“三焦膜系學(xué)說”指導(dǎo)治療代謝綜合征的實(shí)驗研究*

林含航，樸益熙，趙巖松

（北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)學(xué)院臨床基礎(chǔ)系，北京 100029）

“三焦膜系學(xué)說”指導(dǎo)治療代謝綜合征的實(shí)驗研究*

林含航，樸益熙，趙巖松

（北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)學(xué)院臨床基礎(chǔ)系，北京 100029）

[目的]探討三焦膜系學(xué)說的代表方丹蛇湯治療代謝綜合征的作用機(jī)制，以揭示其在指導(dǎo)臨床復(fù)雜疑難證治療中的意義。[方法]取SPF級Wistar雄性大鼠，隨機(jī)分為正常組、模型組、西藥組、中藥組。除正常組外，各組大鼠均以高脂高鹽飼料喂養(yǎng)。造模8周，治療組用藥3周，同時監(jiān)測大鼠體質(zhì)量、腹圍、體長、空腹血糖、血壓，麻醉腹主動脈取血檢測空腹胰島素含量，計算胰島素抵抗指數(shù)（HOMA－IR）。[結(jié)果]中藥組的血糖、血清胰島素、胰島素抵抗，血壓指標(biāo)與模型組相比均顯著降低（P＜0.05），中藥組與西藥組比較無統(tǒng)計學(xué)差異。[結(jié)論]丹蛇湯能對代謝綜合征大鼠的糖代謝異常和高血壓有治療調(diào)節(jié)作用。

三焦膜系學(xué)說；代謝綜合征；實(shí)驗研究

中醫(yī)學(xué)的發(fā)展在于繼承基礎(chǔ)上的創(chuàng)新。全國著名老中醫(yī)藥專家孔光一教授[1]總結(jié)數(shù)十年臨床經(jīng)驗提出“三焦膜系學(xué)說”，即嘗試性地解釋三焦的意義，使其從無形變有形，并論證其生理病理特點(diǎn)。孔光一教授認(rèn)為三焦膜系與腎、心、肺、肝膽等多臟腑功能及感邪伏藏關(guān)系緊密，可用以認(rèn)識歸納復(fù)雜證候的病機(jī)。在該理論思想指導(dǎo)下也多將宣肺，和胃，通腑，疏肝，理脾，養(yǎng)陰，活絡(luò)，溫陽，清熱等多法同置一方，治療層面周全，體現(xiàn)中醫(yī)整體論治的特點(diǎn)。三焦膜系學(xué)說多用于指導(dǎo)現(xiàn)代較難治愈、病機(jī)復(fù)雜的疾病，其中代謝綜合征的治療具有代表性。

代謝綜合征（MS）是以胰島素抵抗為主，由多組與體內(nèi)心血管代謝異常相關(guān)的危險因素在同一體內(nèi)集結(jié)的狀態(tài)，其中包括肥胖，高密度膽固醇脂蛋白（HDL－C）降低，甘油三酯（TG）、低密度膽固醇脂蛋白（LDL-C）升高，糖代謝異常，高血壓，高尿酸血癥，微量白蛋白尿等多種疾病。而筆者通過對孔光一教授在“三焦膜系學(xué)說”指導(dǎo)下的自擬方丹蛇湯治療代謝綜合征大鼠的實(shí)驗研究，探討該方作用療效和機(jī)制，并為臨床治療提供新思路。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗動物 3周齡Wistar大鼠60只，清潔級，雄性，55～65 g，購自北京維通利華實(shí)驗動物技術(shù)有限公司，許可證件號為京ICP證070170號。

1.2 飼料 普通飼料由北京維通利華實(shí)驗動物技術(shù)有限公司配制，蛋白質(zhì)20 g，脂肪4.5 g，碳水化合物52 g。用于正常對照組。高糖高脂高鹽飼料由北京科奧協(xié)力飼料有限公司配制（玉米8.8%，豆粕24%，面粉5%，次粉5%，甜菜粕4.5%，磷酸氫鈣2%，石粉1.2%，魚粉3.5%，酵母粉1%，食鹽2%，礦物鹽和維生素混合物1%，豬油15%，蛋黃粉10%，蔗糖15%，膽固醇2%。60 kg，SPF級。）用于模型組和治療組。

