張曉玉,張修彥,陳偉盛,梁 寧,詹純列
(廣州軍區廣州總醫院動物實驗中心,廣州 510010)
雌雄FMMU白化豚鼠基礎生理生化指標的差異分析
張曉玉,張修彥,陳偉盛,梁 寧,詹純列
(廣州軍區廣州總醫院動物實驗中心,廣州 510010)
目的測定與比較雌、雄普通級FMMU白化豚鼠血液指標、心率、頸總動脈壓及心室壓、臟器參數。方法取250~350g普通級FMMU白化豚鼠30只,雌雄各半,飼養一周后,心臟采血測定血液生理生化及血氣指標;頸總動脈插管測定動脈壓,呼吸支持情況下開胸進行心室壓測定;解剖并精確稱量各臟器重量。結果雄性與雌性豚鼠比較:血液指標中,血小板計數、谷丙轉氨酶、總膽紅素、乳酸的差異有顯著性意義(P<0.05或P<0.01);頸總動脈舒張壓、平均壓以及左心室收縮壓、平均壓的差異有顯著性意義(P<0.05或P<0.01);各主要的臟器重量及臟器系數均無顯著性差異。結論普通級雌雄FMMU白化豚鼠血液生理生化、血氣及心血管功能指標存在差異。
普通級FMMU豚鼠;血液指標;頸總動脈壓;心室壓;臟器參數
FMMU白化豚鼠具有獨特的免疫學特性,體液免疫及非特異性免疫功能較低[1],心電圖波形與人很相似,更適合用于制作感染性疾病的動物模型和心肌缺血等實驗[2-3],脂質代謝特點更符合臨床高脂血癥研究[4]。目前,國內外有關FMMU白化豚鼠臟器參數、血液生理生化、血壓及心室壓測定及性別間差異的研究不多,以往的資料較為陳舊,不同文獻中數據差異較大,給研究者造成困擾。本文較全面地測定和比較了雌雄FMMU白化豚鼠的基礎生理生化指標,為其在免疫學、心臟疾病及心血管功能研究等方面的應用提供基礎數據。
1.1 實驗動物
普通級豚鼠250~350g,雌雄各15只,購于廣州花東信華實驗動物養殖場【SCXK(粵)2014-0023】,飼養于廣州軍區廣州總醫院動物實驗中心普通環境【SYXK(粵)2014-0100】,適應性飼養1周后用于實驗,實驗前禁食12h,禁水1h。
1.2 主要儀器及試劑
德國賽多利斯BSA124S型電子天平(0.1mg~120g)、日本光電MEK-7222型全自動血細胞分析儀、美國IL GEM premier 3000型全自動血氣分析儀、日本日立7020型全自動生化分析儀、上海奧爾科特ALC-V8型小動物呼吸機、北京微信斯達Pclab-430C型生物醫學信號采集處理系統及PY-2型血壓傳感器、BD-24G靜脈留置針、體積分數2%戊巴比妥鈉注射液、500U/mL肝素鈉生理鹽水注射液。
1.3 實驗方法
1.3.1 血液樣品檢測
取普通級豚鼠雌雄各15只,固定后心臟采血約4mL,分別注入EDTA-2K+抗凝管、肝素抗凝管、普通采血管,用于檢測血常規指標、血氣指標及血生化指標。
1.3.2 心率及頸總動脈血壓測定
采血后,為避免心臟采血操作對血壓、心室壓測定的影響,上述雌雄各15只普通級豚鼠,需觀察飼養一周待狀態恢復良好后,稱量體重,腹腔注射戊巴比妥鈉(2mL/kg),待麻醉后固定,分離頸總動脈后,結扎遠心端,動脈夾固定近心端。靜脈留置針與生理信號采集系統相連接,進行動脈穿刺,成功后抽回針頭將軟管送入,注入肝素(1000U/kg),觀察顯示器中血壓波形穩定后,記錄數值。
1.3.3 左右心室壓測定
結扎頸總動脈后,鈍性剝離氣管,使用小動物呼吸機進行插管輔助呼吸。開胸進入胸腔,打開心包膜,將留置針針尖插入心尖處立即收回,并將套管部分繼續插入左心室內,觀察泵出血液顏色鮮紅,節奏有力,顯示數值穩定后記錄左心室壓。后繼續將留置針穿過心室隔到達右心室,泵出血液顏色深紅,觀察并記錄右心室壓。
1.3.4 臟器重量的測定
上述測定完成后,對豚鼠實施安樂死,并立即剖取腦、腦垂體、甲狀腺、胸腺、心、肺、肝、胃、脾、腎、腎上腺、睪丸/子宮、附睪/卵巢,濾紙吸干組織表面水分后,稱重記數,計算臟器系數=[(臟器重量/體質量)×100%]。
1.4 統計方法
數據處理采用SPSS19.0統計軟件進行,性別間比較采用t檢驗,數據以平均數±標準差(X±s)表示,P<0.05為差異有統計學意義。
2.1 血常規
實驗結果表明:普通級雌、雄豚鼠僅PLT 1項指標差異顯著(表1)。

