鈴木氏果蠅田間種群對(duì)6種常用殺蟲劑敏感性測(cè)定

林清彩等

摘要：

以在果樹上廣泛應(yīng)用的6種殺蟲劑為供試藥劑，采用胃毒觸殺聯(lián)合毒力測(cè)定方法測(cè)定了鈴木氏果蠅實(shí)驗(yàn)室種群及山東濟(jì)南、泰安、萊蕪、煙臺(tái)、云南富民和浙江溫州等6個(gè)地區(qū)田間種群成蟲對(duì)這幾種藥劑的敏感性。毒力測(cè)定結(jié)果表明，吡蟲啉和阿維菌素的相對(duì)毒力低于甲維鹽、多殺霉素、印楝素、高效氯氟氰菊酯。除萊蕪種群對(duì)印楝素LC50抗性倍數(shù)為3.28，敏感性較低外，其它種群對(duì)幾種藥劑均處于敏感階段。

關(guān)鍵詞：鈴木氏果蠅；殺蟲劑；相對(duì)毒力

中圖分類號(hào)：S433文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942（2015）03-0092-04

Susceptibility of Drosophila suzukii to Six Common Insecticides

Lin Qingcai1，2， Zhai Yifan1， Zhou Xianhong1， Zhang Xiaoyan1， Zhuang Qianying1， Zhou Chenggang2*， Yu Yi1*

（ 1. Institute of Plant Protection， Shandong Academy of Agricultural Sciences， Jinan 250100， China；

2. College of Plant Protection， Shandong Agricultural University， Taian 271018， China）

AbstractUsing 6 kinds of pesticides that are widely used in fruit tree management as the test agents， the susceptibility of Drosophila suzukii laboratory population and 6 field populations inside and outside the region of Shandong Province to agents were measured using stomach-tag combined with toxicity test method. The results showed that the relative toxicities of imidacloprid and avermectin were lower than those of emamectin benzoate， spinosad， azadirachtin and cyhalothrin. Except that the LC50 resistance ratio of Drosophila suzukii population from Laiwu to azadirachtin was 3.28， which showed low sensitivity， the other populations were all sensitive to the 6 kinds of pesticides.

Key wordsDrosophila suzukii； Insecticides； Relative toxicity

鈴木氏果蠅（Drosophila suzukii），又稱櫻桃果蠅、斑翅果蠅，隸屬雙翅目（Diptera）環(huán)裂亞目（Cyclorrhapha）果蠅科（Drosophilidae）果蠅屬（Drosophila）水果果蠅亞屬（Sophophora）。目前在藍(lán)莓、黑莓、櫻桃、草莓、李子、桃子、葡萄、無(wú)花果、獼猴桃和梨等水果上均有危害[1]。鈴木氏果蠅喜為害將要成熟的櫻桃[2]，其產(chǎn)卵器呈鋸齒狀且有一定硬度，可以輕易刺破果皮，將卵產(chǎn)于完好果實(shí)內(nèi)部，外表上唯一可見的損害狀僅有微小產(chǎn)卵痕，卵孵化后幼蟲蛀食為害，使果實(shí)完全軟化、變褐以致腐爛，大大降低水果的產(chǎn)量和質(zhì)量。自2012年以來(lái)，山東大部分櫻桃種植地區(qū)均受到嚴(yán)重的果蠅危害，據(jù)調(diào)查如果不加強(qiáng)果園管理及時(shí)采取防治措施，特別是中晚熟品種果園內(nèi)櫻桃受害率達(dá)到95%。

