新布尼亞病毒感染致發熱伴血小板減少綜合征的危險因素分析

尤愛國，楊建華，唐曉燕，許汴利，康 鍇，杜燕華，黃學勇

新布尼亞病毒感染致發熱伴血小板減少綜合征的危險因素分析

尤愛國1，楊建華2，唐曉燕1，許汴利1，康 鍇1，杜燕華1，黃學勇1

目的 探討新布尼亞病毒感染致發熱伴血小板減少綜合征發病的危險因素。方法 采用1∶2配對的病例-對照研究，對40例病例和80例對照進行問卷調查，同時采集患者血清標本，應用熒光RT-PCR和IgM、IgG抗體試劑盒檢測新布尼亞病毒核酸及抗體。采用條件Logistic回歸分析發病的危險因素。結果 病例組農民占90.00%(36/40)，顯著高于對照組62.50%(50/80)(P<0.01)。病例組暴露于養狗、養貓、養牛、家禽養殖、生活區周圍有蜱、病前1月被蜱叮咬、從事田間作業、工作區及住宅周圍有雜草灌木的風險顯著高于對照組(OR值均大于1，P值均小于0.05)。多因素分析表明，在調整了性別、年齡、民族和職業因素后，生活區周圍有蜱(OR=5.44,P<0.01)是新布尼亞病毒感染致發熱伴血小板減少綜合征發病的危險因素。結論 不同形式的蜱暴露為新布尼亞病毒感染致發熱伴血小板減少綜合征的危險因素。

發熱伴血小板減少綜合征；新布尼亞病毒；危險因素；病例-對照研究

CenterforDiseaseControlandPrevention,Zhengzhou450016,China;2.DepartmentofImmunization,ChengdongluCommunityHealthServiceCenter,Zhengzhou450004,China)

2007年以來，河南省采取主動搜索和通過專項監測系統在信陽、南陽地區發現一些以發熱伴血小板、白細胞減少為特征的不明原因病例，繼之湖北、山東、江蘇等毗鄰省份亦發現有類似病例，后命名為發熱伴血小板減少綜合征(也稱發熱伴血小板、白細胞減少綜合征)。經實驗室檢測確認，少數病例發現有無形體感染的證據，多數病例標本發現一種新的病毒—新布尼亞病毒[1-2]。該病病死率高，嚴重威脅人民的健康和生命，受到群眾與媒體的廣泛關注。目前，已初步描述了該病的臨床與流行病學分布特征[1,3]。為了解新布尼亞病毒感染致發熱伴血小板減少綜合征的傳播途徑及發病危險因素，特于2011年4-10月在信陽市開展了調查，現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 調查對象 病例和對照均來自信陽市有代表性的3家縣級以上綜合醫院。該研究已獲得河南省疾病預防控制中心倫理委員會批準和研究對象的知情同意。病例診斷標準參照《發熱伴血小板減少綜合征防治指南》[4]。對照選擇標準為與病例同性別、年齡相差不超過5歲，且與病例在同一病區，血清學IgG檢測陰性的對象。按照1∶2比例選擇對照。

1.2 方法與內容 采用《發熱伴血小板減少綜合征危險因素調查表》，由經過培訓的調查員通過面對面詢問方式收集相關信息，同時采集患者血液標本進行實驗室檢測。調查內容包括研究對象的一般情況(年齡、性別、民族、住址、職業、聯系方式等)、家庭居住環境(家庭居住位置、環境、家禽及家畜飼養情況等)、暴露史(發病前1月內勞動、旅行史、蜱叮咬史、與類似病例接觸情況等)、宿主媒介調查(病例居住地和生產活動周圍環境的動物種類、媒介等)。

