6種消毒劑對養殖海水中細菌的殺滅效果

王成桂　李旋　楊世平等

摘要[目的] 探討6種消毒劑對養殖海水中細菌的殺滅效果。[方法] 使用不同濃度梯度的二溴海因、聚維酮碘、福爾馬林、富氯、漂粉精和次氯酸鈉等6種消毒劑對養殖海水進行處理，測定不同時間段細菌的殺滅率。[結果] 0.50～1.00 mg/L的二溴海因對細菌無明顯的殺滅效果；0.50～1.00 mg/L的聚維酮碘對細菌在3和6 h的殺滅率為24.50%～44.30%，其他濃度的聚維酮碘對細菌的殺滅藥效較二溴海因持久，說明聚維酮碘的殺菌效果強于二溴海因；僅5.00 mg/L的福爾馬林在12 h的殺滅率略高于二溴海因，相同濃度的二溴海因對細菌的藥效要強于福爾馬林；漂粉精在12 h對細菌無殺滅效果；2.50 mg/L富氯在1 h對細菌的殺滅率為99.90%，說明富氯對細菌的藥效強于漂粉精；各濃度的次氯酸鈉對細菌的藥效都強于富氯。僅5.00和10.00 mg/L聚維酮碘對細菌的殺滅效果低于相同濃度的二溴海因和福爾馬林。[結論]6種消毒劑的殺菌效果依次為福爾馬林<二溴海因<聚維酮碘<漂粉精<富氯<次氯酸鈉，而其殺滅弧菌的效果依次為聚維酮碘<福爾馬林<二溴海因<漂粉精<富氯<次氯酸鈉，含氯消毒劑殺菌效果強于非含氯消毒劑。

關鍵詞消毒劑；養殖海水；細菌；殺滅效果

中圖分類號S949文獻標識碼A文章編號0517-6611（2015）16-152-03

Study on the Killing Effect of Six kinds of Disinfectants on Bacteria in Aquaculture Seawater

WANG Chenggui， LI Xuan， YANG Shiping， SUN Chengbo* et al

（College of Fisheries， Guangdong Ocean University， Zhanjiang， Guangdong 524088）

Abstract [Objective] The aim was to study the killing effect of six kinds of disinfectants on bacteria in aquaculture seawater. [Method] The auquculture seawater was disinfected with different concentration gradients of DBDMH， povidone iodine， formaldehyde， chlorine， calcium hypochlorite， sodium hypochlorite. The killing rate on bacteria was determined at different time. [Result] DBDMH at 0.50-1.00 mg/L had no obvious killing effects. The killing rate of povidone iodine at 0.50-1.00 mg/L on bacteria after 3 and 6 hours was 24.50%-44.30% and the killing efficiency of povidone iodine at other concentrations on bacteria was more permanent than that of DBDMH， which indicated that the bactericidal effects of povidone iodine were stronger than that of DBDMH. Only the killing rate of 5.00 mg/L formaldehyde after 12 h was slightly higher than that of DBDMH， the killing efficiency of DBDMH at the same concentration was stronger than that of formaldehyde. Calcium hypochlorite had no killing effect on bacteria after 12 h. The killing rate of 2.50 mg/L chlorine on bacteria after 1 h was 99.90%， which indicated that the killing efficiency of chlorine was stronger than that of calcium hypochlorite. The killing efficiency of sodium hypochlorite at different concentrations on bacteria was stronger than that of chlorine. Only the killing efficiency of povidone iodine at 5.00 and 10.00 mg/L on bacteria was worse than that of DBDMH and formaldehyde at the same concentrations. [Conclusion] The bactericidal effects of six kinds of disinfectants was formaldehyde < DBDMH < povidone iodine < calcium hypochlorite < chlorine < sodium hypochlorite. The killing effects of six kinds of disinfectants on vibrio was povidone iodine < formaldehyde < DBDMH < calcium hypochlorite < chlorine < sodium hypochlorite. The bactericidal effects of chlorinecontaining disinfectants were stronger than that of nonchlorine disinfectants.

