邱燕祥 曹曼 張丹雁等
摘要[目的]建立簡單易行的紫珠鑒別方法,準確鑒別杜虹花等6種紫珠,保證臨床用藥的安全有效,為紫珠藥材及其中藥制劑質量控制提供參考。[方法]采用性狀鑒定、半顯微及顯微鑒定方法對紫珠屬6種不同紫珠葉進行鑒別。[結果]在外觀形狀方面,不同品種的紫珠形態特征較相似,但葉形、葉端、葉基、葉緣、厚薄、表面毛茸及色澤等特征有一定差異,基本可區分;在顯微特征方面,腺毛、非腺毛及草酸鈣結晶等有明顯區別。[結論]性狀鑒定方法基本可以鑒別幾種紫珠的原藥材,但個別品種難以區分;而采用半顯微及顯微鑒定方法觀察其表面制片及粉末制片的腺毛、非腺毛、結晶的形態特征以及分布特點等可鑒別紫珠各品種。準確快速且簡便經濟的顯微鑒定方法是鑒別紫珠屬植物藥材葉片的關鍵手段。
關鍵詞紫珠屬植物;性狀;半顯微;顯微;鑒別
中圖分類號S567文獻標識碼
A文章編號0517-6611(2015)16-043-06
Comparative Research of Six Kinds of Callicarpa Medicinal Herbs in the Characters,Semi Microscopic and Microscopic Identification
QIU Yanxiang1,CAO Man2,ZHANG Danyan2* et al (1.Guangdong Food and Drug Vocational Technical School,Guangzhou,Guangdong 510663; 2.Guangzhou University of Chinese Medicine,Guangzhou,Guangdong 510006)
Abstract [Objective] To establish a simple method for identification of Callicarpa formosana Rolfe and other five kinds of Callicarpa bodinieri and provide a reference for quality control of Callicarpa medicine to ensure the safe and effective clinical application.[Method] Six kinds of Callicarpa leaves were identified by using characters identification,semi microscopic identification and microscopic identification methods.[Result] The morphological characteristics of different kinds of Callicarpa are similar.But there are some discernible differences in leaf shape,leaf apex,leaf base,leaf margin,thickness,surface hairy and color features.In the microscopic features,glandular hairs,nonglandular hairs and calcium oxalate crystals of different Callicarpa have obvious difference.