尿蛋白電泳在糖尿病早期腎損害診斷中的應用

摘要：目的 初步研究尿蛋白電泳在糖尿病早期腎損害診斷中的應用。方法 對54例糖尿病患者采用十二烷基硫酸鈉-瓊脂糖凝膠電泳進行尿蛋白組分分析。結果 經分析，可區分為腎小球性、腎小管性、生理性、以及混合性蛋白尿等分類，其中對照組中有4例出現清蛋白條帶。測試患者中3例未檢出，生理性蛋白尿4例，腎小管性蛋白尿33例。腎小球性蛋白尿13例，混合性蛋白尿7例。結論 十二烷基硫酸鈉-瓊脂糖凝膠電泳進行尿蛋白分析，尿蛋白按分子量大小予以分離，結果清晰，可靠，能真正反映尿中各種蛋白組分的含量及變化，對糖尿病早期腎損害的診斷有較高的臨床應用價值。

關鍵詞：尿蛋白電泳；糖尿病；腎損害

在腎臟疾病中，最常見的臨床表現是尿中出現蛋白。它不僅會有量的變化，也可以出現成分的變化。所以，分析尿蛋白的成分及模式，可以正確了解尿蛋白性質，了解腎臟損害的部位以及損害程度，對臨床具有重要意義[1]。糖尿病腎病是糖尿病常見的嚴重并發癥之一，嚴重時可導致尿毒癥，早期診斷有利于治療和緩解病情，通過電泳分析尿蛋白組分，可以幫助明確它的來源，如果出現混合性尿蛋白，表示腎功能損害累及腎小球及腎小管，從而有助于病情診斷和預后判斷[2]。本次實驗通過分析，尿蛋白電泳技術對患者無創傷，利用尿蛋白來源，分析腎臟損害部位及程度，從而為臨床診斷與鑒別診斷提供可靠的依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 ①患者組：為我院內一科確診的糖尿病患者54例，其中男32例，女22例，年齡37～82歲，病齡2～22年；②對照組：為我院體檢中心健康體檢者25例，已排除為臨床糖尿病患者。

1.2儀器設備 ①桂林優利特150尿液分析儀及配套試紙；②sebia HYDRASYS全自動電泳分析儀及配套試劑。

1.3方法 住院患者新鮮晨尿，尿常規項目檢測，如尿蛋白≥3+，則稀釋至2+。將80ul尿液和20ul十二烷基硫酸鈉-溴酚藍稀釋液混勻。電泳儀打開預熱30min。取10ul加入孔中，10min后開始電泳。染色，烘干后掃描報告結果。

2 結果

2.1尿常規檢測結果 25例對照組尿常規檢測，尿蛋白均為陰性。54例糖尿病患者尿蛋白檢測，其中6例為陰性，占11.1%；48例陽性，占88.9%。

2.2尿蛋白電泳結果 25例對照組中有4例出現單純淡染的蛋白條帶，為生理性蛋白尿。糖尿病患者蛋白尿標本經過十二烷基硫酸鈉-瓊脂糖凝膠電泳在凝膠片中出現了4種不同的電泳圖譜：①生理性蛋白尿：其圖形特征為少量淡染的單一的清蛋白帶，其他高、低分子量區帶均未出現；②腎小管性蛋白尿：為低分子蛋白，其圖形特征為除清蛋白區帶以外，在凝膠片陽極和清蛋白之間出現其他電泳區帶；③腎小球性蛋白尿：為高分子蛋白，其圖形特征是除清蛋白區帶外，在加樣點與清蛋白之間出現其他電泳區帶；④混合性蛋白尿：其圖形特點是低、中、高分子蛋白條帶均同時出現電泳區帶。

3 討論

3.1正常情況下，由于腎小球濾過膜的孔徑屏障和電荷屏障作用，血漿的中、高相對分子質量的白蛋白、球蛋白不能通過濾過膜；相對分子質量小的蛋白質，如微球蛋白、溶菌酶等，則可以自由通過濾過膜，但其濾過量低，95%又在近曲小管中被重吸收。因此，終尿中的蛋白質含量很少，僅為30～130mg/24h.隨機尿中蛋白質為0～80mg/L，尿蛋白定性試驗為陰性。

3.2蛋白尿是腎臟疾病的重要臨床表現，正確判斷蛋白尿性質來源對了解腎臟的損害程度以及指導臨床治療具有重要的意義。腎臟是糖尿病腎損害的主要靶器官，容易發生結構和功能減弱，腎或其他組織分泌蛋白質增加時即可形成蛋白尿。

3.3蛋白質是尿液化學成分檢查中最重要的項目之一。目前臨床實驗室采用干化學試帶法測蛋白質。試帶法采用PH指示劑蛋白質誤差原理。在PH3.2的條件下，酸堿指示劑產生的陰離子與帶陽離子的蛋白質結合生成復合物，引起指示劑進一步電離，當超越緩沖范圍時，指示劑發生顏色改變。顏色的深淺與蛋白質含量成正比。定性陽性稱之為蛋白尿，它只適合于清蛋白的檢測，對球蛋白不太敏感。尿蛋白定量檢測是測得尿液中的蛋白質總量，不能將蛋白進行分類。電泳儀它的瓊脂凝膠介質，在電場的作用下，可將尿液中的蛋白質完全依據相對分子量的大小分成不同條帶，尿蛋白按分子量的大小分為低分子量蛋白、中分子量蛋白、高分子量蛋白及混合性蛋白。通過區分不同位置蛋白區帶，判斷尿液蛋白質分子的大小，進而判斷為生理性、腎小管性、腎小球性、混合性蛋白尿。

3.4糖尿病出現蛋白尿是由于長期高濃度血糖導致腎小動脈硬化，腎組織缺氧及缺血，微循環發生障礙，導致腎小球通透性增加，蛋白質濾過的結果。也是腎小管對濾過蛋白重吸收障礙的結果。糖尿病腎損害早期，腎小管受累早于腎小球損害，患者多表現為多尿、夜尿，臨床檢測發現尿滲透壓及尿比重下降，出現不同程度腎小管性蛋白尿，其可能機制是由于腎血管自身調節障礙，導致血管痙攣，從而血流量減少，而腎小管對缺血損害相較腎小球靈敏，故先出現腎小管損害，所以腎小管排出蛋白增加。本文結果顯示糖尿病患者中出現4例生理性蛋白尿，33例腎小管性蛋白尿，13例腎小球性蛋白尿，7例混合性蛋白尿，結果符合糖尿病腎損害早期腎小管受累較為突出的特點，且隨著病情的進展，出現腎小球性蛋白尿，甚至出現混合性蛋白尿。由于結果也提示對于尿蛋白陰性的糖尿病患者應做尿蛋白電泳，對于早發現腎損害有很大的意義。

綜上所述，尿蛋白電泳可以作為糖尿病早期腎損害的診斷指標，更加透徹的了解尿蛋白的組分以及腎臟損害的部位和程度，在對疾病治療和預后判斷有十分重要價值。

參考文獻：

[1]叢玉隆，王丁.當代檢驗分析技術與臨床[M].北京：中國科學技術出版社，2002：228-229.

[2]劉成玉，羅春麗.臨床檢驗基礎[M].第5版.人民教育出版社，2012.

編輯/哈濤