穴位注射足三里對潰瘍性結腸炎小鼠治療效果的實驗研究

摘要：目的 探討穴位注射足三里治療潰瘍性結腸炎的臨床效果及其治療作用的可能機制。方法 健康SPF級SD小鼠60只，雌雄各半，分為六組，治療1w后進行DAI及肉眼病理組織學評分。結果 模型組小鼠的DAI評分及病理學評分顯著高于對照組。針刺組、穴位注射黃芪注射液組、穴位注射生理鹽水組、SASP組的DAI評分及病理學評分顯著低于模型組，單純針刺效果弱于穴位注射黃芪注射液組，單純針刺和穴位注射生理鹽水組無明顯差異。結論 穴位注射黃芪注射液對于小鼠實驗性潰瘍性結腸炎有一定的療效， 效果優(yōu)于單用針刺足三里、穴位注射鹽水組、SPAP組。

關鍵詞：穴位注射；黃芪注射液；足三里；潰瘍性結腸炎

潰瘍性結腸炎又稱非特異性潰瘍性結腸炎（UC），是一種慢性直腸和結腸炎性疾病。近年來，選用黃芪注射液穴位注射治療UC在臨床上取得較滿意效果。本研究運用潰瘍性結腸炎動物模型證實其治療作用，為仿穴位注射治療慢性潰瘍性結腸炎的臨床應用提供可靠的實驗依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 健康SPF級SD小鼠60只，雌雄各50%，體重約25g左右，購于魯抗動物，在實驗室內正常飼養(yǎng)1w，均為健康，隨機分為6組 ，每組10只，各組體重統(tǒng)計學比較無顯著差異（P>0.05）。

1.2藥物與試劑 柳氮磺吡啶腸溶片（上海信誼天平藥業(yè)有限公司），三硝基苯磺酸（國藥集團），黃芪注射液（神威藥業(yè)集團有限公司，批號：Z13020999）。

1.3實驗設備 顯微鏡。

1.4方法

1.4.1實驗造模 小鼠適應性飼養(yǎng)1w后，除正常對照組外，禁食不禁水24h，固定小鼠后，用帶7號針頭硅膠導管從肛門插入至場內4cm，注入200微升由50%乙醇和5mgTNBS組成的混合藥液將，倒置小鼠30s，使藥液到達全結腸，然后放回全籠飼養(yǎng)。

1.4.2實驗分組與治療方法 60只小鼠隨機分為6組，每組雌雄各50%，每組各10只。

1組：針刺組。穴取足三里，進針后，實行捻轉補法，針刺1次/d，連續(xù)針灸1w；兩組：穴位注射黃芪組。穴取足三里，注射黃芪注射液，注射1次/2d，注射1w；3組：穴位注射生理鹽水組。穴取足三里，注射生理鹽水，注射1次/2d，注射1w；4組：SASP組。使用SASP水溶液灌胃，灌胃1次/2d，灌胃1w；5組：模型組。造模后不治療，與治療組做相同的捆綁固定；6組：正常組。作為各項指標的正常對照。

治療1w后，各組大鼠禁食不禁水24h，全麻下取遠端結腸約8cm，沿縱軸剪開腸管并用冰鹽水沖洗干凈，平鋪、固定，觀察炎癥及潰瘍發(fā)生情況，進行局部結腸大體損傷評分。然后取病變明顯處結腸2cm標本經40g/L甲醛固定、石蠟包埋后切片進行HE染色，光鏡下觀察炎癥浸潤、黏膜糜爛及潰瘍等情況。

1.5觀察指標

1.5.1疾病活動評分（DAI） 每日記錄動物體重、毛發(fā)狀態(tài)、大便性狀和便血情況，進行疾病活動評分（DAI）。疾病活動評分（DAI）=（體重下降分數+大便性狀分數+便血分數）/3。

1.5.兩組織學損傷評分 光鏡下觀察炎癥浸潤、黏膜糜爛及潰瘍等情況，采用Fedorak積分標準進行組織學損傷評分。

1.6統(tǒng)計學處理 采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件處理，各項指標用均數或均數±標準差（x±s）表示，兩組組間比較分別采用t檢驗及方差分析。

2 結果

見表1。

造模各組在造模后第2d即出現疾病發(fā)作，模型組在整個實驗過程中炎癥持續(xù)，無明顯自愈傾向；而相對于模型組，各組在治療后出現DAI降低（P<0.05），提示各種治療均可改善小鼠潰瘍性結腸炎炎癥程度；穴位注射黃芪組DAI、組織學損傷評分、結腸炎癥指數評分低于單純針刺組、穴位生理鹽水注射組和SPAP組；針刺組、生理鹽水穴注組、之間各指標間無統(tǒng)計學差異。

病理切片（HE染色）結果顯示，空白組小鼠結腸結構完整，腺體清晰，無炎癥細胞浸潤；對照組小鼠結腸結構不完整，腺體破壞，大量炎癥細胞浸潤；鹽水組小鼠結腸結構不完整，腺體破壞，大量炎癥細胞浸潤；黃芪組小鼠結腸結構完整，腺體清晰，隱窩完整，少量炎癥細胞浸潤；針刺組小鼠結腸結構輕度破壞，腺體不完整，部分炎癥細胞浸潤。

3 討論

現代醫(yī)學普遍認為UC是多種致病因素相互作用的結果，其中與免疫機制密切相關，是以遺傳因素為背景，感染和環(huán)境因素通過啟動腸道免疫和非免疫系統(tǒng)，致使腸粘膜對抗原呈現高敏反應，發(fā)生免疫調節(jié)功能紊亂，釋放大量細胞因子和炎癥介質，導致腸粘膜炎癥和組織的損傷[1]。而中醫(yī)認為本病病位在大腸，屬中醫(yī)\"久痢\"、\"血痢\"、\"滯下\"等范疇，其病因病機為感受邪毒， 局部經絡阻塞， 氣滯血瘀， 血肉腐敗所致[2]，《素問·太陰陽明論》說：\"飲食不節(jié)， 起居不時者， 陽受之則入六腑， 陰受之則入五臟， ……入五臟則腹?jié)M閉塞， 下為飧泄， 久為腸\"。

本實驗研究表明，黃芪注射液穴位注射具有藥物和穴位雙重效果，一方面利用刺激足三里以調理腸胃的作用，另一方面強化了黃芪藥物的作用，具有一舉兩得的效果，具有起效快、療效高、無毒副作用的優(yōu)點，值得臨床推廣應用。

參考文獻：

[1]崔海宏，陳村龍，楊玉捷，等.潰瘍性結腸炎患者腸黏膜Th1/Th2類細胞因子mRNA的表達[J].世界華人消化雜志，2003，11（10）：1524-1526.

[2]趙恒志，郭玉蘭. 健脾祛濕湯治療慢性潰瘍性結腸炎46 例[J].河南中醫(yī)學院學報， 2005， 20（4）：64.

[3]楊甲三. 針灸腧穴學[M].上海：上海科學技術出版社， 1989： 145.

編輯/哈濤