淺析高效液相色譜分析法在各領(lǐng)域的應(yīng)用及發(fā)展前景

宋蘭英

摘 要：作為一種分離分析方法，高效液相色譜分析法具有準(zhǔn)確、高效以及快捷的特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用在食品安全、醫(yī)藥、環(huán)境、生命科學(xué)以及石油化工中，并且已經(jīng)成為這些領(lǐng)域中進(jìn)行檢測(cè)工作的首選方法。文章對(duì)液相色譜分析法在不同領(lǐng)域中的應(yīng)用情況進(jìn)行了分析和介紹。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜分析法；應(yīng)用；發(fā)展前景

作為一種常規(guī)高效分離分析技術(shù)，高效液相色譜分析法在各種色譜模式中具有最廣泛的應(yīng)用，世界上現(xiàn)在有很多包括有生物活性的化合物、熱不穩(wěn)定化合物、離子型化合物以及高分子化合物在內(nèi)的化合物都能夠選擇不同模式的高效液相色譜進(jìn)行分離和分析，因此國(guó)際分析化學(xué)界目前發(fā)展最快的學(xué)科質(zhì)疑就是高效液相色譜，并且其廣泛的應(yīng)用在了很多學(xué)科領(lǐng)域中。

1 高效液相色譜儀的應(yīng)用原理和構(gòu)造

1.1 高效液相色譜儀的原理

采用高壓泵將儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相打入到系統(tǒng)中，在經(jīng)過(guò)樣器之后會(huì)流入到流動(dòng)相中，并且被流動(dòng)相在固定相中載入。因?yàn)樵趦上嘀袠悠啡芤褐械母鹘M分的分配系數(shù)是不同的，所以在兩相進(jìn)行相對(duì)運(yùn)動(dòng)的時(shí)候，在通過(guò)吸附- 解吸這樣一種分配過(guò)程時(shí)，在移動(dòng)速度方面各個(gè)組分就會(huì)出現(xiàn)較大的差別，并且變成單個(gè)的組分最終在柱內(nèi)流出來(lái)。樣品的濃度在經(jīng)過(guò)檢測(cè)器的時(shí)候就會(huì)以電信號(hào)的形式朝著記錄儀傳動(dòng)，最后會(huì)以圖譜形式將數(shù)據(jù)打印出來(lái)[1]。

1.2 儀器的具體構(gòu)造

高效液相色譜儀通常包括以下幾個(gè)部分：記錄儀、檢測(cè)器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)、色譜柱以及輸液系統(tǒng)等，同時(shí)還有餾分收集系統(tǒng)配備在制備箱中，為了能夠保證具有良好的分析效果，高效液相色譜儀在結(jié)果重現(xiàn)性、靈敏度、精確度以及準(zhǔn)確度等方面都具有非常高的要求。

1.2.1 檢測(cè)器：用色譜柱流出的物質(zhì)進(jìn)行連續(xù)檢測(cè)的儀器就是檢測(cè)器，同時(shí)其還需要實(shí)施定量和定性分析。一般檢測(cè)器都具有較快的響應(yīng)值線性范圍、穩(wěn)定的基線、較小的噪音以及較高的靈敏度的要求。在很多國(guó)家都在對(duì)新的檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行積極的研究和開(kāi)發(fā)，此時(shí)的高效液相色譜分析法的運(yùn)用得到了進(jìn)一步的擴(kuò)大。以檢測(cè)的不同需要為根據(jù)可以將其劃分為小角度激光散射檢測(cè)器、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器、質(zhì)譜檢測(cè)器、核磁共振檢測(cè)器、紅外檢測(cè)器、電化學(xué)檢測(cè)器、示差折光檢測(cè)器以及紫外檢測(cè)器等[2]。

1.2.2 色譜柱：色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟，一般來(lái)講色譜柱通常都屬于不銹鋼柱，有各種填充劑裝在里面，而硅膠是最常用的填料，其能夠在正相色譜中應(yīng)用。以不同的鍵合基團(tuán)為根據(jù)可以將化學(xué)鍵合固定相應(yīng)用在反相或正相色譜。

1.2.3 輸液系統(tǒng)：輸液系統(tǒng)的主要作用是驅(qū)動(dòng)流動(dòng)相攜帶樣品在色譜柱中實(shí)現(xiàn)分離，并最后達(dá)到檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。輸液泵是HPLC系統(tǒng)中最重要的部件之一。泵的種類很多，按輸液性質(zhì)可分為恒壓泵和恒流泵。

輸液系統(tǒng)需要將無(wú)脈沖、準(zhǔn)確以及恒定的流動(dòng)相提供給高效液相色譜分析技術(shù)，同時(shí)其還需要具備長(zhǎng)期的重復(fù)性和流量的精度，并且還能夠保證提供的多元溶劑梯度具有重現(xiàn)性好、準(zhǔn)確度高以及精度好的特點(diǎn)[3]。

2 高效液相色譜法的具體應(yīng)用和前景分析

作為一種新穎的技術(shù)手段，高效液相色譜分析法與傳統(tǒng)的分析方法比起來(lái)在很多方面都具有較大的優(yōu)勢(shì)。下面就對(duì)高效液相色譜法在各個(gè)領(lǐng)域中的具體應(yīng)用和前景進(jìn)行分析和介紹。

