升血顆粒質量標準研究

【摘 要】本實驗對升血顆粒的質量標準進行研究。含量測定方法：采用奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm），甲醇-0.1%磷酸溶液（9：91）為流動相，檢測波長為218nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃；鑒別方法：點羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水（4：1：1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.2%茚三酮乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。結論：本法簡便、準確，可用于升血顆粒的質量標準研究。

【關鍵詞】升血顆粒；質量標準；研究

升血顆粒由黃芪、丹參、麥門冬、太子參等組成。升血顆粒具有增強人體免疫力，調節植物神經系統的功能。丹參具有活血調經、祛瘀止痛、涼血消癰、清心除煩、養血安神的功效。丹參素具有縮小心肌梗死范圍、抑制血小板的聚集、增加血小板膜的流動性、抗脂質蛋白氧化、降低血膽固醇、保護血管屏障、擴張冠狀動脈、改善神經功能缺損等作用。太子參，又名孩兒參，為石竹科多年生草本植物異葉假繁縷的塊根。太子參具有補益脾肺，益氣生津的功效。《陜西中草藥》記載“：補氣益血，健脾生津。治病后體虛，肺虛咳嗽，脾虛腹瀉，小兒虛汗，心悸，口干，不思飲食。”太子參常用于治療脾虛食少、心悸、水腫、消渴、精神疲乏等[1-5]。本實驗對升血顆粒的質量標準進行研究。

1.儀器與試藥

1.1儀器

高效液相色譜儀：安捷倫1100泵；安捷倫檢測器；安捷倫色譜工作站；奧豪斯Explorer專業型分析天平（奧豪斯儀器上海有限公司）；半自動點樣儀LINOMAT Ⅳ（瑞士CAMAG）；SHB-（III）循環水式真空泵（上海楚柏實驗室設備有限公司）；DHG-9240A電熱恒溫鼓風干燥箱（上海和呈儀器制造有限公司）；SCQ-5201超聲波清洗器（上海聲彥超聲儀器有限公司）；XSYF-D 實驗室廢水處理設備（北京湘順源科技有限公司）；ELGA超純水器（上海瀾銳儀器科技有限公司）；RE-5210A旋轉蒸發器（上海比朗儀器有限公司）。

1.2色譜柱

奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm）。

1.3對照品

丹參素鈉。

1.4試劑

甲醇（上海嘉浩化工有限公司）、磷酸（上海海曲化工有限公司）、甲酸（廣西明利化工有限公司）、茚三酮（鄭州江美化工產品有限公司）、冰醋酸（濟南郭氏偉業化工有限公司）、正丁醇（廣西明利化工有限公司）、乙醇（鄭州江美化工產品有限公司）。

1.5試藥

升血顆粒。

2.測定方法確定

2.1色譜條件

依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下[6-12]。流動相：甲醇-0.1%磷酸溶液（9：91）為流動相，檢測波長：218nm，流速：1.0ml·min-1。柱溫：30℃。理論板數按丹參素鈉峰計算應不得低于2000。

2.2對照品溶液的制備

精密稱取丹參素鈉對照品適量，置容量瓶中，加流動相制成每1mL含20μg的溶液，即得。

2.3供試品溶液的制備

取升血顆粒適量，研細，精密稱定，加20毫升水超聲提取5分鐘，過濾，蒸干濾液，殘渣加流動溶解轉移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，即得。

2.4專屬性試驗

取黃芪、麥門冬、太子參等藥材按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，按上述實驗方法檢測，結果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5精密度試驗

取對照品溶液按上述色譜條件，精密吸取20μl，連續進樣6次，記錄峰面積。結果，RSD=0.66%，表明本方法精密度良好。

2.6對照品的線性考察

精密稱取適量丹參素鈉對照品，加入流動相溶液使溶解分別配制成每毫升含10、20、30、40、50、60、120μg的溶液。分別精密上述溶液吸取20μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標，對照品進樣量（X）為橫坐標，繪制標準曲線。結果表明，丹參素鈉在10～120μg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。

2.7重現性試驗

稱取同一批的升血顆粒樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結果RSD為0.55%，結果表明此方法的重現性良好。

2.8準確度試驗

取對照品適量分別精密加入升血顆粒中，按含量測定進行測定，計算回收率為99.6%，RSD為0.65%。

2.9樣品含量測定

依照上述含量測定方法，再按外標法以峰面積計算樣品的含量，結果三批樣品的含量分別為80μg/g、82μg/g、81μg/g。

3.鑒別

取升血顆粒適量（約相當于太子參藥材1g），加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過，回收甲醇后的殘渣，再溶于甲醇2ml中，作為供試品溶液。另取太子參對照藥材1g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過，回收甲醇后的殘渣，再溶于甲醇2ml中，作為對照品溶液。取黃芪、丹參、麥門冬等藥材按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，按上述方法制成陰性對照樣品。吸取上述溶液，分別點于同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水（4：1：1）為展開劑，置用展開劑預飽和15分鐘的展開缸內，展開，取出，晾干，噴以0.2%茚三酮乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，而陰性對照無干擾。

4.結論

本實驗分離效果好、方法簡便、快捷、準確、專屬性好，可用于升血顆粒中丹參素鈉的含量測定。樣品與太子參對照藥材對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性無干擾。該鑒別方法專屬性強，操作簡單，可用于升血顆粒中太子參的鑒別。

【參考文獻】

[1]倪受東，夏倫祝，徐先祥，張睿.太子參多糖對四氧嘧啶糖尿病小鼠的治療作用[J].安徽醫藥，2010（05）.

[2]熊何健，龐杰，謝主興.太子參提取物體外抗氧化活性研究[J].南開大學學報（自然科學版），2009（06）.

[3]易智彪，薄雯映，許冬瑾，賴小平.太子參HPLC指紋圖譜研究[J].中草藥，2009（08）.

[4]沈祥春，彭佼，李淑芳，方泰惠，段金廒.太子參正丁醇提取部位對大鼠急性心肌梗死誘發心肺損傷的保護作用[J].中華中醫藥雜志，2010（05）.

[5]韓邦興，朱志祥，姚勇，李媛媛，陳鈞.不同產地太子參多糖、氨基酸含量比較分析[J].中成藥，2010（03）.

[6]黃蘭芷，付超美，胡慧玲，周海燕.HPLC法測定抗癌顆粒中丹參素鈉的含量[J].成都中醫藥大學學報，2006（02）.

[7]李海燕，李振國，宋漢敏，康建，王健.HPLC測定冠心生脈口服液中丹參素鈉的含量[J].中國實驗方劑學雜志，2010（12）.

[8]黃衍民，黃炳亮，張亞斌，潘留華，李嫦娥.高效液相色譜法測定丹紅注射液中丹參素鈉的含量[J].中國醫院藥學雜志，2007（11）.

[9]劉鐵明，肖康，石建國，王風，楊永麗.高效液相色譜法測定乳康片中丹參素的含量[J].醫藥導報，2006（09）.

[10]張文婷，壽優芳，陳碧蓮，金樟照.丹參水溶性制劑中丹參素和原兒茶醛含量的考察[J].中國現代應用藥學，2001（04）.

[11]陳再興，袁長季，丁勇，谷玉宏.高效液相色譜法測定丹田降脂膠囊中丹參素鈉的含量[J].遼寧中醫雜志，2006（12）.

[12]陳志清，鐘克儉.HPLC法測定胃寧沖劑中丹參素的含量[J].中國現代應用藥學，1999（01）.