摘要:隨著輸血技術的發展,輸血科的實驗室操作有著突飛猛進的發展,從以前的純手工到半自動,到現在的全自動化[1-2]。我科于2013年9月使用Galileo Echo全自動血型儀來檢測需要輸血治療的患者或外科手術患者的ABO和Rh(D)血型鑒定以及IgG紅細胞抗體篩查,如何保證該儀器能夠正常發揮檢測功能來達到我科實驗室工作要求顯得尤為重要[3]。下面將我科在使用Galileo Echo全自動血型儀的幾點應用體會介紹如下。
關鍵詞:輸血技術;輸血科;全自動血型儀
1 儀器的相關簡介
1.1儀器型號及廠家
1.1.1型號 Galileo Echo全自動血型儀(小型)。
1.1.2制造廠商 Immucor,Inc.3130 Gateway Drive Norcross,GA 30071美國。
1.2儀器檢測項目所需試劑和材料
1.2.1 ABO和Rh(D)血型檢測 Galileo微孔板;NOVACLONE抗A;NOVACLONE抗B;NOVACLONE抗D(IgM+IgG);反定型紅細胞A1、A2、B、O;Galileo稀釋液;NOVACLONE質控對照試劑;攪拌珠。
1.2.2 IgG紅細胞抗體篩查檢測 抗體篩查Capture-R微孔板;低離子強度溶液(LISS液);指示紅細胞;濃縮磷酸鹽緩沖液;Capture-R質控血清(陽性、陰性);攪拌珠。
1.3儀器檢測原理 Galileo Echo全自動血型儀是一種微處理控制儀器,能夠自動執行檢測處理、結果判讀以及數據管理功能,該儀器基于微孔檢測條的平臺自動進行標準免疫血液學檢驗,這些檢驗包括ABO和Rh(D)血型檢測、IgG紅細胞抗體檢測/識別、相容性測試以及紅細胞顯型。我科僅進行ABO和Rh(D)血型檢測和IgG紅細胞抗體檢測這兩個項目。
1.3.1 ABO和Rh(D)血型檢測原理 Galileo Echo利用凝集原理來執行ABO血型和Rh分析。凝集分析可以檢測由自然產生的抗原和抗體確定的ABO血型,樣本紅血球和血漿或血清將與試劑抗血清和細胞混合,以產生紅血球凝集(凝結)。
1.3.2 IgG紅細胞抗體檢測原理 IgG紅細胞抗體檢測采用Capture-R分析方法,Capture-R微孔檢測板條底部有不可見單層(單層)附著的RBC抗原,是利用固相紅細胞吸附(SPRCA)原理來檢測IgG紅細胞抗體。
2 使用儀器的幾點體會
2.1 Galileo Echo全自動血型儀在操作上的優勢 與傳統的手工方法相比:①該儀器吸樣裝置簡單,探針可以準確測量到吸液的位置;②有專門的探針內壁清洗孔、探針外部清洗孔以及位置校準孔;③該儀器可以自動稀釋血液,若吸樣探針觸碰到微小的凝塊會自動清洗探針,若吸到較大的凝塊則會出現報警聲,提示工作人員注意處理;④Galileo Echo全自動血型儀真正實現了全自動化,加樣、洗板、離心、判讀結果整個過程都是自動完成,提高了工作效率,同時也降低了人為主觀因素對結果的影響;⑤儀器檢測時間短,1h左右可以完成16~20個ABO和Rh(D)血型和IgG紅細胞抗體檢查,與手工方法相比節省了許多時間,適合大批量血型及抗體篩查的檢測;⑥該儀器在判讀結果時,敏感性較強,只要實驗凝集強度落在儀器設定值之外,系統都將其判斷為正反定不符、質控失敗、結果無法判讀等等,提示工作人員可通過重復試驗或手工方法復核確認;⑦該全自動血型分析儀有特有的圖像讀取處理器,采用電荷耦合器件(CCD)照相機記錄檢測條微孔的每一個孔的圖像,系統軟件依據多特征圖像分析運算法則,計算各孔的凝集性或固相細胞附著值,以便確定測試的結果并儲存。