阿維菌素是一種天然產(chǎn)物，可以從土壤微生物中分離出來(lái)，對(duì)昆蟲和螨類具有觸殺和胃毒作用[3]，其滲透力強(qiáng)，且殘效期長(zhǎng)[4，5]，目前正在蔬菜、果樹、水稻等農(nóng)作物上大量使用。甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（簡(jiǎn)稱甲維鹽，Emamectin benzoate）是以土壤微生物阿維鏈霉菌發(fā)酵產(chǎn)物阿維菌素B1為母體化合物，進(jìn)行衍生、優(yōu)化合成的一種新型高效抗生素類殺蟲、殺螨劑[6，7]，具有生物源、無(wú)公害等特點(diǎn)，因而被廣泛應(yīng)用于綠色農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)。多殺菌素（Spinosad）是由土壤放線菌（Saccharopolyspora spinosa）經(jīng)有氧發(fā)酵產(chǎn)生的胞內(nèi)次級(jí)代謝產(chǎn)物，以spinosyA和spinosyD為主要成分，屬于大環(huán)內(nèi)酯類化合物。由于其對(duì)靶標(biāo)害蟲高效、對(duì)非靶標(biāo)生物安全、低殘留、降解快等優(yōu)點(diǎn)，自成功實(shí)施商業(yè)化的第二年即獲得美國(guó)“總統(tǒng)綠色化學(xué)品挑戰(zhàn)獎(jiǎng)”。印楝素主要通過(guò)擾亂昆蟲內(nèi)分泌激素的平衡，影響新陳代謝，破壞正常的生長(zhǎng)發(fā)育[8]；直接或間接破壞昆蟲口器的化學(xué)感受器使之產(chǎn)生拒食作用[9]；通過(guò)對(duì)中腸消化酶的作用使得食物的營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)換不足，影響昆蟲的生長(zhǎng)發(fā)育；Robert和Denis（1993）[10]發(fā)現(xiàn)印楝素對(duì)小菜蛾有直接毒殺和殺卵作用。高效氯氟氰菊酯（簡(jiǎn)稱功殺）是一種廣譜、高效的速效性擬除蟲菊酯類殺蟲劑，以觸殺和胃毒作用為主，可防治果樹、蔬菜、糧食作物上的多種害蟲，同時(shí)，其作為第3代擬除蟲菊酯類藥劑具有對(duì)害蟲抗性發(fā)展較慢的特點(diǎn)。吡蟲啉作用于昆蟲中樞神經(jīng)系統(tǒng)的乙酰膽堿受體，具有內(nèi)吸、廣譜、高效、高持效性、對(duì)哺乳動(dòng)物低毒等優(yōu)良特性，對(duì)多種刺吸式口器和部分嚼吸式口器害蟲具有良好的防治效果[11，12]，廣泛用于作物、果蔬、花卉、林木等害蟲防治，是目前世界范圍內(nèi)主要使用的農(nóng)藥之一?；谝陨蠋追N殺蟲劑的廣譜、高效、低毒、低殘留等特點(diǎn)，所以選擇這幾種藥劑進(jìn)行生物測(cè)定試驗(yàn)。endprint

為防止果蠅危害、提高水果品質(zhì)、減少經(jīng)濟(jì)損失、滿足綠色水果生產(chǎn)的需要，筆者采集了山東省內(nèi)外6個(gè)櫻桃和楊梅重要種植地的鈴木氏果蠅，對(duì)阿維菌素、甲維鹽、多殺霉素、印楝素、高效氯氟氰菊酯和吡蟲啉等6種常用高效低毒殺蟲劑進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定試驗(yàn)，以分析了解不同地區(qū)鈴木氏果蠅對(duì)6種殺蟲劑的敏感性及是否產(chǎn)生抗性。

1材料與方法

1.1試蟲來(lái)源

實(shí)驗(yàn)室種群：2011年4月在泰安采集的鈴木氏果蠅，用市場(chǎng)購(gòu)置的葡萄進(jìn)行飼養(yǎng)，期間未接觸任何藥劑，用于毒力測(cè)定時(shí)已飼養(yǎng)27代，養(yǎng)蟲室內(nèi)溫度（25±1）℃、相對(duì)濕度（70±5）%、光周期16L∶8D、光照度10 000 lx。

田間種群：2013年5～7月先后在云南富民、浙江溫州和山東濟(jì)南、泰安、萊蕪、煙臺(tái)等楊梅或櫻桃種植地大量采集有鈴木氏果蠅幼蟲的病果，在實(shí)驗(yàn)室待幼蟲發(fā)育并大量羽化到成蟲，用其羽化3～5天的成蟲進(jìn)行毒力測(cè)定和酶活測(cè)定試驗(yàn)。

1.2供試藥劑

10%吡蟲啉可濕性粉劑、1.8%阿維菌素乳油、2.2%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽微乳劑（甲維鹽），浙江海正化工股份有限公司；25 g/L高效氯氟氰菊酯乳油（功殺），廣東立威化工有限公司；25 g/L多殺霉素懸浮劑（菜喜），美國(guó)陶氏益農(nóng)公司；5‰印楝素乳油，云南光明印楝素產(chǎn)業(yè)開發(fā)股份有限公司。

