RhD紅細胞陰性確認與臨床輸血的關聯

摘要：目的 研究分析RhD紅細胞陰性確認實驗結果，探討RhD抗原在臨床輸血工作中的重要意義。方法 血站檢測實驗室217例無償獻血者初篩為陰性的標本用鹽水介質法進行復初篩，對復初篩為陰性的標本采用間接抗球蛋白試驗檢測出弱D和部分D表型。結果 217例初篩陰性的標本檢出212例為RhD（-）（97.70%） ，5例確定為弱D或部分D型（2.30%）。結論 RhD抗原呈復雜變異性，RhD紅細胞陰性確認與防范輸血風險，避免由RhD抗原引起的溶血性輸血反應息息相關。

關鍵詞：RhD紅細胞陰性 確認實驗結果分析 臨床輸血

Abstract：Objective Research and analysis the results of confirming RhD negative red blood cells，toexplore the significance of RhD antigent in clinical transfusion. Methods By using saline medium method to experiment 217 RhD negative samples from blood donors in blood testing Laboratory again，then by indirect antiglobulin test to detect weak and part D. Results 212 of 217 samples were RhD negative（97.70%），and 5 samples were identified as weak D or part D（2.30%）. Conclusion RhD antigens is complicated and also with a variation of characteristics， the confirm of RhD negative red blood cells and to pvevent the risk of blood transfusion are associated with the hemolytic transfusion reaction which caused by RhD antigen.

Key words：RhD negative red blood cells；Experimental results confirm analysis；Clinical transfusion

Rh血型系統是最復雜和多態的紅細胞血型系統，臨床輸血重要性僅次于ABO血型系統，D抗原是Rh血型系統中50個不同血型抗原[1-2]中免疫原性最強的一個血型抗原，常能引起溶血性輸血反應和新生兒溶血癥（HDN）而備受關注。D抗原在不同類型紅細胞上表達的強度不均一，表型分為RhD（+）、RhD（-）、弱D、部分D和Del，獻血者RhD陰性確認試驗采用經典間接抗人球蛋白實驗（IAT）技術，IAT檢測為陰性則判定為RhD（-），檢測為陽性則判定為RhD（+）、弱D、部分D型[3]。其中弱D、部分D型對獻血者個體判定為RhD（+），對受血者個體則判定為RhD（-）；血站對每一位初篩為RhD陰性的供血者都要作RhD陰性確認，2011～2014年共檢測初篩RhD陰性217例，其中5例為弱D、部分D型，確認為RhD（+）；212例確認為RhD（-）。本站在稀有血型臨床供應上做到有求必應，很好滿足了臨床需求，受到社會和臨床的一致好評，現報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料 廣元市中心血站2011年1月～2014年12月217例血液檢測試驗室RhD初篩為陰性的獻血者標本。

1.2儀器和試劑

1.2.1儀器 血型專用離心機，恒溫水浴箱。

1.2.2試劑

1.2.2.1鹽水法抗-D（IgM或IgM+IgG）單克隆試劑[北京金豪醫藥有限公司，批號：2011093028、2013053011等；上海血液生物醫藥有限責任公司，批號：20101018、20120420、20130306等）；Millipore（UK）Ltd（IgM+IgG）（上海：密理博貿易有限公司，批號：BMJ1204C等]。

1.2.2.2 IAT法抗-D（IgG）單克隆試劑[上海血液生物醫藥有限責任公司，批號：20101022、20111212、20120823、20130301、20140303等；Millipore（UK）Ltd（IgM+IgG）（上海：密理博貿易有限公司，批號：BMJ1204C等）；抗人球蛋白試劑（多特異性抗-IgG+C3d）上海血液生物有限責任公司，批號：20100818、20110328、20130418、20140424等]。

1.3 RhD陰性確認 先用鹽水凝集法用4種不同批號或生產廠家的單克隆抗-D（IgM或IgM+IgG）進行初篩，再用4種不同批號或生產廠家的單克隆抗-D（IgG或IgM+IgG）采用IAT法檢測RhD抗原。

2結果

2.1鹽水凝集法（復初篩） 217例初篩陰性的標本經4批不同批號或生產廠家的單克隆抗-D初篩均為陰性。

2.2 IAT法 對上述217例復初篩為陰性的標本采用IAT法檢測，212例結果報告為RhD（-），5例確定為弱D或部分D型，結果報告為RhD（+）。

3討論

3.1 RhD紅細胞陰性確認一般須首先通過抗-D（IgM或IgM+IgG）進行初篩，然后對初篩為陰性的標本通過經典IAT法進行確認。其中，1種或1種以上試劑結果為陽性則表明受檢紅細胞為弱D、部分D型，則該獻血者為RhD（+）；結果全為陰性，該獻血者為RhD（-）[4]。

