2013年上海市青浦地區(qū)革蘭陽性菌耐藥性監(jiān)測

蔡紅妹， 唐之儉， 費鳳英

·論著·

2013年上海市青浦地區(qū)革蘭陽性菌耐藥性監(jiān)測

蔡紅妹1， 唐之儉2， 費鳳英2

目的 了解2013年上海市青浦地區(qū)革蘭陽性菌細(xì)菌耐藥性監(jiān)測結(jié)果，為臨床合理使用抗菌藥物提供依據(jù)。方法 采用自動化儀器對青浦地區(qū)2所醫(yī)院臨床分離的革蘭陽性菌進(jìn)行藥敏試驗，采用CLSI 2014年版標(biāo)準(zhǔn)判斷結(jié)果。結(jié)果 315株革蘭陽性菌中，腸球菌屬細(xì)菌、金黃色葡萄球菌(金葡萄)和凝固酶陰性葡萄球菌分別占40.3%(127/315)、36.5%(115/315)、20.3%(64/315)。耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)的檢出率分別為48.7%和82.8%。甲氧西林耐藥株對臨床常用抗菌藥物的耐藥率均高于甲氧西林敏感株。葡萄球菌屬和鏈球菌屬細(xì)菌中未發(fā)現(xiàn)萬古霉素和利奈唑胺耐藥株。發(fā)現(xiàn)1株萬古霉素耐藥屎腸球菌和2株糞腸球菌。結(jié)論 細(xì)菌耐藥性仍對臨床構(gòu)成嚴(yán)重威脅，應(yīng)引起臨床嚴(yán)重關(guān)注。

細(xì)菌耐藥性監(jiān)測； 藥物敏感性試驗； 萬古霉素耐藥腸球菌； 甲氧西林耐藥葡萄球菌

隨著抗菌藥物在臨床的廣泛使用，細(xì)菌不可避免地出現(xiàn)了耐藥性[1-2]。為了解本地區(qū)臨床分離革蘭陽性菌對常用抗菌藥物的敏感性，為合理使用抗菌藥物提供依據(jù)?，F(xiàn)將青浦地區(qū)臨床標(biāo)本中分離培養(yǎng)出的革蘭陽性菌，按統(tǒng)一監(jiān)測方案進(jìn)行細(xì)菌耐藥性監(jiān)測的結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 細(xì)菌來源

收集 2013年1月1日—12月31日，上海市青浦區(qū)朱家角人民醫(yī)院和復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院臨床分離的革蘭陽性菌，剔除同一患者相同部位的重復(fù)菌株，剔除非無菌體液標(biāo)本分離的凝固酶陰性葡萄球菌和草綠色鏈球菌，共315株，按統(tǒng)一方案進(jìn)行藥敏試驗。

1.2 方法

1.2.1 藥敏試驗 采用VITEK 2 Compact自動化儀器進(jìn)行藥敏試驗，測定革蘭陽性菌對臨床常用抗菌藥物的敏感性。質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌(金葡萄)ATCC 25923、肺炎鏈球菌ATCC 49619和糞腸球菌ATCC 29212。藥敏結(jié)果按CLSI 2014年版[3]標(biāo)準(zhǔn)判斷執(zhí)行。

1.2.2 耐藥菌的檢測 經(jīng)苯唑西林紙片法測定抑菌圈直徑≤19 mm的肺炎鏈球菌菌株，采用青霉素E試驗條測定其最低抑菌濃度(MIC)值，腦膜炎株和非腦膜炎株分別按CLSI 2014年標(biāo)準(zhǔn)判定為青霉素敏感、中介或耐藥株[3]。耐萬古霉素腸球菌(VRE)檢測，經(jīng)萬古霉素紙片法測定結(jié)果為非敏感株者，用萬古霉素和替考拉寧E試驗條測定MIC值。

1.2.3 統(tǒng)計分析 WHONET 5.6軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和分析，統(tǒng)計細(xì)菌對臨床常用抗菌藥物的耐藥率和敏感率，并按2014年版CLSI標(biāo)準(zhǔn)判斷結(jié)果[3]。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌分布

315株革蘭陽性菌中，腸球菌屬細(xì)菌、金葡菌和凝固酶陰性葡萄球菌分別占40.2%(127/315)、36.4%(115/315)和20.2%(64/315)，β溶血鏈球菌、克氏庫克菌分別占2.2%(7/315)、0.6%(2/315)。住院患者分離株占95.2%(300/315)， 門急診患者分離株占4.8%(15/315)。細(xì)菌在各類標(biāo)本中的分布為尿液31.1%(98/315)、血液24.4%(77/315)、傷口膿液22.9%(72/315)、呼吸道分泌物 18.7%(59/315)、各種無菌體液(膽汁、胸腹水、腦脊液等)占2.9%(9/315)。呼吸道標(biāo)本和傷口膿液標(biāo)本中最常見的分離菌依次為金葡菌和腸球菌屬細(xì)菌；尿液標(biāo)本中為腸球菌屬細(xì)菌和金葡菌；血液標(biāo)本中為凝固酶陰性葡萄球菌、腸球菌屬細(xì)菌和金葡菌。