1.3 藥物 鏈脲佐菌素STZ（S0130）購自Sigma（上海）貿(mào)易有限公司。2）羅格列酮片，每片4mg，批號：131101，購自成都恒瑞制藥有限公司。中藥丹蛇湯，組成為丹參30 g，炒白術(shù)10 g，白花蛇舌草15 g等，購自中國北京同仁堂（集團(tuán)）有限責(zé)任公司。生藥按傳統(tǒng)方法浸泡20min，大火煮開，小火煎煮20min，兩煎合一，然后濃縮至100%煎液置-20℃冰箱凍存?zhèn)溆茫脮r復(fù)溶至室溫。

1.4 儀器和試劑 銳卓金銳血糖機(jī)配套血糖試紙，生產(chǎn)批號471545，購自北京普博欣生物科技有限責(zé)任公司。Softron智能無創(chuàng)大鼠尾部血壓計（BP-98A），北京軟隆生物技術(shù)有限公司。大鼠胰島素INS試劑盒，購自北京鼎國長生生物技術(shù)有限責(zé)任公司；酶標(biāo)儀（Multiskan MK3），Thermo Scientific公司；自動洗板機(jī)（DEM-3），北京拓普分析儀器有限公司；電熱恒溫培養(yǎng)箱（SKP-02.600）；黃石市恒豐醫(yī)療器械有限公司；離心機(jī)（3K18），Sigma公司。

1.5 方法

1.5.1 動物分組和模型建立 選用3周齡wistar大鼠，隨機(jī)分組成5組，即STZ造模濃度預(yù)試組15只，因剩下數(shù)量無法均分4組，再按隨機(jī)分組法，結(jié)果為正常組11只，中藥組11只，西藥組11只，模型組12只。除正常組提供普通飼料以外，其余均以高糖高脂高鹽飼料喂養(yǎng)，自由攝食，造模期為9周。第7周給預(yù)試組進(jìn)行STZ濃度梯度測試。STZ的使用劑量有文獻(xiàn)指出使用25mg/kg制成MS大鼠模型[4]，和使用STZ濃度梯度測試出30mg/kg為最佳劑量的報道[5]參考下，分別以 25、30、35mg/kg 的劑量個別腹腔注射預(yù)試組別5只大鼠。3日后以尾部刺血檢測其血糖水平，取血糖指標(biāo)達(dá)標(biāo)，大鼠死亡率最低組的STZ濃度為造模注射濃度。經(jīng)STZ濃度梯度測試結(jié)果判定發(fā)現(xiàn)各組大鼠血糖值差異無統(tǒng)計學(xué)意義，后經(jīng)過斟酌將其提量至45mg/kg。根據(jù)預(yù)試大鼠血糖結(jié)果不佳故決定多喂養(yǎng)一周，第8周末方給大鼠禁食12 h不禁水，給模型組、中藥組、西藥組腹腔注射STZ 45mg/kg，正常組腹腔注射生理鹽水，9周末檢測體質(zhì)量、腹圍、體長、食欲和行為狀態(tài)觀察空腹血糖和血壓指標(biāo)判定成模情況，達(dá)標(biāo)者進(jìn)入給藥期。

1.5.2 給藥方法 參照《人和動物間按體表面積折算的等效劑量比值表》，中藥組給予丹蛇湯濃縮液9.24 g/（kg·d）灌胃；西藥組給予羅格列酮水溶液0.42mg/kg灌胃；正常組和模型組給予等量的生理鹽水灌胃。有文獻(xiàn)表明同類實(shí)驗的給藥期為2周[7],為使藥物療效盡量發(fā)揮充分，此次實(shí)驗給藥時間為3周（第10～12周）。

1.5.3 體質(zhì)量、體長、腹圍的測量 大鼠的體質(zhì)量、體長、腹圍測量時間點(diǎn)分別為第 0、2、4、8、12周各測量1次。

1.5.4 空腹血糖和血壓檢測 大鼠在9周末（給藥期前）和12周（給藥期后）末禁食不禁水12 h后，尾部刺血測試血糖，并使用Softron智能無創(chuàng)大鼠血壓計通過大鼠尾部壓迫測試、記錄收縮壓。