2.2 Galileo Echo全自動血型儀對樣本的要求 我科使用該儀器一年多的時間,檢測樣本7000多份,通過對其結果回顧性分析,發現若樣本存在病理性凝血異常、抽血過程不順利的,都可能導致樣本有凝塊,檢測時吸樣針吸入小凝塊后就無法完成檢測,再次說明了在上機操作前必須要嚴格檢查樣本,需注意:①樣本為抗凝全血;②樣本試管中至少有250μl RBC(離心后的液體量);③進行抗體篩查分析時樣本試管中至少有500μl血漿或血清;④樣本必須處于18℃~30℃室溫下;⑤樣本需要進行離心處理(3000~3600 RPM下離心5~10min);⑥QC(試劑質量控制)試管被視作樣本;⑦檢測前應檢查樣本試管是否出現凝塊、嚴重溶血、脂血或黃疸的樣本。
2.3操作Galileo Echo全自動血型儀需注意的問題:①開機后必須要進行儀器初始化,進行全面的清洗和檢測;②初始化結束后要進行維護每日的保養項目,包括探針水平和垂直位置校準,每月還要進行定期的月保養項目;③加載試劑時要注意輕輕推入試劑區,由于磁力吸附性較大,加載試劑時防止試劑瓶的試劑飛濺,污染其他試劑而影響實驗結果;④加載血型檢測條和Capture-R微孔檢測板條時,注意不要碰觸到有二維碼標示的一端,若污染或磨損二維碼后會使儀器的圖像讀取處理器不能識別該微孔條,容易造成板條的浪費;⑤由于Capture-R微孔檢測板條底部包被有不可見單層(單層)RBC抗原,因此該微孔檢測條不能長時間暴露于空氣中,以免影響了包被抗原的穩定性從而干擾了儀器檢測結果的準確性和敏感性;⑥由于Galileo Echo全自動血型儀一次性只能加載樣本20個,適合小批量的樣本檢測,若遇到大批量的樣本時,為了保證儀器的準確度和敏感度,建議每做完20個樣本后進行一次儀器初始化后再進行后續樣本的檢測。
2.4 Galileo Echo全自動血型儀的維護保養:①請儀器工程師定期(3個月左右)對儀器用專業的清洗劑進行維護;②定期經常觀察血型儀照相機的標定值,由于照相機在使用上的耗損,標定值的偏移會導致讀取結果的判定失誤,因此每個月需請儀器工程師來調整一下儀器的照相機標定值;③由于新疆地區天氣干燥,生理鹽水結晶經常會在加樣針、清洗板的排針上附著甚至阻塞針孔,因此每周要用蒸餾水擦拭加樣針和排針,避免影響結果的判讀;④每日要進行規定的日保養項目,每月定期完成儀器的月保養項目。
3 結論
Galileo Echo全自動血型分析儀檢測自動、快速、結果可靠、適合大批量樣本的處理、實驗結果可以以圖片和數據的形式儲存于電腦中可長期保存易于查詢和舉證,只有在日常使用時按照儀器操作的SOP文件操作,注意以上操作及保養的細節上問題,才能夠正常發揮該儀器的檢測功能。
總之,該儀器實現了血型鑒定和紅細胞抗體篩查的標準化和自動化,適合應用于醫院輸血科進行血型鑒定。
參考文獻:
[1]宋健,彭濤,李翠瑩,等.全自動血型及配血分析系統的應用[J].中國輸血雜志,2011,24(1):60-61.
[2]王照峰,張虎,李瑩,等.WADiana全自動血型分析儀的應用體會[J].國際檢驗醫學雜志,2013,34(20):2783-2784.
[3]趙景嵐,宋建,等.全自動血型及配血分析儀使用維護的幾點體會[J].醫學信息雜志,2010,23(9):3181-3181.編輯/哈濤