2.2 耐藥菌的檢出率

甲氧西林耐藥葡萄球菌：甲氧西林耐藥金葡菌(MRSA)的檢出率占金葡菌的48.7%(56/115)。凝固酶陰性葡萄球菌中甲氧西林耐藥凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)的檢出率為82.8%(53/64)。

VRE：127株腸球菌屬細(xì)菌中糞腸球菌73株、屎腸球菌48株，其他腸球菌屬6株。發(fā)現(xiàn)3株VRE，其中糞腸球菌2株、屎腸球菌1株。MIC測定結(jié)果顯示，VRE菌株對替考拉寧也呈耐藥，提示其基因型可能為vanA型耐藥。

表1 葡萄球菌屬細(xì)菌對臨床常用抗菌藥物耐藥率和敏感率

2.3 革蘭陽性菌對各類抗菌藥物的耐藥率

葡萄球菌屬： MRSA對各類受試抗菌藥物的耐藥率較甲氧西林敏感金葡菌(MSSA)顯著為高。MSSA除對青霉素的耐藥率高(83.1%)以及對紅霉素和四環(huán)素的耐藥率分別為30.5%和13.6%外，對其他抗菌藥物如β內(nèi)酰胺類、利福平、氟喹諾酮類、慶大霉素和甲氧芐啶-磺胺甲口惡唑的耐藥率均<6%。MRCNS對上述抗菌藥物的耐藥率亦均較甲氧西林敏感凝固酶陰性葡萄球菌(MSCNS)顯著為高。MSCNS除對青霉素的耐藥率高(72.7%)以及對紅霉素和克林霉素的耐藥率相對較高外，對其他抗菌藥物如β內(nèi)酰胺類、氟喹諾酮類、利福平、慶大霉素和甲氧芐啶-磺胺甲口惡唑的耐藥率均<10%。金葡菌和凝固酶陰性葡萄球菌中均未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素、替考拉寧和利奈唑胺耐藥菌株。見表1。

腸球菌屬：127株腸球菌屬細(xì)菌中糞腸球菌和屎腸球菌分別占57.5%和37.8%，其他腸球菌占4.7%。糞腸球菌對絕大多數(shù)受試抗菌藥物的耐藥率較屎腸球菌為低。兩者對高濃度慶大霉素和高濃度鏈霉素的耐藥率均在40%以上。屎腸球菌對氨芐西林的耐藥率高達(dá)93.6%，而糞腸球菌僅為24.7%。發(fā)現(xiàn)1株萬古霉素耐藥屎腸球菌和2株萬古霉素耐藥糞腸球菌。見表2。

表2 腸球菌屬對抗菌藥物的耐藥率和敏感率

溶血鏈球菌：7株β溶血鏈球菌除對呋喃妥因和四環(huán)素分別有5株和4株敏感外，對其他抗菌藥物均敏感。未發(fā)現(xiàn)萬古霉素或利奈唑胺耐藥株。

3 討論

2013年監(jiān)測的315株臨床分離革蘭陽性菌中，腸球菌屬、金葡菌和凝固酶陰性葡萄球菌居前3位。分離菌株分布以住院患者為主，占95.2%，門急診患者占4.8%。

金葡菌和凝固酶陰性葡萄球菌中甲氧西林耐藥株的檢出率分別為48.7%和82.8%，MRSA檢出率低于2012年上海市細(xì)菌耐藥監(jiān)測結(jié)果，高于2013年中國CHINET細(xì)菌耐藥監(jiān)測結(jié)果；而MRCNS的檢出率均高于上述兩監(jiān)測網(wǎng)的結(jié)果[4-5]。

本組資料發(fā)現(xiàn)3株VRE，從標(biāo)本來源看，尿液標(biāo)本中分離到萬古霉素耐藥的糞腸球菌和屎腸球菌各1株，傷口膿液標(biāo)本中分離到1株萬古霉素耐藥糞腸球菌。從科室分布看，3株VRE菌株來源于3個不同的科室，提示此3株VRE菌株可能不存在克隆相關(guān)性。根據(jù)萬古霉素和替考拉寧MIC結(jié)果表型推測，3株VRE菌株對萬古霉素的耐藥機(jī)制可能為vanA型。

