桑黃原種栽培種培養(yǎng)基質(zhì)試驗(yàn)研究

孫 堅(jiān)，張世義，薛峰，田年軍

(1.吉林省長(zhǎng)白朝鮮族自治縣龍泉鎮(zhèn)林場(chǎng)，白山134400；2.吉林省長(zhǎng)白森林經(jīng)營(yíng)局多種經(jīng)營(yíng)公司，白山134400；3.吉林省白山市林業(yè)科學(xué)研究院，白山134300)

藥用真菌指的是具有藥用功效和有益于人類健康的菇耳菌蕈，是一種天然的真菌藥物，是國(guó)藥寶庫中的精華之一，自古以來被視為醫(yī)療養(yǎng)生的珍品。由于藥用真菌具有提高免疫力、抗腫瘤等多種功效，桑黃是生物抗癌領(lǐng)域有效率最高的真菌，為國(guó)際公認(rèn)，近年來藥用真菌的開發(fā)研究已成為天然藥物中極具開發(fā)前途的一個(gè)重要領(lǐng)域。

桑黃 （Phellinusspp.）是一種珍稀大型藥用真菌，其藥用價(jià)值早在唐朝 《藥性論》中就有記載。桑黃菌菌種的生產(chǎn)，是整個(gè)桑黃栽培過程中非常重要的一環(huán)。只有優(yōu)良的菌種，再配以良好的栽培條件，才可能成功獲得桑黃子實(shí)體。優(yōu)良菌種獲得的關(guān)鍵除了菌種種類外，關(guān)鍵的就是培養(yǎng)基或培養(yǎng)基質(zhì)的選擇，只有合適的培養(yǎng)基質(zhì)才能獲得健壯、有活力的優(yōu)良菌種。該實(shí)驗(yàn)從母種培養(yǎng)基選擇、原種培養(yǎng)基選擇、栽培種培養(yǎng)料的選擇3方面著手，以期獲得優(yōu)良桑黃菌種，為成功培養(yǎng)桑黃菌子實(shí)體提供前提保障。該試驗(yàn)是 “桑黃培養(yǎng)基質(zhì)優(yōu)化及短段木栽培技術(shù)的研究”項(xiàng)目?jī)?nèi)容一部分。

1 桑黃菌原種培養(yǎng)基篩選試驗(yàn)

1.1 材料與方法

1.1.1 供試菌株

桑黃菌株 （火木層孔菌Phellinusigniarius），2004年采自長(zhǎng)白山系的老嶺山脈森林中的柞木 （蒙古櫟）上。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)方法

選用5種桑黃原種培養(yǎng)基。

（1）玉米培養(yǎng)基：將干玉米用水泡4h后，放入沸水中煮開后撈出，控水，加入1%石膏，攪拌混勻。

（2）桑木屑培養(yǎng)基：桑木屑77%、麥麩10%、玉米面10%、葡萄糖2%、石膏1%，攪拌混勻。

（3）柞木屑培養(yǎng)基：柞木屑77%、麥麩10%、玉米面10%、葡萄糖2%、石膏1%，攪拌混勻。

（4）楊木屑培養(yǎng)基：楊木屑77%、麥麩10%、玉米面10%、葡萄糖2%、石膏1%，攪拌混勻。

（5）樺木屑培養(yǎng)基：樺木屑77%、麥麩10%、玉米面10%、葡萄糖2%、石膏1%，攪拌混勻。將培養(yǎng)基分別制備好，裝入高10 cm，直徑為8 cm罐頭瓶培養(yǎng)桑黃菌，每個(gè)處理3次重復(fù)，高壓蒸汽滅菌，壓力1.5kg/cm2，持續(xù)1～1.5 h，溫度121℃。于無菌條件下接種，接種后在25℃～28℃條件下密閉遮光培養(yǎng)，觀察記錄各培養(yǎng)基上菌絲的發(fā)菌狀況、菌絲長(zhǎng)勢(shì)、菌絲生長(zhǎng)速度等，篩選桑黃菌的適原種培養(yǎng)基。

1.2 結(jié)果與分析

桑黃菌絲在5種原種培養(yǎng)基質(zhì)上均可生長(zhǎng)，但不同的培養(yǎng)基質(zhì)對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響差異顯著 （P＜0.05）。玉米培養(yǎng)基中，桑黃菌長(zhǎng)勢(shì)最好，生長(zhǎng)速度快，30天左右就可以長(zhǎng)滿瓶，菌絲顏色為棕黃色，表面菌絲扭結(jié)，有很厚的菌苔；柞木屑培養(yǎng)基中長(zhǎng)勢(shì)很好，菌絲均勻，37天基本長(zhǎng)滿瓶，顏色棕黃；楊木屑和樺木屑培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)密集，長(zhǎng)勢(shì)較好，新生菌絲體顏色鮮黃，菌絲生長(zhǎng)速度相對(duì)較慢；桑木屑培養(yǎng)基上，菌絲長(zhǎng)勢(shì)好表面菌絲密集，新生菌絲顏色嫩黃，但菌絲生長(zhǎng)速度緩慢，50天方可長(zhǎng)滿瓶。比較這5種原種培養(yǎng)基上桑黃菌絲生長(zhǎng)長(zhǎng)勢(shì)和速度，玉米培養(yǎng)基最優(yōu)，但成本最高，4種木屑培養(yǎng)基中柞木屑培養(yǎng)基更適合制作桑黃菌原種。