1.3毒力測(cè)定方法

參考慕衛(wèi)等（2004）[13]的胃毒觸殺聯(lián)合毒力測(cè)定方法。用清水將各供試藥劑分別稀釋成6～7個(gè)質(zhì)量濃度梯度。在直徑10 cm培養(yǎng)皿底部平鋪一張中速定性濾紙（杭州特種紙業(yè)有限公司），吸取已配好的相應(yīng)質(zhì)量濃度的待測(cè)藥液0.4 mL滴加在濾紙表面，使之正好完全潤(rùn)濕。將大小約2 cm×2 cm×3 mm的蘋果片在不同濃度的待測(cè)藥液中浸漬1 min后取出，置于鋪有相同藥液處理濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)。饑餓處理2 h的試蟲用CO2氣體麻醉 5 s后移入培養(yǎng)皿中。每個(gè)濃度處理25頭，重復(fù)3次，以清水為對(duì)照。處理后置于（25±1）℃、相對(duì)濕度（70±5）%、光周期16L∶8D的光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，藥后24 h檢查記錄試蟲死亡情況，以鈴木氏果蠅蟲體僵硬或不能正常爬行為死亡標(biāo)準(zhǔn)。

1.4數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)結(jié)果用POLO軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，得出致死LC50以及95%置信區(qū)間，酶活性測(cè)定數(shù)據(jù)用SPSS14.0軟件進(jìn)行處理，并用Duncans新復(fù)極差法檢驗(yàn)差異顯著性（P<0.05）。根據(jù)致死中濃度LC50，以吡蟲啉為標(biāo)準(zhǔn)殺蟲劑，計(jì)算其余5種殺蟲劑對(duì)實(shí)驗(yàn)室種群的相對(duì)毒力指數(shù)。以各殺蟲劑對(duì)不同地區(qū)種群的LC50值除以該殺蟲劑對(duì)實(shí)驗(yàn)室種群的LC50值，得到抗性倍數(shù)。抗性水平劃分標(biāo)準(zhǔn)參照沈晉良等（1991）[14]的方法：<3倍為敏感，3～5倍為敏感性下降，5～10倍為低水平抗性，10～40倍為中水平抗性，40～160倍為高水平抗性，>160倍為極高水平抗性。

2結(jié)果與分析

2.16種殺蟲劑對(duì)鈴木氏果蠅實(shí)驗(yàn)室種群毒力比較

所用實(shí)驗(yàn)室果蠅種群已經(jīng)飼養(yǎng)多年，將其視為敏感種群。表1顯示，甲維鹽、印楝素、多殺霉素和高效氯氟氰菊酯的毒力相對(duì)較高，而吡蟲啉和阿維菌素的毒力較低。

殺蟲劑斜率 ± 標(biāo)準(zhǔn)差LC50（mg/L）（95%置信區(qū)間）相對(duì)毒力指數(shù)抗性倍數(shù)

吡蟲啉 2.126±0.993111.230（89.507～138.225）1.001.00

阿維菌素 2.395±0.03868.884（58.065～81.718）0.621.00甲維鹽 1.937±0.0385.706（4.804～6.779）0.051.00

印楝素 1.978±0.0552.116（1.653～2.708）0.021.00

多殺霉素 2.866±0.04110.428（8.662～12.554）0.091.00

高效氯氟氰菊酯 2.368±0.0351.798（1.536～2.103）0.021.00

2.2鈴木氏果蠅田間種群對(duì)6種殺蟲劑的敏感性

由表2可見，甲維鹽、印楝素、多殺霉素及高效氯氟氰菊酯對(duì)濟(jì)南和煙臺(tái)種群，甲維鹽、印楝素及高效氯氟氰菊酯對(duì)泰安、萊蕪、溫州、富民種群相對(duì)毒力指數(shù)均小于0.1，毒性較強(qiáng)；甲維鹽對(duì)各田間種群，阿維菌素對(duì)煙臺(tái)、泰安、萊蕪、富民種群及多殺霉素對(duì)泰安、萊蕪、溫州、富民種群的相對(duì)毒力指數(shù)均小于1，毒性較強(qiáng)；而阿維菌素對(duì)濟(jì)南和溫州種群相對(duì)毒力指數(shù)≥1，毒性相對(duì)較低。

除萊蕪種群對(duì)印楝素的抗性倍數(shù)處于3～5，屬于敏感性降低，其它地區(qū)田間種群對(duì)6種殺蟲劑的抗性倍數(shù)均小于3，根據(jù)沈晉良等（1991）[14]抗性水平劃分標(biāo)準(zhǔn)，均未產(chǎn)生抗性（表2）。