[Conclusion] Characters identification method can identify several Callicarpa medicinal herbs,while some varieties are difficult to distinguish.But different kinds of Callicarpa can be identified by using semi microscopic identification and microscopic identification methods to observe the morphological features and distribution characteristics of glandular hairs,nonglandular hairs and crystals.An accurate,rapid and economical microscopic identification method is important to identify different Callicarpa leaves.
Key words Callicarpa; Traits; Semi microscopic; Microscopic; Identification
基金項目廣東省科技計劃項目(2010B030700067)。
作者簡介邱燕祥(1975- ),女,廣東饒平人,副主任中藥師,從事中藥學研究。*通訊作者,教授,博士生導師,從事中藥鑒定學研究。
收稿日期20150413
中藥紫珠葉及大葉紫珠分別來源于馬鞭草科紫珠屬植物的杜虹花(Callicarpa formosana Rolfe)及大葉紫珠(Callicarpa macrophylla Vahl)的葉或帶葉嫩枝,均為藥典收載。前者具有涼血收斂止血、散瘀解毒消腫,后者具有散瘀止血、消腫止痛,兩者均用于衄血、咯血、吐血、便血、崩漏、外傷出血等癥[1]。近年來市場出現同屬多種民間習用紫珠類中藥,原植物的形態特征較為相似,但功效不盡相同,有學者曾對紫珠屬杜虹花、尖尾楓、大葉紫珠、枇杷葉紫珠、廣東紫珠、窄葉紫珠進行鑒別[2-3]。為準確區別正品及其他習用品紫珠,筆者針對杜虹花、大葉紫珠及其他地方習用品紫珠如老鴉糊(Callicarpa girldii Hesse ex Rehd.)、枇杷葉紫珠(Callicarpa kochiana Makino)、廣東紫珠(Callicarpa kwangtungensis Chun.)、窄葉紫珠(Callicarpa japonica Thunb.var.angustata Rehd.)進行分析和鑒定,建立快速、準確的鑒別方法,為確保臨床用藥安全有效、進一步規范紫珠類中藥的臨床應用提供科學依據。
1材料與方法
1.1試驗材料
杜虹花、大葉紫珠、老鴉糊、枇杷葉紫珠原植物采自廣州中醫藥大學大學城校區2號藥山,廣東紫珠、窄葉紫珠購自廣州清平藥材市場,以上各品種原植物及藥材均經廣州中醫藥大學張丹雁教授鑒定分別為馬鞭草科紫珠屬杜虹花(Callicarpa formosana Rolfe)、大葉紫珠(Callicarpa macrophylla Vahl)、老鴉糊(Callicarpa girldii Hesse ex Rehd.)、枇杷葉紫珠(Callicarpa kochiana Makino)、廣東紫珠(Callicarpa kwangtungensis Chun.)、窄葉紫珠(Callicarpa japonica Thunb.var.angustata Rehd.)。
1.2試驗儀器與試劑
顯微鏡(X5ZH COIC,重慶光學儀器廠)、體視鏡、電子目鏡、電子天平(拓普域DS1500A)、水合氯醛、稀甘油、酒精燈、打粉機、載玻片、蓋玻片、鑷子。
1.3試驗方法
1.3.1性狀鑒定。采用傳統經驗鑒別方法對6種紫珠樣品的葉片形狀、顏色、葉緣、表面覆蓋物等外觀特征進行觀察和比較鑒別。
1.3.2半顯微鑒定。采用體視鏡2.0~4.5倍觀察樣品紫珠葉上、下表面絨毛顏色類型、葉脈茸毛密集程度、葉脈、腺點等,并記錄整理。
1.3.3顯微鑒定。采用顯微鏡觀察葉片的整體透化及粉末透化裝片,觀察其表面的腺毛、非腺毛的形態及晶體類型等,利用顯微圖像分析系統測量并比較相關數據。
2結果與分析
2.1性狀鑒定
2.1.1杜虹花。葉片卵狀橢圓形或橢圓形,長6~15 cm,寬3~8 cm。頂端通常漸尖,基部鈍或渾圓。邊緣具細鋸齒。表面被短硬毛,稍粗糙;背面被灰黃色茸毛,側脈8~12對,主脈、側脈和網脈在背面隆起。葉柄粗壯,長1.0~2.5 cm,葉柄及主脈密被灰黃色茸毛(圖1)。