Key words Disinfectant；Aquaculture seawater；Bacteria；Killing effects

我國是海水養殖業發達的國家，養殖面積和產量均居世界第一，海水養殖為國民經濟發展作出了重要貢獻。2008年，我國水產品總產量為4 895.6萬t，其中海水養殖產量1 340.3萬t，占水產品總產量的27.4%[1]。海水養殖業在水產業中占有重要地位。2009 年世界水產養殖總產量為7.304 5×107 t，其中海水養殖產量3.920 7×107 t，占世界水產養殖總產量的53.68%[2]。近年來，隨著環境污染和海區富營養化，細菌病害大量暴發[3-10]，給海水養殖業造成巨大的經濟損失，因受到各種病害的影響，2013年全球養殖對蝦產量比2012年減少23%[11]。為了殺滅病菌和清除病源，在海水養殖業廣泛使用消毒劑，如防治對蝦發光病[12-13]、魚類細菌性疾病。各種消毒劑對細菌的藥效強度不同，殺滅效果明顯不同。筆者分別使用不同濃度的二溴海因、聚維酮碘、福爾馬林、富氯、漂粉精和次氯酸鈉等6種常見消毒劑對養殖海水進行處理，研究6種消毒劑對養殖海水中細菌的殺滅效果，對指導生產有一定的實際意義。

1材料與方法

1.1試驗時間、地點及試驗用水

試驗于2014年7月1日至8月30日在廣東海洋大學東海島海洋生物研究基地進行。試驗用水為外海水，鹽度26‰～28‰，pH 8.0～8.2，溫度27～28 ℃，試驗用桶為300 m3大小的玻璃鋼桶。

1.2試驗設計

用二溴海因、聚維酮碘、福爾馬林、富氯、漂粉精和次氯酸鈉6種常見的消毒劑分別按不同的濃度分批次處理試驗海水，每個濃度設置3個平行組。其中3種含氯消毒劑的使用濃度按有效氯計算，有效氯的測定采用藍墨水滴定法[14]。二溴海因和聚維酮碘試驗使用濃度分別為0.50、1.00、3.00、5.00、10.00 mg/L；福爾馬林試驗使用濃度為3.00、5.00、10.00、20.00、50.00 mg/L；富氯試驗使用濃度為0.125、0.25、0.75、1.25、2.50 mg/L；漂粉精試驗使用濃度為0.50、1.50、2.50、50、10.00 mg/L；次氯酸鈉試驗使用濃度為1.00、3.00、5.00、10.00 mg/L；前3種消毒劑的試驗時間梯度分別為3、6和12 h，富氯的試驗時間梯度分別為1、3和6 h，漂粉精和次氯酸鈉的試驗時間梯度為1、6和12 h。

1.3細菌數量的測定

測定試驗海水中異養細菌總數和弧菌總數。細菌總數的測定利用常規稀釋培養法，弧菌總數的測定采用選擇性培養法，異養細菌和弧菌分別用2216E、TCBS培養基培養，儀器用廣東省醫療器械廠生產的生化培養箱[5-6]，24 h后計算菌落數量。

2結果與分析

2.1二溴海因對細菌的殺滅效果

由表1可知，二溴海因濃度在0.50和1.00 mg/L范圍時不能殺滅細菌，對細菌的殺滅率為0；當二溴海因濃度為3.00 mg/L時，3 h后對細菌有49.30%的殺滅效果，然后下降，12 h后無殺滅效果；當二溴海因濃度為5.00和10.00 mg/L時，對細菌有殺滅效果，6 h藥效最強，最高可殺滅70.10%的細菌，12 h有反彈現象，殺滅率下降。用藥濃度在0.50、1.00和3.00 mg/L范圍時能有效殺滅弧菌，6 h藥效最強，達到100%，12 h有輕微反彈；當二溴海因濃度5.00 mg/L時，3、6 h藥效較強，對弧菌的殺滅率達100%，12 h有輕微反彈；當二溴海因濃度10.00 mg/L時，3～12 h對弧菌的殺滅率達100%。

表1不同濃度二溴海因對細菌的殺滅效果

二溴海因濃度mg/L時間h

細菌數量×103ind/L殺滅率%

弧菌數量×103ind/L殺滅率%

0（CK）7.2012.30

0.5038.4502.9076.40

616.4000100

1227.6000.2098.40

1.0038.3000.7094.30

611.9500100.00

1240.0000.2098.40

3.0033.6549.300.1598.80

66.657.640100

1210.3000.5095.90

5.0033.6549.300100

62.6663.100100

125.1029.20099.20

10.0033.5051.400100

62.1570.100100

125.8019.400100

2.2聚維酮碘對細菌的殺滅效果

由表2可知，當聚維酮碘濃度在0.50和1.00 mg/L時，聚維酮碘對細菌的殺滅率3、6 h內最高為44.30%，12 h無殺滅效果；當聚維酮碘濃度為3.00、5.00和10.00 mg/L時，聚維酮碘對細菌的殺滅率在3～6 h內最高為68.20%，3 h藥效最強，6、12 h有反彈現象，殺滅率下降。當聚維酮碘濃度為0.50 mg/L時，聚維酮碘對弧菌無殺滅效果；當聚維酮碘濃度為1.00 mg/L時，3、6 h無殺滅效果，12 h殺滅率為11.10%；當聚維酮碘濃度為3.00和5.00 mg/L時，12 h藥效最佳，最高殺滅率為44.40%；當聚維酮碘濃度為10.00 mg/L時，6 h藥效最佳，殺滅率為52.80%；12 h殺滅率下降，為44.40%。