表1 雄性與雌性普通級FMMU白化豚鼠血常規測定及比較Tab.1 Comparison of blood cell analysis between male and female FMMU albino guinea-pig
2.2 血液生化
實驗結果表明,普通級雌、雄豚鼠ALT、TBIL 2項指標差異顯著(表2)。
2.3 血氣分析
實驗結果表明,普通級雌、雄豚鼠Lac指標差異顯著(表3)。
2.4 心率、頸總動脈壓、心室壓
實驗結果表明,普通級雌、雄豚鼠的頸總動脈舒張壓、頸總動脈平均壓以及LVMP 3項指標差異顯著,LVSP差異極顯著(表4)。
2.5 主要臟器參數
實驗結果表明,普通級FMMU白化豚鼠雌、雄之間臟器重量和臟器系數無顯著性差異(表5)。

表2 雄性與雌性普通級FMMU白化豚鼠血液生化Tab.2 Comparison of blood biochemistry between male and female FMMU albino guinea-pig

表3 雄性與雌性普通級FMMU白化豚鼠血氣分析Tab.3 Comparison of blood gas analysis between male and female FMMU albino guinea-pig

表4 雄性與雌性普通級FMMU白化豚鼠心率、頸總動脈壓、心室壓Tab.4 Comparison of heart rate,carotid artery pressure and ventricular pressure between male and female FMMU albino guinea-pig

表5 雄性與雌性普通級FMMU白化豚鼠主要臟器參數Tab.5 Comparison of main organ weights between male and female FMMU albino guinea-pig
本文針對毒理藥理等實驗中常用的250~350g體重范圍內白化豚鼠的生理生化特征進行測定,供相關領域的研究人員參考使用。在相近體重范圍內,雌性與雄性普通級FMMU白化豚鼠各主要臟器重量及臟器系數差異不顯著,測定數據較之前文獻報道[5]而言,更準確地說明性別對臟器參數沒有影響。血液檢測結果顯示,在22項血常規、22項血生化及23項血氣指標中,除血小板計數、谷丙轉氨酶、總膽紅素、乳酸4項指標外不存在性別間差異,與顧為望[6]等關于雌雄間血生理生化差異顯著的報道不一致。谷丙轉氨酶(ALT)主要存在于肝臟、心臟和骨骼肌中,肝臟發生炎癥病變可使血清ALT增高。外周血ALT水平與缺血性腦卒中患者預后獨立相關,外周血ALT升高可降低谷氨酸鹽對腦細胞的損害[7]。研究表明高脂血癥豚鼠血清ALT顯著增加[4],而總膽紅素(TBIL)主要用來診斷是否有肝臟疾病或膽道是否發生異常[8]。實驗結果顯示,雄性豚鼠ALT、TBIL顯著高于雌性,因此,在使用白化豚鼠開展相關研究時應注意可能存在的性別差異。此外,在血液生理生化以往研究的基礎上[4,9-10],本實驗補充了豚鼠血氣分析的測定結果。
豚鼠心功能觀察通常采用測定心率、冠脈流量[3]、心電圖[2]等方法,而少見報道豚鼠頸總動脈壓及心室壓的測定值,而血壓及心室壓是評估心血管功能的重要指標[11-12]。目前,國內外測定豚鼠無創血壓的儀器較少,耗材昂貴,使用者少,可供查閱的數據不足。本文采用有創血壓測定的結果可供使用白化豚鼠開展心血管方面實驗的研究者參考。
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The measurement and comparison of basic physiological and biochemical index of male and female FMMU albimo guinea-pig
ZHANG Xiao-yu,ZHANG Xiu-yan,CHEN Wei-sheng,LIANG Ning,ZHAN Chun-lie
(Animal experiment center,Guangzhou General Hospital of Guangzhou Military Command of PLA,Guangzhou 510010,China)
ObjectiveTo determine and compare the parameters of blood,heart rate,carotid artery pressure,ventricular pressure and organ indexes of male and female FMMU albino guinea-pig.MethodsA total of 30 guinea-pig about 250~350 g weight were fed for a week,then blood physiological and biochemical index,blood gas and carotid artery pressure were determined,ventricular pressure were measured by arterial catheterization and heart rate were measured on the respiratory support condition.Finally,weight of guinea-pig body and main organ were weighed.ResultThe difference of platelet count,glutamic-pyruvic transaminase,total bilirubin and lactic acid were significant(P<0.05 or P<0.01).The difference of carotid diastolic blood pressure and mean blood pressure,left ventricular systolic pressure and mean pressure were totally significant(P<0.05 or P<0.01).And there were no significant differences in weight and organ coefficient of main organs.ConclusionThere were differences in blood physiology and biochemistry,blood gas,carotid artery pressure and ventricular pressure in different gender of the ordinary grade FMMU albino guinea-pig.
FMMU albino guinea-pig;Blood parameter;Carotid artery pressure;Ventricular pressure;Organ parameter
R-332
A
1671-7856(2015)11-0037-05
10.3969.j.issn.1671-7856.2015.11.009
廣東省科技計劃基礎條件建設項目(2012B060300022)。
張曉玉(1989-),女,研究方向:人類疾病動物模型的開發利用,E-mail:zhxiaoyu11@163.com。
詹純列(1963-),男,研究方向:實驗動物與人類疾病動物模型,E-mail:1513508151@qq.com。
﹞2015-09-08