天然山泉水對老齡小鼠SOD和MDA含量的影響

康愛君,李雨薇,王學文,胡建國,劉君芳,鄭振輝

（北京大學醫學部實驗動物科學部，北京 100191）

天然山泉水對老齡小鼠SOD和MDA含量的影響

康愛君,李雨薇,王學文,胡建國,劉君芳,鄭振輝

（北京大學醫學部實驗動物科學部，北京 100191）

目的 探討天然山泉水對老齡小鼠脂質過氧化水平的影響。方法 8月齡SPF級雄性ICR小鼠適應性飼養5 d后，禁食16 h，取血，測血清丙二醛（MDA）含量。根據MDA含量，將ICR小鼠隨機分為兩組：天然山泉水組和自來水對照組。天然山泉水組自由飲用天然山泉水，自來水對照組自由飲用自來水，連續飲用兩個月，飲用1個月和兩個月時禁食16 h，取血，測血清丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活力。結果 給予天然山泉水兩個月后，與自來水對照組相比，天然山泉水組丙二醛（MDA）含量顯著降低（P＜0.05），超氧化物歧化酶（SOD）活力無顯著性差異。結論 飲用天然山泉水對緩解老齡小鼠脂質過氧化水平有一定的作用。

天然山泉水；老齡小鼠；超氧化物歧化酶；丙二醛

機體抗氧化酶的活性會隨著年齡的增長而不斷下降，導致體內氧自由基不能及時被清除，生成過氧化脂質等過氧化物，從而引起細胞的衰老和死亡，加速機體的衰老［1]。作為體內重要的氧自由基清除劑，SOD是體內清除自由基的重要抗氧化酶［2-3]，可以保護細胞免受損傷。檢測 SOD含量的高低可以間接反映機體清除自由基的能力。MDA是過氧化脂質的降解產物，其含量與細胞損傷的程度呈正相關，檢測MDA含量的變化可間接反應氧自由基含量的變化［2-3]。

本文選用老齡小鼠作為實驗對象，通過觀察其飲用天然山泉水后，血清中MDA和SOD含量的變化，探討該天然山泉水是否具有降低脂質過氧化作用，是否具有升高抗氧化酶活力作用，以及是否具有抗氧化作用，進而探討其保健作用。

1 材料和方法

1.1 受試物

天然山泉水，由某生物科技有限公司提供，2014年12月6日生產，350mL塑料瓶裝。

1.2 實驗動物及分組

實驗動物為ICR小鼠，SPF級，共30只，雄性，8月齡，44～47 g，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供【SCXK（京）2012-0001】。小鼠適應性飼養5 d后，禁食 16 h，取血，測定血清中丙二醛（MDA）含量。根據MDA含量，將ICR小鼠隨機分為兩組：天然山泉水組自由飲用天然山泉水；自來水對照組自由飲用自來水，連續飲用兩個月。ICR小鼠飼養于屏障環境【SYXK（京）2011-0039】，溫度為24℃ ±2℃，相對濕度為55％ ±15％。并按實驗動物使用的3R原則給予人道的關懷。

1.3 血清總超氧化物歧化酶（SOD﹞和丙二醛（MDA﹞的測定

飲用天然山泉水一個月和兩個月，小鼠禁食16 h，取血，應用南京建成生物工程研究所生產的試劑盒分別測血清丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活力。試劑盒生產批號為20141219。

1.4 統計方法

2 結果

2.1 小鼠體重

天然山泉水組小鼠體重與自來水對照組相比無顯著性差異（表1）。

2.2 小鼠每日飲水量

天然山泉水組小鼠飲水量與自來水對照組相比無顯著性差異（表2）。

2.3 小鼠血清中MDA和SOD結果

給予天然山泉水前，與自來水對照組相比，天然山泉水組MDA含量無顯著差異；實驗進行一個月時，與自來水對照組相比，天然山泉水組MDA含量、SOD活力均無顯著性差異；實驗進行兩個月時，與自來水對照組相比，天然山泉水組MDA含量顯著降低（P＜0.05），SOD活力無顯著性差異（表3和表4）。

表1 各組小鼠體重的比較（g）Tab.1 The comparison of body weight of different groups ofmice

表2 各組小鼠飲水量的比較（mL）Tab.2 he comparison of water-drinking capacities of different groups ofmice.