CLSI明確規(guī)定[3]，甲氧西林耐藥菌株必須報告對所有的β內(nèi)酰胺類藥物耐藥，即使是體外藥敏試驗結(jié)果顯示敏感者，其原因是因為在該菌的基因組中含有耐藥決定因子mecA基因，mecA基因編碼一種對β內(nèi)酰胺類親和力很低的青霉素結(jié)合蛋白(PBP)2a，所以當(dāng)正常PBP被抗生素結(jié)合而失活時，PBP2a可取代正常PBP而發(fā)揮催化細(xì)胞壁合成的作用[6]。本組資料顯示，甲氧西林耐藥菌株對β內(nèi)酰胺類藥物的耐藥率≥90%，且對多數(shù)其他抗菌藥物的耐藥率也在60%以上。提示此類耐藥菌株引起的感染將給臨床抗感染治療帶來挑戰(zhàn)。

醫(yī)院重癥監(jiān)護(hù)病房(ICU)由于患者多，病室人員進(jìn)出頻繁，病床間隔距離小，隔離措施往往不到位，沒有嚴(yán)格遵守消毒隔離措施或ICU通風(fēng)設(shè)施不完備等，容易引起耐藥菌株的大量滯留；加上醫(yī)務(wù)人員在實施各項診療操作過程中， 通過手接觸醫(yī)療器械、床頭柜、物品等，致病原菌黏附在以上物品表面，相互接觸而傳播，發(fā)生醫(yī)院感染[7]。本組資料顯示，56株MRSA和53株MRCNS菌株中，分別有32%和30%菌株分離自ICU，提示ICU內(nèi)可能存在MRSA或MRCNS克隆菌株的流行播散。臨床應(yīng)加強(qiáng)醫(yī)務(wù)人員醫(yī)院感染防控意識，嚴(yán)格各項診療規(guī)范， 防止患者和醫(yī)務(wù)人員的交叉感染。

[1] Report of the ASM task force on antibiotic resistance[J]. Antimicrob Agents Chemother, 1995, (Suppl): 1-23.

[2] Words Health Organization. WHO global strategy for containment of antimicrobial resistance[EB/OL]. WHO/CDS/CSR/DRS/ 2001. 2.

[3] Clinical and Laboratory Standads Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing[S].Twenty-fourth Informational Supplement,2014,M100-S24.

[4] 朱德妹，汪復(fù)，郭燕，等. 2012年上海地區(qū)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測[J].中國感染與化療雜志, 2013, 13(6): 409-419.

[5] 胡付品，朱德妹，汪復(fù)，等. 2013年中國CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測[J].中國感染與化療雜志, 2014, 14(5): 369-378.

[6] 章銳鋒，徐志江. 社區(qū)獲得性MRSA感染的臨床特征和耐藥性分析[J]. 中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志, 2004, 24(7): 573-576.

[7] 薛利霞，周鐵麗，石娜，等. 重癥監(jiān)護(hù)病房MRSA感染暴發(fā)調(diào)查及對策[J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 2009, 19(18): 2410-2412.

Surveillance of bacterial resistance in the gram-positive bacteria isolated from hospitals in Qingpu, Shanghai during 2013

CAI Hongmei, TANG Zhijian, FEI Fengying

. (Zhujiajiao People′s Hospital of Qingpu, Shanghai 201713, China)

Objective To investigate the antibiotic resistance of clinical gram-positive bacteria isolated from hospitals in Qingpu District from January through December of 2013. Methods Antimicrobial susceptibility testing was carried out for the clinical gram-positive isolates according to an agreed protocol using automated system. Results were analyzed according to the CLSI breakpoints released in 2014. Results Of the 315 isolates,Enterococcusspp.,Staphylococcusaureus, and coagulase-negativeStaphylococcusaccounted for 40.3% (127/315), 36.5% (115/315), and 20.3% (64/315), respectively. The overall prevalence of methicillin-resistant strains was 48.7% inS.aureus(MRSA), and 82.8% in coagulase-negativeStaphylococcus. MRSA strains were more resistant to antimicrobial agents than methicillin-sensitive strains. NoStaphylococcusorStreptococcusstrains were found resistant to vancomycin or linezolid. Overall, one strain ofE.faeciumand 2 strains ofE.faecaliswere found resistant to vancomycin. Conclusions Antibiotic resistance poses a serious threat to clinical practice, to which more attention should be paid.

bacterial resistance surveillance; antimicrobial susceptibility testing; vancomycin-resistantEnterococcus; methicillin-resistantStaphylococcus

上海市青浦區(qū)科學(xué)技術(shù)委員會青發(fā)科2013-18。

1. 上海市青浦區(qū)朱家角人民醫(yī)院檢驗科，上海 201713； 2. 復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院。

蔡紅妹(1970—)，女，學(xué)士，主管技師，主要從事臨床微生物檢驗。

蔡紅妹，E-mail: dianhushan@163.com。

R378

A

1009-7708(2015)04-0368-04

2014-12-24

2015-02-11