PCR檢查法與細菌培養法在臨床中的用于陰道細菌檢查的檢驗分析

摘要：目的 研究比較在臨床中應用PCR檢查法與細菌培養法于陰道細菌檢查的檢驗效果。方法 選擇自2012年2月～2013年9月收治在我院的120例需要做陰道細菌檢查的患者，在患者的陰道后穹窿處采集其陰道分泌物，然后分別采取PCR檢查法與細菌培養法進行陰道細菌檢查，對兩組方法的檢驗效果進行對比。結果 細菌培養法的細菌檢出率為63.3%，而PCR檢查法的細菌檢出率為75.8%，兩組效果差異明顯（P>0.05），具有統計學意義。結論 PCR檢查法對于陰道細菌的檢出率更高，更準確，并且應用儀器使操作簡單快捷，具有在臨床廣泛推廣的價值。

關鍵詞：PCR檢查法；細菌培養法；陰道細菌檢查；效果

陰道炎癥是臨床常見的婦科疾病之一，基于此病的發病緩慢，且癥狀不夠明顯，臨床患者對于此病的重視欠缺，但此疾病嚴重時可以導致腹部以及盆腔疾病等， 在極嚴重時甚至導致不孕 。因此針對此病及時且有效的檢查診斷，對于致病菌的明確及采取特異性治療至關重要。本文筆者選擇自2012年2月～2013年9月收治在我院的120例懷疑患有陰道炎的患者，在患者的陰道后穹窿處采集其陰道分泌物，然后分別采取PCR檢查法與細菌培養法進行陰道細菌檢查，進而比較兩種檢查方法的效果。現匯報研究結果如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇自2012年2月～2013年9月收治在我院的120例需要做陰道細菌檢查的患者，進入研究的患者全部為育齡期的婦女，年齡25～49歲，平均為（33.29±4.2）歲，且進入研究的所有患者均存在外陰異味、瘙癢、白帶分泌增多以及慢性陰道炎等情況。

1.2方法 進入研究的120例患者在其陰道后穹窿處采集其陰道分泌物，將分泌物放置于無菌鹽水中，然后分別采取PCR檢查法與細菌培養法進行陰道細菌檢查，進而比較兩種檢查方法的效果。

1.2.1細菌培養法 將置入生理鹽水中的陰道分泌物取出，后放入相應的培養基中，置入含 CO2孵箱中進行時長為48h的培養。 待菌落長成后將其培養面上露滴狀、灰色、光滑以及半透明樣的菌落群挑取出來進行標準化的鑒定，并按照嚴格的標準進行執行。

1.2.2PCR檢查法 首先取出1000μL混有無菌生理鹽水的患者陰道分泌物置于離心機的離心管中進行離心，設置轉述為1200r/min，持續離心15min，離心完畢后將所得到的上清液全部移除。向所得到的陰道分泌物中加入一定量的組織裂解液，后置于60℃的水浴鍋中，于10～15min后取出再次放入離心管中進行離心，轉數仍為1200r/min，持續10min，將所得到的上清液取出少許用來制作DNA模板，后進行DNA的體外擴增，并在對細菌進行陰陽性對比的時候要選擇制作一個DNA模版作為陰性對照，在此陰性對照里除不加入模板DNA之外，其余操作皆相同。在進行擴增DNA模版時，向模版中加入緩沖對、雙蒸餾水、引物以及模板等，之后放入PCR儀中進行定時循環。

1.3評價方法 對兩種實驗方法下細菌檢出的種類及檢出率進行統計分析并進行對比。

1.4統計學方法 文中所用資料數據應用SPSS 17.0統計軟件包對其進行分析，有效率對比及計量資料采用χ2檢驗，配對樣本及計數資料采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

進入研究的120例患者經過細菌培養法和PCR 檢驗法兩種方法檢驗后，實驗結果得出數據顯示，PCR的方法得出的檢驗結果中陽性者共 91 例 ，其中包括戛納桿菌62例，棒狀桿菌16例， 腸球菌 13例，另外， 陰性者共 19 例， 細菌檢出率總體為75.8%；應用細菌培養法得出的檢驗結果中包括陽性者 76例 ， 其中有戛納桿菌 49 例，棒狀桿菌 16例，腸球菌 11 例，另外， 陰性者共44 例， 細菌的檢出率為 63.3%。 由此可以得出結論 ，在臨床中應用PCR 檢查法較細菌培養法的檢出療效更好，其細菌檢出率更高且更加精確， 并且此法的臨床操作簡單易行，操作方法容易理解及實施，因此無論是在大中型醫院還是小型的社區醫院均可以投入實行，與之相反，細菌培養法的操作要求則較高且標準復雜， 難以在各類型醫院中廣泛開展。 經過全面對比后， PCR 檢驗法和細菌培養法兩種方法的細菌檢出率差異明（P<0.05），具有統計學的意義，見表1。

3 討論

在日常健康中，白帶的量及性狀能在一定程度上反映婦女的婦科健康情況，因此婦女的日常白帶分泌物增多時應引起重視， 及時到醫院進行婦科檢查。近年來，由于各種生活因素及生活習慣的影響，婦女的陰道類疾病呈逐年增長的趨勢[1]。諸如常見的陰道炎等疾病其致病因素主要為陰道內的寄生菌群的失衡，破壞了正常情況下的菌群平衡狀態，而各菌群平衡狀態的維持主要依靠陰道的各種分泌物，尤其是陰道上皮細胞以及陰道桿菌。當各種因素導致陰道桿菌的大量死亡，陰道菌群的平衡狀態被打破，其中致病菌群在婦女的陰道內大量的繁殖，在消耗大量糖原等營養物質的同時，使陰道上皮細胞失去原有的代謝能力從而使陰道內發生酸堿平衡紊亂 ，隨之陰道上皮細胞的正常的屏障功能失去發生炎癥，導致陰道炎的發生。由于此疾病的起病緩慢，且最初的癥狀明顯，因此不易引起婦女們的重視，嚴重時會引起腹部及盆腔的相關疾病，甚至導致不孕的發生，因此目前臨床強調對于此疾病的有效及時的檢驗與診斷顯得至關重要[2]。細菌培養法一直以來是臨床中被公認的檢查婦女陰道菌群的黃金標準，但由于此種方法的操作步驟相對于 PCR的檢驗法較繁瑣，且不容易操作及實驗室的相對要求較高，難以在大中小型醫院進行全面的大范圍推廣。PCR 的檢驗法是目前臨床中新出現的一種簡便便捷的檢驗技術，其菌體的檢出率較高，精準度好且較易展開操作，因此近幾年在臨床中得到了較為廣泛的應用。在本研究中，筆者選擇收治在我院的120例需要做陰道細菌檢查的患者，在患者的陰道后穹窿處采集其陰道分泌物，然后分別采取PCR檢查法與細菌培養法進行陰道細菌檢查，對兩組方法的檢驗效果進行了對比，結果對上述說法進行了進一步的證實。

綜上所述，PCR檢查法對于陰道細菌的檢出率更高，更準確，并且應用儀器使操作簡單快捷，具有在臨床廣泛推廣的價值。

參考文獻：

[1]王一葉.比較PCR檢驗法和細菌培養法用于陰道細菌檢驗的效果[J].中外醫療，2013，32（24）：192-193.

[2]李華鋒，陳英姿.應用PCR法與細菌培養法檢測陰道細菌的比較分析[J].中國保健營養（中旬刊），2012，（6）：41-42.

編輯/成森