吡喹酮衍生物DW-3-15對日本血吸蟲PZQ抗性蟲體的生物學效應觀察

趙 波，關志勛，段中良，許 靜，曹 蘊，林 彩，王言言，夏超明

吡喹酮衍生物DW-3-15對日本血吸蟲PZQ抗性蟲體的生物學效應觀察

趙 波，關志勛，段中良，許 靜，曹 蘊，林 彩，王言言，夏超明

目的 通過體外觀察吡喹酮(PZQ)衍生物DW-3-15對日本血吸蟲PZQ抗性蟲體的生物學效應，探討該衍生物作為抗日本血吸蟲候選新藥的潛在價值。方法 單性日本血吸蟲尾蚴(70±5條)感染小鼠，21 d后，用PZQ的半數有效劑量(ED50，25.98 mg/kg)對小鼠進行灌胃給藥，每天一次，連續30 d，停藥21 d后，再給予小鼠治療劑量PZQ(200 mg/kg)，連續5 d，停藥2周后肝門靜脈灌注收集蟲體，置DMEM培養液中培養，分別加入不同濃度PZQ和DW-3-15，作用16 h后換新鮮培養液，繼續培養72 h，每隔24 h體視顯微鏡下觀察、記錄一次蟲體活力和形態變化，評價誘導蟲體對PZQ及DW-3-15的敏感性。結果 PZQ和DW-3-15體外作用于未誘導日本血吸蟲成蟲的臨界致死濃度(作用蟲體72 h活力降低率達90%的最低濃度)分別為14 μmol/L和45 μmol/L；誘導蟲體對PZQ的敏感性較未誘導蟲體顯著下降，是其臨界致死濃度的8倍(112 μmol/L)，而誘導蟲體對DW-3-15的敏感性與未誘導蟲體相比沒有明顯差異，臨界致死濃度仍為45μmol/L。結論 經誘導的日本血吸蟲PZQ抗性蟲體對DW-3-15沒有交叉抗性；提示DW-3-15抗日本血吸蟲的靶點可能與PZQ不同，具有作為抗日本血吸蟲候選新藥的潛在價值，值得進一步研究。

日本血吸蟲；吡喹酮；DW-3-15；交叉抗性

血吸蟲病(schistosomiasis)是由裂體吸蟲屬血吸蟲引起的一種人畜共患、慢性消耗性寄生蟲病，分布廣泛，嚴重損害人類健康，主要流行于熱帶和亞熱帶地區，據報道，僅在撒哈拉以南的非洲每年就有將近30萬人死于血吸蟲病[1-4]。

20世紀70年代中期，吡喹酮(praziquantel)的發明是抗血吸蟲病藥物發展史上的一個里程碑。由于該藥口服方便、低毒、高效和療程短(1～2 d)，適于群體治療,故迅速得到推廣應用,并對全球血吸蟲病的防治產生深遠影響[5]。在許多國家，使用PZQ大規模治療血吸蟲病獲得成功[6-7]，并且因為它的效應優勢和低廉的價格，已經成為大多數國家血吸蟲病治療的首選藥物[8-9]，但僅僅依賴一種藥物治療疾病是非常危險的[10]，往往存在抗藥性產生的可能性。 PZQ 的廣泛使用也可能促進其抗性蟲株的產生，已有關于抗PZQ曼氏血吸蟲蟲株產生的報道(現場和實驗室)[11]。雖然目前還沒有日本血吸蟲對PZQ有抗性的臨床證據，但如果抗性株一旦出現，而沒有替代藥，將使血防工作受到嚴重威脅，故發展抗血吸蟲新藥具有重要意義。

本研究應用前期優化的日本血吸蟲PZQ抗性蟲體誘導方案[12]，獲得對PZQ具有一定程度抗性的蟲體，體外觀察其對PZQ衍生物DW-3-15的敏感性，探討誘導蟲體對PZQ和DW-3-15是否存在交叉抗性，評價DW-3-15作為抗日本血吸蟲候選新藥的潛在價值。