1.5.5 血漿標(biāo)本制備 于給藥3周末，禁食12 h后，腹腔注射10%水合氯醛麻醉，腹主動脈取血，室溫靜置 2 h，1 000×g離心 15min，取血清，按酶聯(lián)免疫分析試劑盒，采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗（ELISA）方法檢測，嚴(yán)格按照說明書操作。

1.5.6 胰島素抵抗指數(shù)的計算 胰島素抵抗指數(shù)（HOMA－IR）的計算方法下：

HOMA-IR=空腹血糖水平（F B G，mmol/L）×空腹胰島素水平（F INS，mU/L）/22.5

1.5.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 采用SPSS18.0軟件分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間采用單因素方差分析法，組間兩兩比較若方差齊采用LSD法，若不齊采用Dunnett’s T3法，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

實(shí)驗期間大鼠出現(xiàn)了意外死亡情況，每組各剩8只。

2.1 丹蛇湯對MS大鼠的空腹血糖，血清胰島素和胰島素抵抗指數(shù)影響 見表1。結(jié)果顯示：模型組的FBG，INS，HOMA-IR明顯均高于正常組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），中藥組的 FBG，INS，HOMA-IR明顯均低于模型組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。中藥組的降血糖和改善胰島素抵抗效果略優(yōu)于西藥組。

表1 丹蛇湯對MS大鼠的糖代謝和胰島素抵抗的影響（ ±s）Tab.1 Effectsof Dan snakedecoction on sugarmetabolism and insulin resistanceofmetabolic syndrome rats（ ±s）

表1 丹蛇湯對MS大鼠的糖代謝和胰島素抵抗的影響（ ±s）Tab.1 Effectsof Dan snakedecoction on sugarmetabolism and insulin resistanceofmetabolic syndrome rats（ ±s）

注：中藥組與模型組比較，#P<0.05；模型組和正常組比較*P<0.05。

組別 動物數(shù) FBG（mmol/L） INS（mU/L） HOMA-IR正常組 8 5.10±0.50 26.39± 4.72 5.96± 1.13模型組 8 26.99±4.20* 52.27±16.52* 62.13±19.59*中藥組 8 7.23±2.46# 16.03± 4.06# 4.94± 1.31#西藥組 8 11.43±6.38 25.17± 8.24 11.77± 5.20

2.2 丹蛇湯對MS大鼠的血壓影響 見表2。結(jié)果顯示，正常組的血壓明顯比模型組低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），中藥組的血壓比模型組低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。但中藥組和使用羅格列酮的西藥組無統(tǒng)計學(xué)差異。

表2 丹蛇湯對MS大鼠血壓的影響（±s）Tab.2 Effectsof Dan snake decoction on blood pressure of metabolic syndrome rats（ ±s）

表2 丹蛇湯對MS大鼠血壓的影響（±s）Tab.2 Effectsof Dan snake decoction on blood pressure of metabolic syndrome rats（ ±s）

注：中藥組與模型組比較，#P<0.05；模型組和正常組比較*P<0.05。

組別 動物數(shù) 收縮壓（mmHg）正常組 8 92.08±3.21模型組 8 125.95±4.46*中藥組 8 99.76±8.60#西藥組 8 95.96±9.64

2.3 丹蛇湯對大鼠的體質(zhì)量、體長、腹圍的影響結(jié)果顯示，中藥組的大鼠體質(zhì)量、腹圍、體長，明顯比模型組低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。模型組體長，體質(zhì)量，腹圍和正常組無明顯差異，不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表3。大鼠體質(zhì)量變化呈現(xiàn)先增后降的趨勢。見表4。

表3 丹蛇湯對MS大鼠的體質(zhì)量、體長、腹圍的影響（±s）Tab.3 Effectsof Dan snake decoction on weight,abdom inalgirth ofmetabolic syndrome rats（ ±s）

表3 丹蛇湯對MS大鼠的體質(zhì)量、體長、腹圍的影響（±s）Tab.3 Effectsof Dan snake decoction on weight,abdom inalgirth ofmetabolic syndrome rats（ ±s）

注明：中藥組與模型組比較，#P<0.05；模型組和正常組比較，*P>0.05

組別 動物數(shù) 體質(zhì)量（g） 腹圍（cm） 體長（cm）正常組 8 443.68±24.33 18.12±0.99 18.12±0.99模型組 8 426.15±48.28* 18.13±1.13* 18.13±1.13*中藥組 8 368.89±24.11# 16.75±0.71# 16.75±0.71#西藥組 8 375.13±23.71 17.00±0.93 17.00±0.93