表3 各組小鼠丙二醛（MDA）含量比較（nmol/mL）Tab.3 The comparison of Malondialdehyde（MDA）content of different groups ofmice

表4 各組小鼠超氧化物歧化酶（SOD）活性比較（U/mL）Tab.4 The comparison of superoxide dismutase（SOD）activities of different groups ofmice

圖1 各組小鼠MDA含量（nmol/mL）

3 討論

水為生命之源，健康之本。隨著社會的進步，健康水日益受到人們的關注，世界衛生組織（WHO）也提出了“健康水”的概念。指出健康水的指標［4-6]除了符合清澈、無雜質、無色無味、無毒等基本要求外，還強調了以下幾方面：（1）水的硬度要適中（2）人體所需的礦物質含量要適中，（3）要呈弱堿性，pH值為7.0～8.0（4）水中溶解氧要適中，不低于7 mg/L；（5）水的媒體營養生理功能（溶解力、滲透力、代謝力、乳化力等）要強（6）水分子團17O-核磁共振譜（NMR）半幅寬度應在90Hz下。

我們探討的天然山泉水源自涌泉，采用仿生大自然水循環原理，利用聲、光、磁、波技術、完成過濾、加熱、冷卻以及人體必需的礦物元素的篩取提留等多重技術處理，重組水分子結構排序，去除了水中正電荷，提取大量氫氧根負電離子，使水分子團17O-NMR半幅度達到50～60 Hz左右的細微化，同時水呈弱堿性，pH值為7.2～7.8，水中溶解氧達到9mg/L。

本研究中，我們以老齡小鼠作為研究對象，初步探討了天然山泉水對其脂質過氧化水平的影響。脂質過氧化反應是自由基攻擊細胞膜上的多不飽和脂肪酸而引發的一系列鏈式反應，其終產物是MDA。研究結果顯示，飲用天然山泉水30 d后，老齡小鼠血液中MDA含量未見顯著降低，飲用天然山泉水60 d后，可以使老齡小鼠血液中MDA含量顯著降低，提示隨著飲水時間的延長，天然山泉水具有降低組織細胞脂質過氧化的作用。本實驗中血清中T-SOD水平未有顯著提高，是否通過其他抗氧化途徑參與自由基的清除過程有待進一步探討。

從上世紀九十年代開始，科研人員用17O-核磁共振譜（NMR）半幅寬度對水的分子團的大小進行定性的測定，特別是日本、臺灣和美國等國家對各種水進行半幅寬的測定發現，國際上認定的長壽村水、天然的優質水的半幅寬都小于100 Hz，而蒸餾水、雨水和自來水的半幅寬一般都在100 Hz以上［6-7]。越來越多的研究表明［7]，利用17O-核磁共振譜（NMR）半幅寬可以定性地反映液態水團簇的大小。一般說，譜線越寬，團簇越大；譜線越窄，團簇越小。團簇小的水對物質，包括中藥和營養物質的溶解性高。本實驗中飲用天然山泉水可降低老齡小鼠的MDA水平，可能與該天然山泉水17O-核磁共振譜（NMR）半幅寬度有關。該天然山泉水水分子團17O-NMR半幅度僅為50～60 Hz，更利于細胞吸收。

本文首次應用老齡小鼠探討其飲用天然山泉水對過氧化水平的影響，為健康水的保健作用提供客觀資料。

［1] 敖拉哈.衰老的自由基學說與抗氧化食物［J].家庭醫學，2008，3（12）：48.

［2] 黃進，楊國宇，李宏基，等.動物體內氧自由基的產生及危害［J].中國牛業科學，2004，30（5）：44.

［3] 楊東升.超氧化物歧化酶的研究與應用［J].化學與生物工程，2004，3（7）：91.

［4] 尹軍，張小雨，劉志生，等.健康水的研究進展［J]，供水技術，2008，2（2）1-5.

［5] 李福志，張曉健，王占生，等.健康飲水的水質指標體系探討［J].環境與健康雜志，2002，19（5）：407-408.

［6] 張欣.歐美及日本對飲用水評價的研究﹝J﹞.西北建筑工程學院學報，1999，（3）：54-57

［7] 李福志，張曉健，呂木堅，等.用17O核磁共振研究液態水的團簇結構［J].環境科學學報，2004，24（1）：6-9.

Effect of naturalmountain spring on SOD and MDA content in m ice aging

KANG Ai-jun，LIYU-wei，WANG Xue-wen，HU Jian-guo，LIU Jun-fang，ZHENG Zhen-hui
（Department of Laboratory Animal Science，Health Science Center，P.K.U.Beijing 100191，China）

Objective To observe the effect of Natural mountain spring on oxidative damage of aging mice.M ethods Thirtymale agingmice were randomly divided into experimental group（drink Naturalmountain spring）and control group（drink tap water）according to the level of MDA.The serum in the two groupswas taken for T-SOD activity and MDA content analysis after twomonths.Results The MDA content in experimental group decreased markedly than that in control group.Conclusion Naturalmountain spring could alleviate oxidative damage by free radicals to extent.

Naturalmountain spring；Agingmice；Superoxide dismutase；Malondialdehyde

R-332

A

1671-7856（2015﹞10-0034-04

10.3969.j.issn.1671.7856.2015.010.008

康愛君（1971-），女，副主任技師，研究方向：實驗動物和動物實驗，E-mail：kangaijun1028@163.com。

﹞2015-08-26

研究報告