1.3 實驗室檢測

1.3.1 熒光RT-PCR進行核酸檢測 無菌操作采取病人急性期靜脈血于無抗凝劑采血管內，室溫或4 ℃靜置使血凝固，離心后，取140 μL血清，應用RNA提取試劑盒(QIAamp Viral RNA Mini Kit，QIAGEN 52904)提取RNA。使用本實驗室設計的新型布尼亞病毒特異性引物和探針，以及一步法熒光PCR試劑盒(QIAGEN QuantiTectTM Probe RT-PCR Kit catalog #204443)進行擴增，反應條件50 ℃ 30 min 1 cycle；95 ℃15 min 1 cycle；95 ℃ 15 s，60 ℃ 45 s* 40 cycles(*為熒光信號采集步驟)。檢測結果Ct值<35為陽性，>40為陰性，在35～40之間為可疑樣品，需重復檢測。

1.3.2 IgM、IgG抗體檢測 應用北京萬泰生物藥業股份有限公司(京藥監械生產許20040097號)生產的HB29-IgM抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)，HB29-IgG抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)和新布尼亞病毒抗原片(本實驗室制備)檢測病例和對照血液中相應的抗體。樣品A值≥臨界值者為抗體反應陽性，<臨界值者為抗體反應陰性。

1.4 質量控制 對調查員進行培訓，培訓合格方可進行問卷調查。調查結束后，及時對問卷進行審核，填寫漏缺項。調查資料經雙錄入，并進行一致性檢驗。

2 結 果

2.1 研究對象的基本特征 本次共調查40例病例和80例對照。病例組與對照組在民族構成方面差異無統計學意義，兩者在職業構成方面差異有統計學意義(P<0.05)。研究對象的基本特征詳見表1。

表1 研究對象的基本特征

2.2 單因素分析 病例組在養狗、養貓、養牛、家禽養殖、生活區周圍有蜱、病前1月被蜱叮咬、從事田間作業、工作區及住宅周圍有雜草灌木方面的比例顯著高于對照組，差異有統計學意義。不同組別危險因素暴露情況見表2。

表2 不同組別危險因素暴露情況比較

表2(續)

注：# 為連續性校正卡方

Note: # means continuity corrected chi-square.

2.3 多因素分析 在單因素分析的基礎上進行多因素分析，挑選單因素分析有意義的變量為篩選變量，進行多因素分析。入選與排除標準分別為：sle=0.05，sls=0.05。新布尼亞病毒感染致發熱伴血小板減少綜合征的危險因素與賦值情況如下：是否患發熱伴血小板減少綜合征(1=是，0=否)、性別(1=男，0=女)、年齡(數值變量)、民族(1=漢、0=其他)、職業(1=農民、0=其他)、養狗(1=是，0=否)、養貓(1=是，0=否)、養牛(1=是，0=否)、飼養家禽(1=是，0=否)、生活區周圍有無見過蜱(1=有，0=無)、病前1月被蜱叮咬(1=是，0=否)、從事田間作業(1=是，0=否)、工作區周圍有無雜草灌木(1=有，0=無)和住宅周圍雜草灌木生長(1=有，0=無)。

在調整了性別、年齡、民族和職業因素后，生活區周圍有蜱(OR=5.44,95%CI：1.71～17.37)為新布尼亞病毒感染致發熱伴血小板減少綜合征的危險因素。多因素分析結果詳見表3。

表3 發熱伴血小板減少綜合征發病危險因素的多因素Logistic回歸分析

3 討 論

發熱伴血小板減少綜合征是一類新發傳染病，其病原有新布尼亞病毒[1]，也不排除其他病原體感染的可能[5]。患者的臨床表現相似，急性起病，發熱、全身不適、乏力、頭痛、肌肉酸痛，以及惡心、嘔吐、厭食、腹瀉等；重癥病例可出現皮膚瘀斑、出血、多臟器損傷、彌漫性血管內凝血等[1, 6]。該病需經實驗室檢測方可確診病原，因此在臨床上極易被誤診為流行性出血熱等疾病[7]。國內一些省份起初是按無形體病感染或疑似無形體感染進行報告的[8-9]。該病多發于夏、秋季，人群普遍易感，在丘陵、山地、森林等地區生活、生產的居民和勞動者以及赴該類地區戶外活動的旅游者感染風險較高。