表4 12周各組大鼠體質(zhì)量的變化情況Tab.4 Changesof body weightof ratover the12-week study period in each group g

3 討論

代謝綜合征以肥胖、高血糖、高血脂、高血壓為特征，中心病理機(jī)制為胰島素抵抗。因此，本實(shí)驗選取體質(zhì)量、腹圍、血壓、空腹血糖、胰島素及胰島素抵抗指數(shù)等指標(biāo)，檢測丹蛇湯的療效。造模9周后,模型組較正常組的空腹血糖，血清胰島素，血壓均有顯著升高，提示以胰島素抵抗和高血壓為中心的代謝綜合征大鼠模型征模型成功建立。實(shí)驗結(jié)果表明：三焦膜系理論指導(dǎo)下的丹蛇湯和羅格列酮均可降低大鼠空腹血糖、胰島素水平，有效降低胰島素抵抗指數(shù)（P<0.05）。丹蛇湯對于血壓的調(diào)控效果也較為顯著（P<0.05）。從體質(zhì)量變化看，喂食高脂飼料的模型組在最初3周體質(zhì)量較正常組顯著增加，第4周開始大鼠主動進(jìn)食高脂飼料勢頭減弱，繼而體質(zhì)量上升緩慢。這與人類過食肥甘食物后，呈現(xiàn)納呆表現(xiàn)確有相似之處。因此進(jìn)食高脂飼料模型大鼠12周后體質(zhì)量卻低于正常組。可見，在周期較長的動物實(shí)驗中，大鼠的依從性也是影響實(shí)驗的重要因素灌藥治療期間，中藥組大鼠后期較模型組和西藥治療組，毛色質(zhì)稍好轉(zhuǎn)，活躍度有增。

隨著人們生活水平的逐漸提高，MS發(fā)病率逐年升高，嚴(yán)重影響人類生活質(zhì)量甚至危及生命。根據(jù)臨床癥狀的偏重不同，有學(xué)者提出將代謝綜合征分為4型：肥胖或超重型、胰島素抵抗型、血脂紊亂型、高血壓型，從而治療側(cè)重點(diǎn)不同[8]。現(xiàn)今對MS的治療也主要針對糾正糖脂代謝與改善心血管系統(tǒng)功能。有學(xué)者提出微觀證治的思路，藥物治療包括調(diào)血脂、降血壓、降血糖、消血凝（栓），減少低度炎癥反應(yīng)和前血栓狀態(tài)[9]。中醫(yī)治療特色在于因證施治，如仝小林[10]將代謝綜合征分為早中晚三期，黃素方[11]等將MS分為7個證型，證型主要涉及肝胃郁熱、熱瘀互結(jié)、痰瘀互結(jié)、脾虛痰濕、陰虛陽亢、氣陰兩虛、陰陽兩虛等，治療多選大柴胡湯、龍膽瀉肝湯合清胃散、加味三黃湯、平胃散合溫膽湯、血府逐瘀湯、參苓白術(shù)散、六君子湯等。絡(luò)病理論指導(dǎo)的津力達(dá)顆粒[12]、復(fù)方調(diào)脂降糖湯[13]（黃芪、絞股藍(lán)、萊菔子、山楂、三七、蒲黃、澤瀉等10味藥物）也都取得顯著降低胰島素抵抗的效果。大黃單味藥可降低Ⅱ型糖尿病大鼠胰島素水平，提高胰島素受體結(jié)合力從而減輕高胰島素血癥和糖脂代謝障礙[14]，這也是在實(shí)熱證型中使用大黃的藥理學(xué)依據(jù)。