圖2-1 桑黃在5種原種培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況(x士S.D n=3）

2 桑黃菌栽培種基質(zhì)篩選試驗(yàn)

2.1 材料與方法

2.1.1 供試菌株

桑黃菌株 （火木層孔菌 Phellinus igniarius），2004年采自長(zhǎng)白山系的老嶺山脈森林中的柞木 （蒙古櫟）上。

2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法

桑黃的人工栽培基質(zhì)的選擇，根據(jù)原種培養(yǎng)基篩選結(jié)果，進(jìn)一步降低擴(kuò)繁成本，采用就地取材的原則，設(shè)計(jì)5種栽培種培養(yǎng)基如下。

（1）木屑麥麩培養(yǎng)基：柞木屑80%，麥麩18%，蔗糖1%，石膏1%；

（2）木屑稻糠培養(yǎng)基：柞木屑 77%，細(xì)稻糠 22%，石膏1%；

（3）棉子殼木屑培養(yǎng)基：柞木屑50%，棉子殼39%，麥麩10%，石膏1%；

（4）木屑玉米芯培養(yǎng)基：柞木屑65%，玉米芯34%，石膏1%；

（5）玉米芯麥麩培養(yǎng)基：玉米芯80%，麥麩 19%，石膏1%。

分別配制栽培料基質(zhì)，將配好的培養(yǎng)料裝入高10cm，直徑8 cm罐頭瓶中培養(yǎng)瓶，高壓蒸汽滅菌，壓力1.5 kg/cm2，持續(xù)1～1.5 h，溫度121℃。于無菌條件下接種，接種后在25℃～28℃條件下密閉遮光培養(yǎng)，觀測(cè)發(fā)菌狀況。通過考察記錄菌絲的發(fā)菌狀況、菌絲特征、滿瓶時(shí)間，篩選桑黃菌人工培養(yǎng)的適宜材料。

2.2 結(jié)果與分析

不同培養(yǎng)基配方對(duì)栽培種菌絲生長(zhǎng)的影響，從表2-2結(jié)果顯示在5種栽培基上菌絲的生長(zhǎng)速度存在顯著的差異，桑黃菌絲在棉子殼木屑麥麩培養(yǎng)基上生長(zhǎng)速度最快，其長(zhǎng)滿袋時(shí)間為36天，生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)、菌絲較密、淡黃色；在木屑麥麩培養(yǎng)基上生長(zhǎng)速度次之，其長(zhǎng)滿袋時(shí)間為39天；在玉米芯麥麩培養(yǎng)基上長(zhǎng)速最慢，51天長(zhǎng)滿菌袋，且長(zhǎng)勢(shì)弱，菌絲較稀疏。

表2-1 桑黃在5種原種培養(yǎng)基質(zhì)上的生長(zhǎng)情況

表2-2 桑黃在5種培養(yǎng)基質(zhì)上的生長(zhǎng)情況

因此，根據(jù)綜合指標(biāo)，棉子殼木屑麥麩培養(yǎng)基為栽培種最佳培養(yǎng)基。

3 結(jié)論與建議

該研究通過對(duì)桑黃真菌類群中的火木層孔菌 (Phellinusigniarius)5種原種培養(yǎng)基上桑黃菌絲生長(zhǎng)長(zhǎng)勢(shì)和速度的對(duì)比試驗(yàn)表明，玉米粒培養(yǎng)基最適合用來制作桑黃菌原種，4種木屑原種培養(yǎng)基中柞木屑培養(yǎng)基最佳，其配方為柞木屑77%、麥麩10%、玉米面10%、葡萄糖2%、石膏1%。在對(duì)5種栽培種培養(yǎng)基質(zhì)上桑黃菌絲生長(zhǎng)長(zhǎng)勢(shì)和速度對(duì)比試驗(yàn)中，結(jié)果表明棉子殼木屑培養(yǎng)基培養(yǎng)效果最好，其配方為：柞木屑50%，棉子殼39%，麥麩10%，石膏1%。

建議對(duì)桑黃真菌類群中的火木層孔菌 (Phellinus igniarius)原種、栽培種的菌種制作及培養(yǎng)，培養(yǎng)基質(zhì)及菌木樹種的選擇與優(yōu)化做進(jìn)一步系統(tǒng)研究。