不同藥劑及其混配劑對油菜菌核病菌的毒力

摘要：采用菌絲生長速率法測定了8種藥劑及其混配劑對油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）的室內毒力，旨在篩選有效防治核盤菌的藥劑及其混配劑，為油菜菌核病的防治提供重要參考。結果表明，咪鮮胺錳鹽對核盤菌的毒力最高，其EC50值為0.067 6 μg/mL；丙環唑次之，EC50值為0.098 9 μg/mL；菌核凈、腐霉利、甲基硫菌靈、多菌靈、異菌脲EC50值在0.1～0.5 μg/mL之間；百菌清的EC50值為0.706 1 μg/mL。咪鮮胺錳鹽和百菌清以配比2∶1時增效系數為2.179 5，咪鮮胺錳鹽與甲基硫菌靈以配比1∶3時增效系數為2.952 7，咪鮮胺錳鹽與菌核凈以配比1∶1時增效系數為1.537 2。在防治油菜菌核病時，建議輪換使用咪鮮胺錳鹽、丙環唑單劑及上述篩選出的混配劑。

關鍵詞：油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）；殺菌劑；毒力；混配劑

中圖分類號：S482.2 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2015）07-1606-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.07.019

油菜（Brassica nanups L.）是我國的重要油料作物之一，種植面積和總產量均位居世界首位[1]。由核盤菌[Sclerotinia sclerotiorum（Lib.）de Bary]侵染引起的油菜菌核病在油菜種植地區均有發生，在我國以長江流域和東南沿海地區最為普遍和嚴重，一般發病率為10%～20%，嚴重的達80%以上[2-4]。由于油菜種質資源中缺少高抗菌核病的品種，目前生產上對于該病害的防治主要采用化學防治為主，輔以農業防治和生物防治[5]。國內雖然報道了不少防治油菜菌核病的化學藥劑，如苯并咪唑類的多菌靈、亞胺類的菌核凈、取代苯類的百菌清等，但長期使用單一的化學藥劑，導致大量的抗性菌株產生，化學藥劑的防治效果明顯降低[6，7]?；诖?，本研究根據藥劑的不同作用機理，選取了8種藥劑進行室內毒力測定，并測定了不同混配劑的毒力，以期篩選出對核盤菌具有較強抑制作用的單劑及混配劑，為油菜菌核病的防治提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株 油菜菌核病菌（S. sclerotiorum），由長江大學農學院植物病理研究室分離保存，于PDA平板[8]上培養2 d后使用。

1.1.2 供試藥劑 75%百菌清可濕性粉劑（WP）（廣東中迅農科股份有限公司），40%菌核凈可濕性粉劑（WP）（山東科大創業生物有限公司），70%甲基硫菌靈可濕性粉劑（WP）（四川省藥化工有限公司），50%腐霉利可濕性粉劑（WP）（上海知農化工有限公司），50%異菌脲可濕性粉劑（WP）（江西禾益化工有限公司），50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑（WP）（拜爾作物科學公司），25%多菌靈可濕性粉劑（WP）（廣東中迅農科股份有限公司），250 g/L丙環唑乳油（EC）（瑞士先正達作物保護有限公司），均為市售商品藥劑。

1.2 方法

1.2.1 不同單劑對核盤菌的毒力測定 采用菌絲生長速率法[9]，根據藥劑的推薦劑量及預備試驗結果，將供試的8種藥劑配制成系列濃度的含藥PDA培養基。丙環唑、咪鮮胺錳鹽、多菌靈的濃度為0.6、0.4、0.2、0.1、0.05、0.025 μg/mL，百菌清的濃度為1.0、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1 μg/mL，腐霉利的濃度為0.6、0.4、0.2、0.1、0.05、0.025 μg/mL，異菌脲、菌核凈、甲基硫菌靈的濃度為1.0、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05 μg/mL。用打孔器從PDA培養基上取直徑為5 mm的核盤菌菌餅，接種于含藥PDA平板中央，置于25 ℃倒置培養，每處理重復3次。待對照菌落長滿培養皿時，用十字交叉法測量菌落直徑，取平均值，計算抑制率。以藥劑濃度的對數值為橫坐標，不同濃度下抑制率的幾率值為縱坐標，繪制毒力曲線，求得8種殺菌劑對油菜菌核病菌的毒力回歸方程、EC50值和相關系數。

抑制率=（對照菌落直徑-處理菌落直徑）/（對照菌落直徑-菌餅直徑）×100%

1.2.2 不同混配劑對核盤菌的毒力測定 參照文獻[10]，根據藥劑單劑的毒力及作用機理，將咪鮮胺錳鹽（A）、百菌清（B）、甲基硫菌靈（C）、菌核凈（D）進行兩兩配比，按質量比3∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶3進行混配，三次重復。根據文獻[11]計算混劑的增效系數SR，SR≥1.5表示具有增效作用；SR≤0.5，表示具有拮抗作用；0.5

混劑的EC50理論值=（混劑中A的質量分數+混劑中B的質量分數）/（混劑中A的質量分數/A的EC50+混劑中B的質量分數/B的EC50）

混劑的增效系數（SR）=混劑的EC50理論值/混劑的EC50實際值

2 結果與分析

2.1 單劑對核盤菌的毒力

單劑對核盤菌的毒力測定結果如表1所示，從表1中可以看出，在供試的8種藥劑中，咪鮮胺錳鹽對油菜菌核病菌的毒力最大，其EC50值為0.067 6 μg/mL；其次是丙環唑，其EC50值為0.098 9 μg/mL；菌核凈、腐霉利、甲基硫菌靈、多菌靈、異菌脲EC50值在0.1～0.5 μg/mL之間；百菌清的毒力最小，其EC50值為0.706 1 μg/mL。