3討論與結(jié)論

殺蟲劑對(duì)害蟲毒力的測(cè)定和抗性現(xiàn)狀的調(diào)查結(jié)果是害蟲綜合防治中殺蟲劑選用的重要依據(jù)。黑腹果蠅毒力測(cè)定方法有幼蟲胃毒觸殺聯(lián)合毒力法[15]；Bruck等（2011）[16]對(duì)鈴木氏果蠅室內(nèi)毒力測(cè)定時(shí)對(duì)成蟲直接噴藥。鈴木氏果蠅為害藍(lán)莓、櫻桃等漿果及核果類水果，這類水果不宜直接對(duì)其噴灑農(nóng)藥，應(yīng)在每株樹下的地面或雜草上噴藥或采用誘餌施放法。綜合考慮安全與實(shí)際應(yīng)用，本試驗(yàn)采用的成蟲胃毒觸殺聯(lián)合毒力法更更貼近田間實(shí)際用藥的情況，可以為田間防治提供更準(zhǔn)確的信息。

Bruck等（2011）[16]研究發(fā)現(xiàn)與其它類型的觸殺劑相比新煙堿類的殺成蟲功效并不理想，基于小漿果對(duì)農(nóng)藥的零耐受力及農(nóng)藥的獨(dú)立效果，新煙堿類目前不推薦用于鈴木氏果蠅的防治。本研究發(fā)現(xiàn)吡蟲啉與其它幾種藥劑相比毒力相對(duì)較低，但與實(shí)驗(yàn)室種群相比其它幾個(gè)地區(qū)種群對(duì)吡蟲啉仍然比較敏感，可在果實(shí)采收完后在果園內(nèi)使用該種農(nóng)藥控制種群基數(shù)。

但阿維菌素和甲維鹽的過(guò)量使用使其在農(nóng)產(chǎn)品中高殘留，害蟲已產(chǎn)生抗藥性，因此各國(guó)都已限量使用。本研究發(fā)現(xiàn)各地區(qū)種群鈴木氏果蠅對(duì)阿維菌素的敏感性普遍低于對(duì)甲維鹽的敏感性，但各地區(qū)種群對(duì)這兩種藥劑仍屬于敏感階段。endprint

在多殺霉素引入市場(chǎng)的幾年后即有文獻(xiàn)報(bào)道實(shí)驗(yàn)室和田間出現(xiàn)抗性昆蟲。Zhao等（2002）[17]報(bào)道美國(guó)夏威夷小菜蛾田間種群已對(duì)多殺霉素產(chǎn)生了316倍的抗性；Shono等 （2003）[18]研究的家蠅也對(duì)多殺霉素產(chǎn)生了>150倍的抗性；Bielza 等（2007）[19]報(bào)道了西班牙阿爾梅里亞田間采集的西花薊馬對(duì)多殺霉素的抗性倍數(shù)為13 500倍。高效氯氟氰菊酯又叫功夫菊酯，長(zhǎng)期使用易對(duì)其產(chǎn)生抗性。高效氯氟氰菊酯類和多殺霉素類殺蟲劑對(duì)鈴木氏果蠅高度有效，阿維菌素和印楝素對(duì)鈴木氏果蠅雄成蟲有較高的致死率[16]。本研究發(fā)現(xiàn)甲維鹽、多殺霉素、功殺和印楝素的相對(duì)毒力指數(shù)分別為0.05、0.09、0.02和0.02，對(duì)鈴木氏果蠅都有很好的防治效果，而阿維菌素和吡蟲啉的相對(duì)毒力指數(shù)分別是0.62和1.00，其毒力相對(duì)較低，防治效果可能稍弱。

本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)濟(jì)南、泰安和萊蕪地區(qū)種群對(duì)印楝素的抗性倍數(shù)比其它地區(qū)種群大，特別是萊蕪地區(qū)達(dá)到敏感性降低階段。印楝素處理黑腹果蠅幼蟲顯著影響成蟲的羽化率，部分試蟲羽化為畸形成蟲，表現(xiàn)為翅扭曲，不能展開，不能飛翔，此外，印楝素還可能會(huì)影響能夠羽化的雌蠅生殖力，主要表現(xiàn)在每雌產(chǎn)卵量隨印楝素含量的升高而迅速下降[20]。在實(shí)際操作中可選擇在鈴木氏果蠅危害的不同時(shí)期使用印楝素，充分利用印楝素的各種殺蟲作用機(jī)理，更有效地防治果蠅。

各地區(qū)田間種群對(duì)吡蟲啉、阿維菌素、甲維鹽、印楝素、多殺霉素和高效氯氟氰菊酯的敏感性仍處于較高水平，但實(shí)際應(yīng)用時(shí)應(yīng)嚴(yán)格規(guī)范操作，科學(xué)使用，防止鈴木氏果蠅對(duì)其產(chǎn)生高度抗性，造成嚴(yán)重后果。

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