圖1杜虹花葉的上表面(a)和下表面(b)形態特征
2.1.2大葉紫珠。葉片長橢圓形、卵狀橢圓形或長橢圓狀披針形,長10~23 cm,寬5~11 cm,頂端短漸尖,基部鈍圓或寬楔形,邊緣具細鋸齒。表面被短毛,脈上較密。背面密生灰白色茸毛。側脈8~14對,細脈在表面稍下陷。葉柄粗壯,長1~3 cm,密生灰白色茸毛(圖2)。
圖2大葉紫珠葉的上表面(a)和下表面(b)形態特征
2.1.3老鴉糊。葉片紙質,寬橢圓形至披針狀長圓形,長5~15 cm,寬2~7 cm,頂端漸尖,基本楔形或下延成狹楔形。邊緣有鋸齒。表面黃綠色,稍有微毛。背面淡綠色,疏被毛茸。側脈8~10對,主脈、側脈和細脈在葉背隆起,細脈近平行。葉柄長1~2 cm(圖3)。
圖3老鴉糊葉的上表面(a)和下表面(b)形態特征
2.1.4枇杷葉紫珠。葉片長橢圓形、卵狀橢圓形或長橢圓狀披針形,長12~22 cm,寬4~8 cm,頂端漸尖或銳尖,基部楔形。邊緣有鋸齒。表面無毛或疏被毛,通常脈上較密。背面密生銹褐色茸毛,側脈10~18對,在葉背隆起。葉柄長1~3 cm,葉柄密生銹褐色茸毛(圖4)。
圖4枇杷葉紫珠葉的上表面(a)和下表面(b)形態特征
2.1.5廣東紫珠。葉片紙質,狹卵圓狀披針形、披針針形或線狀披針形,長15~26 cm,寬3~5 cm;頂端漸尖,基部狹楔形,邊緣中上部有細鋸齒,兩面無毛,背面密生顯著的細小黃色腺點。側脈12~15對。葉柄長1.0~1.5 cm(圖5)。
圖5廣東紫珠葉的上表面(a)和下表面(b)形態特征
2.1.6窄葉紫珠。葉片紙質,易碎,卷曲。展平后,呈倒披針形或披針形,綠色或略帶紫色,長6~10 cm,寬2.0~3.5 cm,葉片兩面基本無毛,邊緣中部以上具鋸齒。側脈6~8對,主脈、側脈在兩面稍隆起,葉柄極短或近無柄(圖6)。氣微香,味苦澀。
圖6窄葉紫珠葉的上表面(a)和下表面(b)形態特征
從6種紫珠的葉柄及葉肉顏色、葉形、葉端、葉基、葉緣及表面毛茸顏色等藥材性狀上區分,杜虹花頂端通常漸尖,基部鈍或渾圓,邊緣具細鋸齒,葉柄密生灰黃色毛茸,上表面被短硬毛,下表面被灰黃色毛茸;大葉紫珠頂端短漸尖,基部鈍圓或寬楔形,邊緣具細鋸齒,葉柄及葉下表面密生灰白色毛茸;老鴉糊葉形與杜虹花較相似,頂端漸尖,基部楔形或下延成狹楔形,且邊緣有鋸齒,但老鴉糊葉片紙質,表面稍有微毛,背面疏被毛茸,細脈近平行;枇杷葉紫珠頂端漸尖或銳尖,基部楔形,邊緣有鋸齒,葉柄及葉下表面密生銹褐色毛茸;廣東紫珠頂端漸尖,基部狹楔形,邊緣中上部有細鋸齒,葉片上、下表面較光滑,幾乎均無毛;窄葉紫珠呈倒披針形或披針形,邊緣中部以上具鋸齒,葉上、下表面基本無毛,葉片綠色或略帶紫色。
2.2半顯微(體視鏡)鑒定從6種紫珠葉的體視鏡(2.0~2.4倍)觀察結果(表1)可以看出,杜虹花正面葉柄、主脈均密被灰黃色茸毛,葉肉被短硬毛,稍粗糙,有稀疏的黃色腺點,背面葉柄及主脈密被灰黃色茸毛,葉肉被稀疏的棕黃色小茸毛及金黃色的腺點;大葉紫珠正面葉柄、主脈、側脈均有灰白色分枝茸毛,葉肉疏被短毛,背面密生灰白色分枝毛,兩面均有黃色腺點,隱于毛中;老鴉糊葉柄黑棕色,疏被灰白色茸毛,正面及背面相似,主脈、側脈及葉肉疏被茸毛,背面具有細小黃色腺點;枇杷葉紫珠正面葉柄、主脈密生銹褐色分枝茸毛,葉肉及側脈無毛或疏被毛,背面密被銹褐色的分枝茸毛、星狀茸毛;廣東紫珠的背面密生黃色腺點;窄葉紫珠正面葉脈上稍有白色星狀毛。
2.3顯微鑒定從6種紫珠的整體及粉末透化顯微鑒別(表2~3)可
看出,葉片上、下表皮著生的毛茸類型可作為顯微鑒別的主要依據。6種紫珠葉的顯微結構均具備腺鱗;杜虹花具有小腺毛、星狀毛、多輪分枝毛及單輪分枝毛;大葉紫珠具有多輪分枝毛及單輪分枝毛,無星狀毛;老鴉糊具有星狀毛,且呈多輪迭生的狀態;枇杷葉紫珠均具有多輪分枝毛、單輪分枝毛及星狀毛;廣東紫珠具有多細胞非腺毛;窄葉紫珠具有單、多細胞非腺毛和星狀毛。此外,杜虹花及枇杷葉
紫珠均含有方晶,其中杜虹花的方晶極多;大葉紫珠含有簇
表16種紫珠葉的半顯微(體視鏡)鑒定結果
品名上表面下表面
杜虹花葉柄密被灰黃色茸毛。主脈及葉肉疏被灰黃色茸毛葉柄及主脈密被灰黃色有光澤茸毛,葉肉均勻被毛,具細小黃色腺點