1 材料

1.1 陽性釘螺與實驗動物 日本血吸蟲陽性釘螺購于江蘇省血吸蟲病防治研究所。

ICR小鼠由蘇州大學實驗動物中心提供，雌性，6～8周齡，20～25 g，清潔級。

1.2 藥物與試劑 1)片劑PZQ，南京制藥廠有限公司生產。2)粉劑DW-3-15，蘇州大學藥學院合成。3)青霉素-鏈霉素溶液(Penicillin-Streptomycin Solution)、培養液(DMEM/LOW GLUCOSE)均購自HyClone公司。4)胎牛血清，購自浙江天杭生物科技有限公司。5) 氯化鈉(NaCl)，二水合檸檬酸三鈉，氫氧化鈉(NaOH)，二甲基亞砜(DMSO)均為國產分析純。

2 方 法

2.1 藥物與試劑配制 1)生理鹽水：稱NaCl固體8.5 g，用雙蒸水溶解，用10 mol/L NaOH溶液調pH值至7.2～7.4，最后用雙蒸水定容至1 000 mL，高壓滅菌后備用。2)檸檬酸鈉溶液：分別稱量NaCl固體8.5 g、二水合檸檬酸三鈉固體15 g，溶于雙蒸水，用10 mol/L NaOH溶液調pH值至7.2～7.4，最后用雙蒸水定容至1 000 mL，高壓滅菌后備用。以上兩種溶液用前均置37 ℃培養箱預熱。3)藥物配制：小鼠體內用藥用雙蒸水配制，根據亞治療劑量(ED50，25.98 mg/kg)和治療劑量(200 mg/kg)、小鼠體重和個數、用藥天數計算后分別配制；體外實驗用藥均用DMSO配制，先配制成合適的工作濃度，4 ℃冰箱保存備用，體外用藥時根據實際需要濃度加入適當體積。4)DMEM(Dulbecco-modified Minimum Eagle’Medium)完全培養液：按DMEM(LOW GLUCOSE)100 mL、胎牛血清20 mL、青霉素/鏈霉素溶液1.2 mL的比例配制，所用容器均需經泡酸和滅菌處理，無菌操作，短期內4 ℃冰箱保存備用。

2.2 實驗動物模型建立

(1)日本血吸蟲單性感染小鼠模型的建立

按常規逸尾蚴方法獲得日本血吸蟲尾蚴，單只陽性釘螺逸出的日本血吸蟲尾蚴(單性)70±5條經腹部皮膚感染每只小鼠，共150只。

(2)日本血吸蟲PZQ抗性蟲體的誘導

將上述同時感染的小鼠分為兩組，一組作為未誘導對照組，另一組用于PZQ抗性蟲體誘導。根據本課題組前期實驗測得的PZQ治療小鼠體內日本血吸蟲的半數有效致死劑量(ED50，25.98 mg/kg)配制PZQ混懸液，對感染后21 d的誘導組小鼠進行灌胃給藥，每天于相同時間點灌胃一次，每鼠給藥體積為0.3 mL，連續給藥30 d。停藥21 d，再用治療劑量(200 mg/kg)PZQ連續給藥5 d，每天一次。給藥結束2周后，同時解剖兩組小鼠，采用肝門靜脈灌注法收集蟲體。

2.3 日本血吸蟲體外培養 將上述收集到的雄性成蟲，置于六孔細胞培養板中，每孔5條蟲、3 mL DMEM完全培養液，分別加入不同濃度的藥物，置37 ℃、5%CO2培養箱中培養過夜(作用16 h)后，吸出培養液，用生理鹽水將蟲體清洗兩次，更換新的培養液，繼續培養72 h，期間每隔24 h在體視顯微鏡下觀察并記錄一次蟲體活力情況，并進行評分。

