從人的健康出發,研究和控制禽白血病都是至關重要的。
1 ?材料與方法
1.1 ?樣本來源 ?由徐州疾病預防控制中心的工作人員在徐州各養殖場采集的樣本。采集了徐州賈汪區、銅山縣、云龍區、泉山區、鼓樓區、睢寧縣、邳州市、新沂市、開發區、遠大雞場的10個品種( 系)、1~75周齡的雞群共采集血液樣本500 份,分離后取血清,置于-20℃冰柜中保存,記錄其來源、品種(系)、周齡、發病等情況。
1.2 ?檢測方法 ?采用ELISA對采集的血清樣本先進行gp27抗原檢測,將檢測結果為陽性的血清樣品再進行ALV-J檢測,試劑盒由美國IDEXX公司生產,ALV-J、ALV-AB批號分別為09268-AG448、09257-EG278,具體操作方法嚴格按照檢測試劑盒的說明書執行。
2 ?結果
2.1 ?不同周齡雞群ALV-AB的感染情況 ?經過調查我們知道遠大雞場提供的100份樣品是肉種雞的血清,由表1可知,17周齡以下的30份血清中,AB亞型陽性數2份,陽性率為6.7%;18~47 周齡的40份血清中,AB亞型陽性數 5份,陽性率為12.5%;在75 周齡的30份血清中,AB亞型陽性數7份,陽性率為23.3%。不同周齡的雞群感染情況存在著較大的差異。
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2.2 ?不同縣區感染gp27檢測結果的比較 ?共檢測徐州鼓樓區、賈汪區、銅山縣、邳州市、泉山區、云龍區、睢寧縣、新沂市、開發區,9個地區400份血清樣本。由表2可知,每個雞場都感染過gp27抗原,雞場感染最高陽性率達38.3%,雞場感染最低陽性率達15.6%,從表格數據也可以看出規模化養殖的地區的禽白血病陽性率普遍偏高,因此我們認為養殖規模也是影響禽白血病感染的重要因素。
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2.3 ?不同縣區感染ALV-J檢測結果的比較 ?通過檢測將gp27呈陽性的血清挑選出來并標記,再用gp85試劑盒檢測,若結果呈陽性,則為ALV-J亞型,由表3可知,在徐州部分地區ALV-J陽性率最高的地區是開發區達到了23.8%,泉山區的為0,說明禽白血病的感染情況有地區差異。
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3 ?討論
從檢測結果可以看出徐州地區普遍存在禽白血病的感染,但感染的情況并不一致。同一種雞在不同周齡的情況下比較其感染程度,從結果看出,不同周齡都出現了感染情況,有關資料表明自然病例可于14周齡后的任何時間發病, 但通常以性成熟時的發病率最高[5]。
比較不同品種雞的 ALV-J感染情況,由實驗結果可知這與國內近期研究結果相一致,即 ALV-J主要發生于肉用型雞[6-10]。但是此次調查也表明,徐州市的一些蛋雞已經發生了ALV-J的感染,說明 ALV-J的宿主范圍正在擴大[11]。
此次調查的雞為祖代雞,是優質遺傳資源。盡管部分雞感染ALV-J后在臨床上未出現病狀,肉眼能觀察到的典型病變也很少,但對生產性能有十分顯著的影響,已逐漸成為制約地方品種雞產業健康發展的瓶頸問題之一。因此,有必要盡快采取凈化等綜合防控措施來控制其發展,為做好徐州地方品種雞的保種和選育工作奠定基礎。
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