結(jié)合中醫(yī)理論分析，高糖高脂高鹽飲食，缺乏運(yùn)動，往往導(dǎo)致脾失運(yùn)化，氣滯濕蘊(yùn)，日久化熱，甚至煉濕成痰，氣滯血瘀，痰瘀互結(jié)，致使體內(nèi)三焦氣機(jī)不暢，清陽濁陰升降失調(diào)，臨床多見于糖代謝異常，高血壓患者。有文獻(xiàn)[15]表明化瘀降濁治法可明顯改善MS的臨床癥狀。而丹蛇湯中的丹參、生山楂活血化瘀，半夏和胃化痰，白花蛇舌草清熱解毒利濕，又可針對治療MS中存在的慢性炎癥狀態(tài)；炒白術(shù)，陳皮健脾理氣祛濕，扶助脾胃之氣。其方用藥有理上焦心脈的丹參；和中焦運(yùn)化的生山楂、炒白術(shù)助正氣；清熱解毒的白花蛇舌草，溫燥化痰的二陳祛除邪氣。現(xiàn)代藥理研究也證實(shí)了大劑量丹參可能通過促進(jìn)胰島素分泌的作用減輕糖代謝的損害,具有擴(kuò)張血管丹抑制血栓形成，降低血小板聚集性及抗血栓形成的作用，從而改善MS心血管系統(tǒng)癥狀[16-17]。而生山楂可調(diào)節(jié)糖脂代謝，降糖降壓，改善高胰島素血癥，可有效改善MS相關(guān)癥狀[18-19]。具有清熱解毒之功的白花蛇舌草，具有良好的抗氧化作用和抗炎作用[20]。諸藥相配，使得濕熱痰瘀得去，三焦通利，邪去正復(fù)。三焦為元?dú)狻⑺哼\(yùn)行要道，而孔教授的“三焦膜系學(xué)說”意即用三焦膜系來說明腎、心、肺、肝膽等臟腑功能及感邪伏藏等病機(jī)因素之間的復(fù)雜聯(lián)系，并通過三焦膜系分析其相互影響的病機(jī)演變。三焦膜系理論指導(dǎo)下的丹蛇湯既反應(yīng)了現(xiàn)代中醫(yī)多角度綜合治療的整體觀特色，又結(jié)合個人臨床經(jīng)驗，體現(xiàn)了傳統(tǒng)中醫(yī)理論的創(chuàng)新。實(shí)驗研究證實(shí)，該方能改善MS大鼠的糖代謝和血壓，其作用優(yōu)勢在于對MS個體整體生存狀態(tài)的改善，這一點(diǎn)將在下一步臨床試驗中進(jìn)一步觀察。

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Experimentsof treatmentonmetabolic syndromeby the guidance of“Sanjiao(triple energizer)membrane system theory”

LINHan-hang,PIAOYi-xi,ZHAOYan-song
（DepartmentofClinicalBasic Medicine,Preclinical Schoolof Beijing University ofChineseMedicine,Beijing 100029,China）

[Objective]Through the experiment research,we discussed themechanism of the treatment ofmetabolic syndrome of the representative prescription-Dan snake decoction，which isguided by “Sanjiao(triple energizer)membrane system theory”,to reveal its significance in guiding the clinical treatment for complicated cases.[Methods]SPF,maleWistar ratswere randomly divided into normal control group,model group,high fat and sugar high salt rosiglitazone,Dan snake decoction treatment group.In addition to the normal controlgroup,each group of ratswas fed with high fatand salt.Model Building 8 weeks,drug treatmentgroup 3weeks,at the same time monitoring in the rat body weight,abdominal girth,fasting blood glucose,blood pressure,anesthesia abdominal aorta take blood test fasting insulin levels,insulin resistance index(HOMA-IR).[Results]The blood glucose,serum insulin,insulin resistance,blood pressure index of Dan snake group compared with themodelgroup were significantly lower(P<0.05),with rosiglitazone group was no significant difference.[Conclusion]Dan snake decoction can regulate on sugarmetabolism and blood pressure ofmetabolic syndrome rats,and relieve symptoms frommultiple angles.

Sanjiao(tripleenergizer)membrane system theory;metabolic syndrome;experimentstudy

R473.5

A

1672-1519（2015）08-0492-04

10.11656/j.issn.1672-1519.2015.08.13

國家中醫(yī)藥管理局孔光一名老中醫(yī)經(jīng)驗傳承工作室；北京中醫(yī)藥大學(xué)自主課題編號（2013-JYBZZ-JS-121）。

林含航（1988-），女，碩士研究生，主要研究方向為中藥驗方的臨床及實(shí)驗研究。

趙巖松，E-mail:zyscbn@126.com。

2015-03-02）

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