上述操作均為無菌操作。

用DMSO配制體外用藥，對照組加DMSO(參考實驗組最高加藥量)。對照組蟲體需維持100%的存活狀態，如有污染的情況，本次實驗視為無效。

2.4 體外培養日本血吸蟲活力觀察

(2)活力評分標準：

根據蟲體的活動力、體態柔和度及透明度將體外培養的日本血吸蟲給予不同的分值，具體評分標準如下：

3分：蟲體運動活躍、體態柔和、顏色透明。

2分：蟲體活動力略差、體態稍僵硬、顏色為半透明；

1分：蟲體僅頭部或尾部輕微活動、體態僵硬、顏色呈白色、不透明；

0分：蟲體仍處于收縮狀態，沒有恢復運動，不透明，定義為“死亡”；

2.5 統計學處理 分別將各組的蟲體存活數量、活力分值等數據輸入Excel和SPSS16.0數據庫中，上述實驗結果以3次重復實驗數據的均值表示，進行分析。組間差異比較采用t檢驗，樣本率比較應用χ2檢驗。以P<0.05作為統計學上有顯著性意義的判別標準。

2 結 果

2.1 PZQ和DW-3-15抗日本血吸蟲成蟲的生物學效應 表1顯示，未誘導蟲體在PZQ和DW-3-15濃度分別為14 μmol/L和45 μmol/L時，作用72 h后蟲體存活率均為20.0%，活力降低率均為93.3%，與未加藥組(C)相比差異均有統計學意義(P<0.01)。

表1 PZQ和DW-3-15體外抗日本血吸蟲成蟲的臨界致死濃度

注：上述數據為4次重復實驗結果。

Note: The above data is repeated by 4 times.

2.2 誘導蟲體對PZQ和DW-3-15的敏感性觀察 表2顯示，PZQ濃度為14 μmol/L時，作用72 h后誘導蟲體存活率仍高達100.0%，活力降低率僅為30.0%，當PZQ濃度高達抗未誘導蟲體臨界致死濃度的8倍(112 μmol/L)時，作用72 h后蟲體存活率降低為35.0%，活力降低率達到88.3%，與未誘導蟲體相比，均具有顯著性差異(P<0.01)，提示誘導蟲體對PZQ的敏感性明顯降低；而DW-3-15濃度為45 μmol/L時，作用72 h后誘導蟲體存活率僅為30.0%，活力降低率達到90.0%，與未誘導蟲體相比沒有顯著性差異(P>0.05)，提示PZQ抗性蟲體對DW-3-15的敏感性沒有改變。

2.3 未誘導蟲體和PZQ抗性蟲體的形態與活力觀察

2.3.1 未誘導和誘導蟲體經PZQ和DW-3-15作用后即時形態學觀察 圖1所示，PZQ濃度為14 μmol/L時，加藥后未誘導蟲體迅速收縮、運動停止、透明度降低(圖1-A1)，而抗性蟲體反應不如未誘導蟲體劇烈，蟲體收縮程度較小，尚有部分蟲體仍有輕微運動，體態僵硬程度較低，透明度降低不明顯(圖1-A2)；PZQ濃度升高至112 μmol/L時，抗性蟲體才出現明顯收縮、運動停止、透明度降低明顯(圖1-A3)；DW-3-15濃度為45 μmol/L時，抗性蟲體和未誘導蟲體反應差別不明顯，均表現為運動停止、透明度降低，僅蜷縮程度稍有區別，未誘導蟲體蜷縮更明顯(圖1-B1、B2)。DMSO對照組蟲體活力狀況良好(圖1-C)。