該研究結果顯示，病例組在養狗、養貓、養牛及家禽養殖方面的比例顯著高于對照組，差異有統計學意義，提示家養動物(如豬、牛、狗及家禽等)可能是該病的貯存宿主。家養動物的喂養方式對病例發病具有一定的影響，放養較圈養具有更高的發病風險[10]。病例組和對照組在家中是否有老鼠、是否捕鼠、是否接觸死鼠及野生動物方面構成差異無統計學意義，提示家鼠和野生動物可能不是該病的貯存宿主。

有研究表明，新布尼亞病毒感染所致發熱伴血小板減少綜合征的急性期病人及尸體血液和血性分泌物具有傳染性，直接接觸病人血液或血性分泌物可導致感染[11-13]。該研究單因素分析顯示，病例組和對照組在親戚或鄰居發病、是否接觸發病親戚或鄰居及近1個月外出方面差異無統計學意義，可能是由于樣本量太小，未能發現二者之間的差異，尚需進一步研究。

該病傳播途徑尚不完全明確，發病也可能與蜱叮咬有關。該研究單因素和多因素分析結果均表明，生活區周圍有蜱是新布尼亞病毒感染致發熱伴血小板減少綜合征的危險因素，與Fan Ding等人研究結果一致[14]，提示蜱很可能為該病的傳播媒介，蜱叮咬有可能是該病的另外一種傳播途徑。

為有效防控新布尼亞病毒感染致發熱伴血小板減少綜合征，減少該病的發生，應做好疾病監測工作，防止聚集性病例及暴發疫情發生；在高發區高危人群中開展發熱伴血小板減少綜合征防病知識宣傳，使當地群眾掌握該病防治及預防蜱叮咬的知識；大力開展愛國衛生運動，進行環境整治，并采取措施滅蜱，以降低生產、生活環境中的蜱密度。

(本調查得到信陽市疾病預防控制中心、信陽市154醫院、商城縣疾病預防控制中心、商城縣人民醫院、平橋區疾病預防控制中心、光山縣疾病控制中心和光山縣人民醫院的大力支持與參與，特此感謝)。

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You Ai-guo, Email: youaiguo11@126.com

Risk factors of severe fever with thrombocytopenia syndrome (SFTS) infected by SFTSV

YOU Ai-guo1,YANG Jian-hua2,TANG Xiao-yan1,XU Bian-li1,KANG Kai1,DU Yan-hua1,HUANG Xue-yong1

(1.InstituteforInfectiousDiseaseControlandPrevention,HenanProvincial

To explore the risk factors of severe fever with thrombocytopenia syndrome (SFTS) infected by severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus (SFTSV), 1∶2 matched case-control study was used in this study. Questionnaires and serum were collected from 40 cases and 80 controls. SFTSV was tested using fluorescent RT-PCR and antibody reagent kits. The risk factors of SFTS were selected by conditional logistic regression. The proportion of farmers in case group was 90.00% (36/40) and significantly higher than that in control group (50/80),Pvalue was less than 0.05. The risk of exposure to dog, cat, cattle, poultry, living areas surround by ticks, tick bites, engaging in the field work, work and living areas surrounded by weeds and shrubs in case group was higher than that in control group, all odd ratios were more than 1.00 andPvalues were less than 0.05. Multi-factors analysis showed that, after adjusted for gender, age, nations and occupations, presence of ticks in living area (OR=5.44,P<0.01) was the risk factor of SFTS. The exposure to ticks may be the risk factor of SFTS.

severe fever with thrombocytopenia syndrome (SFTS); severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus (SFTSV); risk factors; case-control study

10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2015.08.004

尤愛國，Email: youaiguo11@126.com

河南省疾病預防控制中心，鄭州 450016

Funded by the Medical Science Research Projects in Henan Province (No. 201203158)

R373

A

1002-2694(2015)08-0704-05

2014-11-06；

2015-03-23

河南省醫學科技攻關項目(No. 201203158)資助