3.2在常規血清學初篩（鹽水IgM或IgM+IgG）RhD陰性獻血者個體中，除了存在真正Rh陰性外，還有D變異體（包括弱D、部分D、Del型）。弱D、部分D與IgM抗-D呈弱反應或陰性，需IgG抗-D IAT法才能檢出，但無法區分。弱D、部分D型紅細胞抗原性遠比正常D的抗原性弱，但具有免疫原性，若將之輸給RhD陰性受血者，有可能免疫受血者，使之產生抗-D；輸入已有抗-D的受血者，輸入紅細胞會被加速破壞，從而引起溶血性輸血反應。所以對弱D或部分D抗原的檢測十分必要，弱D或部分D型個體作為獻血者，其血液應視為RhD（+）血液。Del型是1種變異極弱的RhD（+）血型，其極弱的D抗原只能通過敏感的吸收放散試驗才可檢測出。Del型D抗原表達量極弱，但仍具有一定的免疫原性，可免疫RhD（-）個體[5]，在RhD（-）人群的中國漢族個體中，大約有20%～30%為Del型，所占比例很高[6]。雖然血站系統弱D、部分D型可通過經典IAT法可檢出，但不能排除RhD陰性獻血者中的Del型，Del表型個體作為RhD（-）獻血者，可能會帶來一定的安全隱患，值得血站每位血型工作者探討和重視。隨著血型檢測手段不斷提升，可采用基因分型技術檢測Del型獻血者，來降低RhD（-）受血者發生同種免疫反應風險。

3.3在臨床輸血工作中，以輸血為目的常規檢測不必要使用高效IgM單克隆抗-D試劑檢測除極弱反應外的所有D抗原以及對明顯為D陰性的標本作確認試驗，否則會有不必要的風險，對于受血者RhD抗原初篩試驗陰性，RhD抗原結果難以判定或/和先前鑒定不符，均應按RhD（-）血型處理。輸注紅細胞時，無論有無抗-D，都應首選ABO血型與受血者同型RhD（-）紅細胞；RhD（-）且無抗-D的受血者，在血液短缺緊急搶救情況下，可根據\"血液相容性輸注\"原則，須在與受血者主側交叉配血陰性情況下，首選與受血者ABO血型相容RhD（-）紅細胞，次選與受血者ABO同型RhD（+）紅細胞，三選O型RhD（+）紅細胞輸注。輸注血漿時，與受血者ABO血型同型的RhD（-）、RhD（+）血漿均可，無法滿足可選擇AB型RhD（-）和RhD（+）血漿，同時建議對RhD（-）血漿做抗-D篩查。輸注血小板時，首選與受血者ABO/RhD血型同型血小板輸注；緊急搶救受血者血小板供應短缺時，可輸注RhD（+）血小板，應向受血者及其家屬告知輸注RhD（+）供者血小板后可能被其中殘留的紅細胞免疫產生抗-D，尤其是生育期婦女（女童受血者成年后）可能發生流產、死胎、新生兒溶血病等風險，對無抗-D的上述受血者可盡快注射抗-D免疫球蛋白來預防抗體產生[7]。

參考文獻：

[1]Xu Q，，Zhang J，Wang Q， et al，RHD gane polymorphism among RHD-negative Han Chinese[J].Chin med J，2003（116）：1539-1543.

[2]Dawoud M，Shubair ME，Sharif FA. RHD gene polymorphism a-mong Palestinians of Gaza Strip[J].Ann Alquds Med，2009（5）：18-27.

[3]謝俊杰，邵超鵬.Rh血型D放散型（Del）[J].中國輸血雜志，2011，24（1）：3-7.

[4]葉應嫵，王毓三.全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京：東南大學出版社，2006.

[5]Wagner T，Kǒrmǒczi GF，Buchta C，et al.Anti-D immunization by DEL red blood cells[J].Transfusion，2005，45（4）：520-526.

[6]陸松松，陳靜嫻.Rh（D）變異體的研究進展[J].臨床輸血與檢驗，2010，12（4）：374-376.

[7]中國醫師協會輸血科醫師分會 中華醫學會臨床輸血學分會.特殊情況緊急搶救輸血推薦方案[J].中國輸血雜志，2014，27（1）：1-3.編輯/張燕