2.3.2 未誘導和誘導蟲體經PZQ和DW-3-15作用72 h后的形態學觀察 圖2所示，PZQ作用濃度為14 μmol/L時，未誘導蟲體仍處于收縮狀態、運動未恢復、呈白色不透明、腫脹明顯(圖2-A1)，而抗性蟲體活力恢復較明顯，蟲體收縮程度較小，尚有部分蟲體頭部和尾部輕微運動，體態僵硬程度較輕，仍呈半透明狀態、腫脹輕微(圖2-A2)；當PZQ濃度升高至112 μmol/L時，抗性蟲體才出現明顯收縮、蟲體僵硬、運動未恢復(圖2-A3)；DW-3-15濃度為45 μmol/L時，抗性蟲體和未誘導蟲體形態無差別，均表現為運動未恢復、透明度降低、蟲體僵硬(圖2-B1、B2)。DMSO對照組蟲體活力狀況良好(圖2-C)。

表2 誘導蟲體經不同濃度PZQ和DW-3-15作用后的蟲體活力

注：上述數據為4次重復實驗結果。

Note: The above data is repeated by 4 times.

PZQ組：A1(未誘導蟲體，14 μmol/L)，A2(誘導蟲體，14 μmol/L)，A3(誘導蟲體，112 μmol/L) DW-3-15組：B1(未誘導蟲體，45 μmol/L)，B2(誘導蟲體，45 μmol/L) 對照組：C(未誘導蟲體，8 μL DMSO) PZQ Group: A1 (uninduced worms, 14 μmol/L)，A2 (induced worms, 14 μmol/L)，A3 (induced worms, 112 μmol/L) DW-3-15 Group: B1 (uninduced worms, 45 μmol/L)，B2 (induced worms, 45 μmol/L) Control Group: C (uninduced worms, 8 μL DMSO) 注：未加藥對照組與DMSO對照組蟲體形態一致。 The morphology of worms in the group with no drug is the same as the DMSO group.

圖1 未誘導和誘導蟲體經PZQ和DW-3-15作用后的即時形態

Fig.1 Instant morphology of worms post-exposure to PZQ and DW-3-15

3 討 論

PZQ抗血吸蟲的作用機制仍不清楚[13]，這在很大程度上限制了抗血吸蟲新藥的研發進展，而抗藥性病原體的出現往往比新藥物的研發速度快[14]。所以，在已有抗血吸蟲藥物基礎上設計與PZQ作用靶點不同的衍生物將可能是一條有效途徑。

PZQ組：A1(未誘導蟲體，14 μmol/L)，A2(誘導蟲體，14 μmol/L)，A3(誘導蟲體，112 μmol/L) DW-3-15組：B1(未誘導蟲體，45 μmol/L)，B2(誘導蟲體，45 μmol/L) 對照組：C(誘導蟲體，8μL DMSO) PZQ Group：A1(uninduced worms，14 μmol/L)，A2(induced worms，14 μmol/L)，A3(induced worms，112 μmol/L) DW-3-15 Group：B1(uninduced worms，45 μmol/L)，B2(induced worms，45 μmol/L) Control Group：C(induced worms，8 μL DMSO) 注：未加藥對照組與DMSO對照組蟲體形態一致。 The morphology of worms in the group with no drug is the same as the DMSO group.

圖2 未誘導和誘導蟲體經PZQ和DW-3-15作用72 h后形態

Fig.2 The morphology of worms 72 h post-exposure to PZQ and DW-3-15

1994年，Fallon等[15]首次證實在實驗室條件下通過連續藥物壓力可以建立抗PZQ曼氏血吸蟲蟲株，之后在非洲血吸蟲病流行區塞內加爾和埃及，相繼發現了對PZQ耐受的曼氏血吸蟲蟲株[16-17]。實驗室和現場不斷出現的血吸蟲耐藥或抗藥現象，引起科研工作者的廣泛關注。

Coles等[18]認為血吸蟲耐藥性(tolerance)是指血吸蟲對藥物先天性不敏感，在蟲體未暴露于藥物之前就已具有。如埃及血吸蟲對奧沙尼喹(oxamniquine)天然耐受。血吸蟲抗藥性(resistance)是指原來對藥物敏感的種群出現了對該藥物的反應性顯著下降，或者與一個完全敏感種群相比，此種群對該藥物的反應性明顯低下，即認為此種群具有了抗藥性。抗藥性是可遺傳的。這種改變的原因是種群中對藥物反應性低下蟲體數量的增加。抗藥程度可以是部分的、也可以是完全的，當宿主可耐受的最大劑量藥物對血吸蟲無效時，即是完全抗藥。