大葉紫珠葉柄、主脈密生灰白色茸毛。葉肉綠色,疏被灰白色茸毛,密被黃色小腺點葉柄青綠色、主脈、葉肉密生灰白色茸毛,腺點隱于毛中
老鴉糊葉柄黑棕色,疏被灰白色茸毛,表面黃綠色,稍有微毛葉柄黃棕色,葉肉淡綠色,主脈、側脈及葉肉疏被茸毛和細小黃色腺點。細脈近平行
枇杷葉紫珠葉柄及主脈密生銹褐色茸毛。表面銹色,葉肉及側脈幾乎無毛密生灰黃色有光澤茸毛,兩面均被不明顯的黃色腺點
廣東紫珠葉柄及葉肉均無毛無毛,密生黃色小腺點
窄葉紫珠葉脈上被少許茸毛及大量黃色腺點,葉肉幾乎無毛無毛,有少量黃色腺點
表26種紫珠葉的整體顯微鑒定結果
品種上表面下表面
杜虹花分枝毛、星狀毛、單細胞非腺毛分枝毛、星狀毛、單細胞非腺毛(圖7)
大葉紫珠葉脈密被多輪分枝毛,葉肉被多細胞非腺毛密被多輪分枝毛(圖8)
老鴉糊疏被單細胞非腺毛疏被單細胞非腺毛、多輪迭生星狀毛(圖9)
枇杷葉紫珠葉脈及葉肉被單細胞非腺毛密被多輪分枝毛、星狀毛(圖10)
廣東紫珠無毛無毛(圖11)
窄葉紫珠疏被單細胞非腺毛,星狀毛疏被單細胞非腺毛,星狀毛(圖12)
43卷16期
邱燕祥等6種紫珠屬藥材的性狀·半顯微及顯微比較鑒別研究
表36種紫珠葉粉末組織透化裝片鑒定
品種非腺毛腺毛(小腺毛及腺鱗)晶體
杜虹花(圖13)多輪分枝狀(長104~167 μm)、單輪分枝毛、星狀毛、單細胞非腺毛(有雕紋)、多細胞非腺毛(2個細胞,長91~143 μm,有雕紋)小腺毛、腺鱗圓球形,直徑48~59 μm,多個細胞排列成輻射狀方晶(極多)
大葉紫珠(圖14)多輪分枝毛(量多,主要存在于葉脈,主枝長180~293 μm,分枝長60~93 μm,節間距離約18~34 μm)、單輪分狀毛(主要存在于葉下表面的葉肉里面)、多細胞非腺毛(2個細胞,長150~162 μm,主要存在于葉上表面的葉肉里面)腺鱗圓球形,多個細胞排列成輻射狀,直徑46~54 μm,內含淺黃色油質簇晶
老鴉糊(圖15)多輪迭生星狀毛、單細胞非腺毛、多細胞非腺毛(多2~3個細胞組成)腺鱗扁圓球形,多個細胞排列成輻射狀無
枇杷葉紫珠(圖16)多輪分枝毛(量多,主要存在葉下表面葉肉及葉脈,主枝長377~552 μm,分枝長200~258 μm,節間距離約 43~59 μm)、單輪分枝毛、星狀毛(量多,主要存在于葉下表面,長128~175 μm)、單細胞非腺毛(與葉肉細胞連一起,呈耙狀,長19~37 μm,主要存在于葉上表面)、多細胞非腺毛腺鱗類圓球形或不規則,8個細胞排列成輻射狀,內含淺黃色油質;直徑約53~65 μm,頭部由6~8個細胞排列成輻射狀方晶
廣東紫珠(圖17)單細胞非腺毛小腺毛無
窄葉紫珠(圖18)星狀毛、單細胞非腺毛小腺毛、腺鱗類圓球形,多個細胞排列成輻射狀方晶、簇晶
圖7杜虹花整體透化裝片下表面
圖8大葉紫珠整體透化裝片下表面
圖9老鴉糊整體透化裝片下表面
圖10枇杷葉紫珠整體透化裝片下表面
圖11廣東紫珠整體透化裝片下表面
圖12窄葉紫珠整體透化裝片下表面
圖13杜虹花粉末顯微特征
圖14大葉紫珠粉末顯微特征
圖15老鴉糊粉末顯微特征
圖16枇杷葉紫珠粉末顯微特征
圖17 廣東紫珠粉末顯微特征
晶;窄葉紫珠含有方晶、簇晶;老鴉糊無草酸鈣晶體,故各紫珠葉片中晶體類型可以作為輔助鑒別依據。
3討論
長期以來,紫珠屬的幾種植物一直存在混用或各地名實混淆的現象,作為同屬植物,無論在植物形態還是藥材形狀上均有較多的共同點,該研究總結歸納了6種紫珠在外觀性
狀以及顯微上的鑒別特征,在外觀性狀上,主要通過觀察葉
的形態特征、顏色及表面毛茸等進行區分;在顯微特征上,主
圖18窄葉紫珠粉末顯微特征
要通過觀察腺毛、非腺毛的形態、分布和數量,以及草酸鈣結晶類型等進行區分。準確快速且簡便經濟的顯微鑒定方法是鑒別紫珠屬植物藥材葉片的關鍵手段,該研究為確保紫珠臨床用藥安全有效及其質量控制提供參考。
參考文獻
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國家藥典委員會.中國藥典(一部)[S].北京:中國醫藥科技出版社,2010:320.
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