注射用氨芐西林鈉氯唑西林鈉含量測定

【摘 要】建立反相高效液相色譜法測定注射用氨芐西林鈉氯唑西林鈉中氨芐西林鈉和氯唑西林鈉的含量。方法：采用奧泰公司C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm），磷酸鹽緩沖液磷酸-甲醇-磷酸（ 85：15：0.01），檢測波長為225nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。氨芐西林鈉在20～160μg·mL-1，氯唑西林鈉在25-200μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。氨芐西林鈉和氯唑西林鈉平均回收率分別為99.56%、99.63%。結(jié)論：本法簡便、準(zhǔn)確，可用于注射用氨芐西林鈉氯唑西林鈉中氨芐西林鈉和氯唑西林鈉的含量測定。

【關(guān)鍵詞】注射用氨芐西林鈉氯唑西林鈉；含量；測定

注射用氨芐西林鈉氯唑西林鈉屬注射劑。注射用氨芐西林鈉氯唑西林鈉為復(fù)方制劑，其組份為氨芐西林鈉，氯唑西林鈉。射用氨芐西林鈉氯唑西林鈉既對革蘭陽性菌和陰性菌有廣譜滅殺作用，又對耐青霉素的金黃色葡萄球菌有效。注射用氨芐西林鈉氯唑西林鈉適用于敏感菌所致的呼吸道感染、心內(nèi)膜炎、腦膜炎、胃腸道感染、尿路感染、敗血癥等。本文采用高效液相法對注射用氨芐西林鈉氯唑西林鈉中的氨芐西林鈉和氯唑西林鈉的進行了含量測定。

1.儀器與試藥

1.1儀器

安捷倫1100高效液相色譜儀、安捷倫色譜工作站、安捷倫1100可變波長檢測器、賽多利斯BPZn-D分析天平、Kertone實驗室超純水機（科爾頓（中國）有限公司）、KQ-300VDE型雙頻數(shù)控超聲波清洗器、pHS-2C型精密酸度計（上海精科雷磁廠）、HH-4數(shù)顯電子恒溫水浴鍋（江蘇省金壇市宏華儀器廠）、TU-1901雙光束紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）。

1.2色譜柱

奧泰公司C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm）。

1.3對照品

氨芐西林鈉和氯唑西林鈉 購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4試劑

甲醇（吉林市融信化工有限公司）、磷酸（濟南世紀(jì)通達化工有限公司）、三乙胺（上海譜振生物科技有限公司）、磷酸二氫鉀（濟南世紀(jì)通達化工有限公司）。

1.5試藥

注射用氨芐西林鈉氯唑西林鈉

2.測定方法確定

2.1色譜條件

依據(jù)查閱文獻及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[1-12]。流動相：磷酸鹽緩沖液磷酸-甲醇-磷酸（85：15：0.01），檢測波長：225nm，流速：1.0ml·min-1。柱溫：35℃。理論板數(shù)按氨芐西林鈉和氯唑西林鈉峰計算應(yīng)不得低于3000。

2.2對照品溶液的制備

精密稱取氨芐西林鈉和氯唑西林鈉對照品適量，置容量瓶中，加流動相分別制成每1mL含50μg、50μg的溶液，即得。

2.3供試品溶液的制備

取供試品精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入流動相50mL，密塞，精密稱定重量，超聲處理10分鐘，放冷，精密稱定，用流動相補足重量，搖勻，濾過。取續(xù)濾液，即得。

2.4精密度試驗

精密稱取氨芐西林鈉和氯唑西林鈉對照品適量，加流動相使溶解，制成濃度為50μg·mL-1、50μg·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續(xù)進樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.66%、RSD=0.61%，表明本方法精密度良好。

2.5對照品的線性考察

精密稱取氨芐西林鈉和氯唑西林鈉對照品40mg、50mg，置20ml容量瓶中，加入流動相溶液使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取1、2、4、6、8mL，置于10mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對照品進樣量（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算回歸方程。結(jié)果表明，氨芐西林鈉在20～160μg·mL-1，氯唑西林鈉在25-200μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.6重現(xiàn)性試驗

稱取同一批的注射用氨芐西林鈉氯唑西林鈉樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.95%和0.83%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

2.7準(zhǔn)確度試驗

精密稱取已知含量的樣品6份，分別加入一定量的氨芐西林鈉和氯唑西林鈉對照品，上述方法進行測定，計算回收率，平均回收率分別為99.56%、99.63%，RSD為0.66%，0.86%。

2.8樣品穩(wěn)定性試驗

取同一批注射用氨芐西林鈉氯唑西林鈉樣品，按2.3項下的供試品制備方法制備供試品，將供試品置室溫下放置，分別于第0、2、4、6、8、10小時，精密吸取供試品溶液10μl 注入液相色譜儀中，記錄色譜圖。測定注射用氨芐西林鈉氯唑西林鈉中氨芐西林鈉和氯唑西林鈉的RSD=0.52%和 RSD=0.55%。結(jié)果表明供試品10小時內(nèi)穩(wěn)定。

2.9樣品含量測定

依照上述含量測定方法，測定注射用氨芐西林鈉氯唑西林鈉三批樣品中氨芐西林鈉和氯唑西林鈉的含量，結(jié)果三批樣品的含量分別為44.5%、44.6%、44.6%，44.3%、44.4%、44.5%。

3.討論

分別考察磷酸鹽緩沖液磷酸-甲醇-磷酸（80：20：0.01）；磷酸鹽緩沖液磷酸-甲醇-三乙胺（85：15：0.01）；甲醇-水-冰醋酸（13∶86∶0.1），磷酸鹽緩沖液磷酸-甲醇-磷酸（85：15：0.01），甲醇-水（40∶60）不同比例的流動相，結(jié)果以磷酸鹽緩沖液磷酸-甲醇-磷酸（85：15：0.01）為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用磷酸鹽緩沖液磷酸-甲醇-磷酸（85：15：0.01）為流動相。本實驗表明此方法可用于注射用氨芐西林鈉氯唑西林鈉中氨芐西林鈉和氯唑西林鈉的含量測定。注射用氨芐西林鈉氯唑西林鈉中氨芐西林鈉和氯唑西林鈉的含量為不低于44.0%。

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