2.3福爾馬林對細菌的殺滅效果

由表3可知，當福爾馬林濃度在3.00和10.00 mg/L時，福爾馬林對細菌的殺滅效果隨用藥時間的延長而增強，殺滅率在12 h時最大，為40.40%；當福爾馬林濃度為20.00和10.00 mg/L時，3 h藥效最強，隨后下降。用藥濃度在3.00、5.00、10.00和20.00 mg/L時，福爾馬林對弧菌的藥效在6 h最強，最大達100%，12 h有輕微反彈；當福爾馬林濃度為50.00 mg/L時，3 h殺滅率達100%，至12 h沒反彈。

表2不同濃度聚維酮碘對細菌的殺滅效果

聚維酮碘濃度mg/L時間h

細菌數量×103ind/L殺滅率%

弧菌數量×103ind/L殺滅率%

0（CK）1.591.80

0.5031.1130.201.800

61.2024.502.200

122.470.004.350

1.0030.8944.301.850

61.1726.702.260

121.6801.6011.10

3.0030.7354.103.350

61.1726.701.705.56

121.2521.701.4022.20

5.0030.6758.202.250

60.8347.801.3027.80

121.2024.501.0044.40

10.0030.5168.201.5016.70

60.8248.300.8552.80

120.9639.901.0044.40

表3不同濃度福爾馬林對細菌的殺滅效果

福爾馬林濃度mg/L時間h

細菌數量×103ind/L殺滅率%

弧菌數量×103ind/L殺滅率%

0（CK）1.7616.00

3.0031.731.4211.7026.90

61.5412.505.3066.90

121.1833.005.8063.75

5.0031.656.2711.6027.50

61.5313.100.6096.30

121.1733.605.7064.40

10.0031.5412.308.0549.70

61.1534.300.1099.40

121.0540.400.1599.10

20.0030.2883.904.3572.80

60.7557.300100

1227.5000.1099.40

50.0030.0895.200100

60.2586.000100

128.1000100

2.4富氯對細菌的殺滅效果

由表4可知，當富氯濃度在0.125 mg/L時，富氯對細菌的殺滅效果在3 h時最佳，6 h反彈明顯，無效果；當富氯濃度為0.25和0.75 mg/L時，1 h藥效最佳，隨后下降，在6 h無效果，殺滅率為0；當富氯濃度1.25和2.50 mg/L時，1 h時藥效最佳，隨后下降，在6 h下降更為明顯。當富氯濃度為0.125和0.25 mg/L時，富氯對弧菌的藥效在3 h時最佳，殺滅率最高（91.60%）；當富氯濃度為0.75、1.25和2.50 mg/L時，1 h、3 h的殺滅率均為100%，6 h反彈明顯，殺滅率下降。

2.5漂粉精對細菌的殺滅效果

由表5可知，各濃度的漂粉精對細菌的藥效在1 h時最佳，殺滅率最高（99.90%），6 h下降，12 h明顯反彈，殺滅率均為0。各濃度的漂粉精對弧菌的藥效在1 h最佳，當漂粉精濃度在2.5 mg/L及以上1 h時可達100%，6 h輕微下降，12 h下降明顯。