另有研究者對實驗室抗藥性血吸蟲誘導方法進行改進，為血吸蟲抗藥性相關研究提供手段。如Flávia FB Couto等[19]為闡明血吸蟲抗藥機制，創建了一種新的、有效、快速、簡單而價廉的抗藥性誘導方法。他們采用100 mg/kg PZQ處理感染曼氏血吸蟲的光滑雙臍螺，連續5 d，共作用3次，每次間隔1周。然后應用這些光滑雙臍螺逸出的尾蚴感染小鼠，之后進行的一系列體內外實驗均證實了經誘導后的成蟲對PZQ的敏感性明顯降低。其中體內實驗顯示，用PZQ治療小鼠后，體內蟲負荷較未誘導對照組明顯升高，PZQ ED50值也明顯升高。

本課題組在日本血吸蟲PZQ抗性蟲體誘導方法上也進行了一系列探索和實驗，已建立本實驗室較穩定的誘導方法[20]。

首先應用PHARM verson4.2軟件測得本批次片劑PZQ抗小鼠體內日本血吸蟲的ED50值為25.98 mg/kg[12]。然后采用此劑量對感染單性日本血吸蟲的小鼠于21 d后進行灌胃給藥誘導抗性蟲體。

青蒿琥酯是青蒿素衍生物，最初用作抗瘧藥，研究發現其對日本血吸蟲童蟲(7～35 d)具有明顯殺傷作用[21]。PZQ對所有種類血吸蟲均有效，但只對血吸蟲成蟲作用明顯，抗童蟲效應很弱[22]。基于PZQ和青蒿琥酯各自具有的抗血吸蟲優勢，本課題組采用PZQ與青蒿琥酯的功能基團O-O橋拼接合成獲得PZQ衍生物DW-3-15[23]。

前期研究表明DW-3-15在體外和體內對日本血吸蟲成蟲和童蟲均具有顯著的抗蟲效應。作用于小鼠體內不同發育階段(1、3、7、14、21、35 d)的蟲體，可使減蟲率達到60～85%，抗童蟲效應與青蒿琥酯相當，并優于PZQ，抗成蟲作用與PZQ相仿，特別對整個童蟲期及幼蟲與成蟲混合感染小鼠模型中均顯示良好的抗蟲效果[24]。

本研究進一步觀察DW-3-15對日本血吸蟲PZQ抗性蟲體的生物學效應，評價PZQ抗性蟲體對DW-3-15是否存在交叉抗性，從而對DW-3-15作為抗血吸蟲新藥的潛在價值做出有意義的評價。

研究結果顯示誘導蟲體對PZQ敏感性明顯下降，PZQ作用于誘導蟲體的臨界致死濃度是未誘導蟲體的8倍(112 μmol/L)；而誘導蟲體對DW-3-15的敏感性沒有明顯改變，臨界致死濃度與未誘導蟲體相同，均為45 μmol/L。提示PZQ抗性蟲體對DW-3-15沒有交叉抗性，DW-3-15的作用靶點可能與PZQ不同。

DW-3-15對日本血吸蟲成蟲及童蟲均具有良好的抗蟲效應，在血吸蟲病的預防和早期治療中具有重要意義。本研究結果證明PZQ抗性蟲體對DW-3-15沒有交叉抗性，作用靶點可能與PZQ不同，顯示PZQ衍生物DW-3-15具有作為抗日本血吸蟲候選新藥的潛在價值，值得進一步深入研究。

[1]Kasinathan RS, Sharma LK, Cunningham C, et al. Inhibition or knockdown of ABC transporters enhances susceptibility of adult and juvenile schistosomes to praziquantel[J]. PLoS Neglect Trop D, 2014, 8(10): e3265.