2.2 混配劑對核盤菌的毒力

不同混配劑的毒力測定結果如表2所示，由此可見，咪鮮胺錳鹽（A）和百菌清（B）混配時，增效系數（SR）在1.346 6～2.179 5之間，配比2∶1時增效系數最大，為2.179 5；咪鮮胺錳鹽（A）與甲基硫菌靈（C）混配時，增效系數（SR）在1.511 1～2.952 7之間，均表現增效作用，其中配比1∶3時增效系數最大，為2.952 7；咪鮮胺錳鹽（A）與菌核凈（D）混配時，配比1∶1時增效系數最大，為1.537 2；其余藥劑配比均表現相加作用。

3 小結與討論

本研究測定了8種藥劑對油菜菌核病菌的室內毒力，結果表明，供試的藥劑對核盤菌菌絲生長均具有一定的抑制作用，抑制作用依次為50%咪鮮胺錳鹽WP>250 g/L丙環唑EC>25%多菌靈WP> 50%腐霉利WP>40%菌核凈WP>50%異菌脲WP> 70%甲基硫菌靈WP>75%百菌清可濕性粉劑WP。咪鮮胺錳鹽和丙環唑對油菜菌核病菌的毒力較高，其余藥劑的毒力較低，建議這兩種藥劑經田間防效驗證后，可輪換用于油菜菌核病的田間防治。任莉等[12]比較了核盤菌對咪鮮胺錳鹽、多菌靈、多·酮及菌核·錳鋅殺菌劑的敏感性，結果表明核盤菌對殺菌劑咪鮮胺錳鹽高度敏感，而對其余3種殺菌劑敏感性稍差，本研究結果與此相一致。秦虎強等[13]報道陜西漢中地區的油菜菌核病菌對咪鮮胺錳鹽、腐霉利、異菌脲、多菌靈、甲基托布津、戊唑醇及菌核凈的敏感性較強，其次為乙霉威與丙環唑，對百菌清中度敏感，本研究結果與此存在一定差別，推測原因可能與不同地區油菜菌核病菌的抗藥性有關，有待于進一步研究。

長期使用單一藥劑易造成病原菌的抗藥性，使用混配劑可達到比單劑更為理想的防治效果，減少病原菌抗藥性產生的風險。周鋒等[14]報道戊唑醇和菌核凈以配比為1∶20、5∶44、5∶26、10∶33、5∶11、15∶22、12∶11、20∶11和21∶5復配后對油菜菌核病病原菌具有增效作用，且當二者配比為12∶11時增效系數最高。本研究選取了毒力強且作用機理不同的4種藥劑進行兩兩混配，聯合毒力測定結果表明，咪鮮胺錳鹽與百菌清配比2∶1、咪鮮胺錳鹽與甲基硫菌靈配比1∶3、咪鮮胺錳鹽與菌核凈配比1∶1時都具有明顯的增效作用。本研究篩選的增效作用明顯的混配劑，不僅可以明顯提高藥劑的殺菌效果，而且有利于防止或延緩病菌抗藥性的產生，為開發防治油菜菌核病的混配制劑提供了重要的參考依據。

參考文獻：

[1] 高小寧，陳亞菲，韓青梅，等.內生細菌EDR2的鑒定及其對油菜菌核病的防治[J].西北農林科技大學學報（自然科學版），2013，41（2）：175-181.

[2] LI H， LI H B， BAI Y， et al. The use of Pseudomonas fluorescens P13 to control Sclerotinia stem rot（Sclerotinia sclerotiorum） of oilseed rape[J]. The Journal of Microbiology， 2011， 49（6）：884-889.

[3] YANG D J， WANG B， WANG J， et al. Activity and efficacy of Bacillus subtilis strain NJ-18 against rice sheath blight and Sclerotinia stem rot of rape[J]. Biological Control，2009，51（1）：61-65.

[4] 趙丹丹，臧 新，田保明，等.菌核菌及油菜菌核病相關研究進展[J].河南農業科學，2010（2）：120-123.

[5] MAKOWSKI D，TAVERNE M，BOLOMIER J，et al.Comparison of risk indicators for sclerotinia control in oilseed rape[J]. Crop Protection，2005，24（6）：527-531.

[6] 李 偉，李 偉，周益軍，等.江蘇省油菜菌核病對多菌靈的敏感性[J].中國油料作物學報，2007，29（1）：63-68.

[7] 康育光，韓巨才，劉慧平，等.核盤菌對幾種殺菌劑的敏感性研究[J].山西農業大學學報，2006，26（1）：19-21.

[8] 陳天壽.微生物培養基的制造與應用[M].北京：中國農業出版社，1995.

[9] 顧廣杰，崔林開，王樹和，等.新奧霉素對7種植物病原真菌的室內毒力測定[J].農藥，2013，52（4）：293-294.

[10] 王小藝，王躍龍，歐曉明，等.農藥混劑配比研究的一種實用尋優方法初探[J].農藥學學報，2005，7（1）：40-44.

[11] 肖 星，蒲金基，陳 照，等.兩種不同殺菌劑混配對香蕉黑星病菌的增效作用研究[J].廣東農業科學，2008（7）：92，100.

[12] 任 莉，陳坤榮，王成玉，等.咪鮮胺錳鹽防治油菜菌核病的潛力研究[J].中國農業科學，2010，43（20）：4183-4191.

[13] 秦虎強，陳芳穎，付鼎程，等.油菜菌核病菌對10種殺菌劑的敏感性及不同藥劑田間防效[J].西北農林科技大學學報（自然科學版），2011，39（7）：117-122.

[14] 周 鋒，張小磊，胡承勇，等.戊唑醇和菌核凈復配對油菜菌核病病原菌的增效作用[J].農藥，2013，52（8）：602-605.