表4不同濃度富氯對細菌的殺滅效果

富氯濃度mg/L時間h

細菌數量×103ind/L殺滅率%

弧菌數量×103ind/L殺滅率%

0（CK）1.8111.30

0.12511.5911.9013.000

31.3624.903.1072.60

62.5704.5559.70

0.2510.9547.404.1063.70

30.9945.200.9591.60

65.4505.4052.20

0.7515.0572.000100

30.9050.100100

67.9001.1589.80

1.251099.800100

30.0994.900100

61.0840.200.9092.00

2.501099.900100

30.0497.600100

60.3878.900.0599.60

表5不同濃度漂粉精對細菌的殺滅效果

漂粉精濃度mg/L時間h

細菌數量×103ind/L殺滅率%

弧菌數量×103ind/L殺滅率%

0（CK）7.8019.70

0.5011.3383.000.2598.70

64.3044.901.2093.90

1266.00035.000

1.5010.3595.500.0599.70

64.4043.600.9595.20

12127.0009.0054.30

2.5010.1098.700100

61.0586.500.0599.70

1221.7007.3062.90

5.0010.0199.900100

60.1797.900.4098.00

1247.0004.7076.10

10.0010.0199.900100

60.1198.600100

127.8004.0079.70

2.6次氯酸鈉對細菌的殺滅效果

由表6可知，次氯酸鈉濃度為1.00 mg/L時，次氯酸鈉對細菌的藥效在6 h時最強，殺滅率為49.10%；當次氯酸鈉濃度為3.00和5.00 mg/L時，次氯酸鈉對細菌的藥效在1 h時最強，殺滅率最大為99.70%，在12 h時最差；當次氯酸鈉濃度為10.00 mg/L時，6 h藥效最強，殺滅率為99.90%。當次氯酸鈉濃度在1.00、3.00和5.00 mg/L時，在1 h時藥效最強，都為100%，此后下降；當次氯酸鈉濃度為10.00 mg/L時，1～12 h殺滅率為100%，沒有反彈現象。

3討論

0.50～1.00 mg/L二溴海因對細菌無明顯的殺滅效果，殺滅率為0；0.50～1.00 mg/L的聚維酮碘對細菌在3、6 h的

表6不同濃度次氯酸鈉對細菌的殺滅效果

次氯酸鈉濃度mg/L時間h

細菌數量×103ind/L殺滅率%

弧菌數量×103ind/L殺滅率%

0（CK）2.872.00

1.0011.9631.700100

61.4649.101.5025.00

121.6642.202.650

3.0010.3488.200100

61.1460.501.4030.00

121.6343.200.5075.00

5.0010.0199.700100

60.1694.500100

121.5844.900.1095.00

10.0010.0199.800100

6099.900100

12099.900100

殺滅率最低為24.50%，最高為44.30%，有部分殺滅效果，其他濃度組的聚維酮碘對細菌的殺滅藥效較二溴海因持久，聚

維酮碘的殺菌效果強于二溴海因；5.00和10.00 mg/L的福爾馬林在3個時間段中僅5.00 mg/L濃度在12 h的殺滅率略高于二溴海因，其他5個時間段均低于二溴海因，相同濃度的二溴海因對細菌的藥效要強于福爾馬林；富氯的主要成分為三氯異氰尿酸鈉，漂粉精的主要成分為次氯酸鈣，漂粉精在12 h時對細菌殺滅無效果，其他濃度在12 h亦無明顯藥效，2.50 mg/L富氯在1 h時對細菌的殺滅率為99.90%，高于漂粉精，說明富氯對細菌的藥效強于漂粉精；次氯酸鈉在各濃度組對細菌的藥效強于富氯。對弧菌的殺滅效果分析發現，僅5.00和10.00 mg/L聚維酮碘的效果低于相同濃度的二溴海因和福爾馬林，其他消毒劑對弧菌的殺滅效果與對細菌的殺滅效果強度次序相同。綜合分析，6種消毒劑殺滅細菌的效果依次為福爾馬林<二溴海因<聚維酮碘<漂粉精<富氯<次氯酸鈉，殺滅弧菌的效果依次為聚維酮碘<福爾馬林<二溴海因<漂粉精<富氯<次氯酸鈉，含氯消毒劑殺菌效果強于非含氯消毒劑。

海水養殖對細菌病的預防是關鍵的環節，定期消毒是主要措施，消毒劑的使用在殺滅病害細菌的同時，亦帶來各種影響。氯溴等鹵素與水中的碳氫有機化合物形成三鹵甲烷等多種鹵代有機物，對人體和飼養動物具致癌、致突變誘發作用[15]。目前，各消毒劑所存在的最主要問題是毒性和殘留對水產動物、人類以及環境的損害，不符合健康養殖規范要求。如果消毒劑克服了以上弊端，在水產動物的病害防治上仍有著廣闊的前景。采用其他方式替代消毒劑預防細菌性疾病，水產用無公害制劑開發和使用不妨為一種有效方法。目前運用較多的是各種微生態制劑的使用，如在海水養殖池塘投放光合細菌、芽孢類等微生微制劑，形成一定的優勢有益種群，以抑制各類有害病菌的生長繁殖[16-17]。

安徽農業科學2015年

參考文獻

[1] 陳雨生，房瑞景，喬娟，等.中國海水養殖業發展研究[J].農業經濟問題，2012（6）：72-77.