[2]Hotez PJ, Fenwick A. Schistosomiasis in Africa: an emerging tragedy in our new global health decade[J]. PLoS Neglect Trop D, 2009, 3(9): e485.

[3]King CH, Dangerfield-Cha M. The unacknowledged impact of chronic schistosomiasis[J]. Chronic Illness, 2008, 4(1): 65-79.

[4]van der Werf MJ, de Vlas SJ, Brooker S, et al. Quantification of clinical morbidity associated with schistosome infection in sub-Saharan Africa[J]. Acta Trop, 2003, 86(2): 125-139.

[5]Xiao SH. Progress in development of new antischistosomal drugs in recent years[J]. Chin J Parasitol Parasit Dis, 2010, 28(3): 218-225. (in Chinese) 肖樹華. 近年來發展抗血吸蟲新藥的進展[J].中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志, 2010, 28(3)：218-225.

[6]Toure S, Zhang Y, Bosque-Oliva E, et al. Two-year impact of single praziquantel treatment on infection in the national control programme on schistosomiasis in Burkina Faso[J]. B World Health Organ, 2008, 86(10): 780-787A.

[7]Vennervald BJ, Booth M, Butterworth AE, et al. Regression of hepatosplenomegaly in Kenyan school-aged children after praziquantel treatment and three years of greatly reduced exposure to Schistosoma mansoni[J]. T Roy Soc Trop Med H, 2005, 99(2): 150-160.

[8]Hagan P, Appleton CC, Coles GC, et al. Schistosomiasis control: keep taking the tablets[J]. Trends Parasitol, 2004, 20(2): 92-97.

[9]Fenwick A, Savioli L, Engels D, et al. Drugs for the control of parasitic diseases: current status and development in schistosomiasis[J]. Trends Parasitol, 2003, 19(11): 509-515.

[10]Caffrey CR. Chemotherapy of schistosomiasis: present and future[J]. Curr Opin Chem Biol, 2007, 11(4): 433-439.

[11]Abdul-Ghani RA, Loutfy N, Hassan A. Experimentally promising antischistosomal drugs: a review of some drug candidates not reaching the clinical use[J]. Parasitol Res, 2009, 105(4): 899-906.

[12]Dong LL, Xu J, Zhao B, et al. Drug resistance induction and analysis of differential expression protein on adult Schistosoma japonicum induced by ED50PZQ[J]. Chin J Zoonoses, 2014, 30(12): 1171-1180. (in Chinese) 董蘭蘭, 許靜, 趙波, 等. 吡喹酮壓力下日本血吸蟲耐藥性的誘導和蟲體差異表達蛋白的分析[J].中國人獸共患病學報, 2014, 30(12): 49-58.

[13]Pica-Mattoccia L, Valle C, Basso A, et al. Cytochalasin D abolishes the schistosomicidal activity of praziquantel[J]. Exp parasitol, 2007, 115(4): 344-351.

[14]Vanaerschot M, Huijben S, Van den Broeck F, et al. Drug resistance in vectorborne parasites: multiple actors and scenarios for an evolutionary arms race[J]. FEMS Microbiol Rev, 2014, 38(1): 41-55.

[15]Fallon PG, Doenhoff MJ. Drug-resistant schistosomiasis: resistance to praziquantel and oxamniquine induced inSchistosomamansoniin mice is drug specific[J]. Am J Trop Med Hyg, 1994, 51: 83-88.

[16]Stelma FF, Talla I, Sow S, et al. Efficacy and side effects of praziquantel in an epidemic focus ofSchistosomamansoni[J]. Am J Trop Med Hyg, 1995, 53(2): 167-170.

[17]Ismail M, Metwally A, Farghaly A, et al. Characterization of isolates ofSchistosomamansonifrom Egyptian villagers that tolerate high doses of praziquantel[J]. Am J Trop Med Hyg, 1996, 55(2): 214-218.

[18]Coles GC, Kinoti GK. Defining resistance inSchistosoma[J]. Parasitol Today, 1997, 13(4): 157-158.

[19]Couto FFB, Coelho PMZ, Araujo N, et al.Schistosomamansoni: a method for inducing resistance to praziquantel using infectedBiomphalariaglabratasnails[J]. Mem Inst Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2011, 106(2): 153-157.

[20]Yang QL, Cai R, Li X, et al. Selected schistosomes of decreased praziquantel sensitivity and ultranstructural alterations of worms under drug pressure[J]. Chin J Schisto Ctrl, 2010, 22(3): 206-212. (in Chinese) 楊巧林, 蔡茹, 李欣, 等. 日本血吸蟲吡喹酮耐藥蟲體篩選及其超微結構觀察[J]. 中國血吸蟲病防治雜志, 2010, 22(3)：206-212.

[21]Ru WW, Liang YS, Dai JR, et al. Studies on effect of artesunate againstSchistosomajaponicumⅠSusceptibility of different developed stages of worms in mice to artesunate[J]. Chin J Schisto Ctrl, 1996, 18(3): 161-164. (in Chinese) 茹煒煒, 梁幼生, 戴建榮, 等. 青蒿琥酯對日本血吸蟲作用的研究.Ⅰ小鼠體內不同發育階段蟲體對青蒿琥酯的敏感性[J]. 中國血吸蟲病防治雜志, 1996, 18(3): 161-164.

[22]Colley DG, Bustinduy AL, Secor WE, et al. Human schistosomiasis[J]. Lancet, 2014, 383(9936): 2253-2264.

[23]Duan WW, Qiu SJ, Zhao Y, et al. Praziquantel derivatives exhibit activity against both juvenile and adultSchistosomajaponicum[J]. Bioorg Med Chem Lett, 2012, 22(4): 1587-1590.

[24]Dong LL, Duan WW, Chen JL, et al. An artemisinin derivative of praziquantel as an orally active antischistosomal agent[J]. PLoS One, 2014, 9(11): e112163.

Xia Chao-ming, Email: xia-chaoming@163.com

Biological effects of DW-3-15 against praziquantel-resistantSchistosomajaponicum

ZHAO Bo,GUAN Zhi-xun,DUAN Zhong-liang,XU Jing,CAO Yun,LIN Cai,WANG Yan-yan,XIA Chao-ming

(DepartmentofParasitology,MedicalCollegeofSoochowUniversity,Suzhou215123,China)

Resistance to praziquantel (PZQ) forS.japonicumwas induced to evaluate whether there is cross resistance to the PZQ derivative DW-3-15 for PZQ-resistant adult worms ofS.japonicum. The mice infected withS.japonicumwere given subcurative (effective dose required to kill 50% of the worms, ED50) PZQ orally on the 21st day after infection, for 30 consecutive days. Then with 21 days interval mice were treated again with curative (200 mg/kg) PZQ for 5 successive days. Two weeks post-treatment,invitro, we observed that the critical lethal concentration (the lowest dose required to make 72 h vitality reduction reach to 90%) of PZQ against adult worms induced was eight times as high as uninducible worms, while the critical lethal concentration of DW-3-15 against PZQ-resistant adult worms was the same as that of the uninducible. The data revealed that PZQ-resistant adult worms showed no cross resistance to DW-3-15. These results indicate that the targets of PZQ and DW-3-15 againstS.japonicummay be different. DW-3-15 will perhaps be a potentially novel drug for treatment of schistosomiasis.

Schistosomajaponicum; praziquantel; DW-3-15; cross resistance

10.3969/j.issn.1002-2694.2015.09.002

國家863項目(No.2012AA0203006)資助

夏超明，Email:xia-chaoming@163.com

蘇州大學醫學部病原生物學系，蘇州 215123

Supported by the National 863 Project (No. 2012 aa0203006)

R383.2

A

1002-2694(2015)09-0789-06

2015-04-01；

2015-07-14