2.1 在石油化工方面高效液相色譜分析法的應(yīng)用和前景

2.1.1 在石油工業(yè)化工產(chǎn)品分析中對(duì)高效液相色譜儀的應(yīng)用：高效液相色譜分析技術(shù)在添加劑的分離和組成、石油化工產(chǎn)品、重質(zhì)油以及復(fù)雜原料油等方面都可以將樣品本身具備的性質(zhì)和結(jié)構(gòu)保存下來(lái)，可以使樣品實(shí)現(xiàn)無(wú)損失可回收，而且還可以保證快速分離分析的實(shí)現(xiàn)，因此其在分析石油化工生產(chǎn)和產(chǎn)品時(shí)發(fā)揮著十分重要的作用。相對(duì)于ASTM分析法而言，高效液相色譜分析技術(shù)具有容易自動(dòng)控制、重復(fù)性好以及速度快的特點(diǎn)，然而其在對(duì)輕質(zhì)石油產(chǎn)品以及重質(zhì)石油產(chǎn)品進(jìn)行分離的時(shí)候，首先要除去瀝青，而且不能夠忽視在飽和烴洗提過(guò)程中瀝青質(zhì)的沉淀和吸附對(duì)結(jié)果造成的影響。

2.1.2 在石油產(chǎn)品鑒定技術(shù)中對(duì)高效液相色譜法的應(yīng)用：現(xiàn)在在液相色譜法在石油產(chǎn)品鑒定技術(shù)中屬于一種標(biāo)準(zhǔn)的分離分析方法，特別是在分析蒸氣壓低的樣品組分以及熱穩(wěn)定性差組分的時(shí)候其具有更好的優(yōu)越性。

2.2 在生命科學(xué)領(lǐng)域高效液相色譜分析法的應(yīng)用和前景

基因的解密工作在生命科學(xué)研究工作中具有非常重要的作用，選擇雙向高效液相色譜對(duì)第一向是體積排阻色譜進(jìn)行預(yù)分離處理能夠更好的開(kāi)展分析現(xiàn)代蛋白質(zhì)組的工作，因此在蛋白質(zhì)組學(xué)中雙向電泳與高效液相色譜將會(huì)變成非常關(guān)鍵的分離工具，而生命的奧秘也可能會(huì)由于高效液相色譜分析法的運(yùn)用而具有巨大的發(fā)現(xiàn)。

2.3 在環(huán)境領(lǐng)域高效液相色譜分析法的應(yīng)用和前景

高效液相色譜分析法在很多發(fā)達(dá)國(guó)家被用作常用的環(huán)境監(jiān)測(cè)方法，比如美國(guó)選擇高效液相色譜-熒光法對(duì)甲基氨基甲酸酯殺蟲(chóng)劑在水中進(jìn)行測(cè)定；采用HPLC/電化學(xué)法對(duì)水中的聯(lián)苯胺類化合物進(jìn)行測(cè)定；采用LC/熒光分析法對(duì)固體廢棄物中的多環(huán)芳烴進(jìn)行分析?，F(xiàn)在在環(huán)境分析中已經(jīng)廣泛的應(yīng)用到了高效液相色譜分析法，尤其是在分離和分析具有較差的熱穩(wěn)定性、較大的分子量以及基揮發(fā)性的有機(jī)物污染物質(zhì)的時(shí)候，其具有越來(lái)越明顯的作用。

2.4 在食品安全領(lǐng)域高效液相色譜分析法的應(yīng)用和前景

在食品安全分析領(lǐng)域高效液相色譜分析法具有十分大的優(yōu)勢(shì)，液相色譜法與其他的儀器分析方法比較起來(lái)具有能對(duì)高沸點(diǎn)進(jìn)行分析、較好的檢測(cè)靈敏度、較快的分析速度以及較高的分析效能等優(yōu)點(diǎn)。比如一些學(xué)者在檢測(cè)防腐劑的時(shí)候選擇高效液相色譜分析法取得了很好的效果，在對(duì)苯甲酸和山梨酸進(jìn)行測(cè)定的時(shí)候達(dá)到了96.8%和97.1%的回收率[4]。在2008年檢測(cè)奶粉摻入三聚氰胺風(fēng)波的過(guò)程中高效液相色譜法發(fā)揮了十分關(guān)鍵的作用，面對(duì)當(dāng)時(shí)的形勢(shì)，必須要科學(xué)的檢測(cè)我國(guó)大量的乳制品生產(chǎn)企業(yè)的樣品，并且要將檢測(cè)結(jié)果盡快的出具出來(lái)，從而能夠?qū)⒁粋€(gè)公正準(zhǔn)確的結(jié)論提供給老百姓。因此檢測(cè)方法除了要具備檢測(cè)準(zhǔn)確以及迅速的特點(diǎn)，同時(shí)還要具有較小的檢出量，因此只有高效液相色譜分析法能夠?qū)⑦@一任務(wù)完美的完成。現(xiàn)在在對(duì)三聚氰胺進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候主要采用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法、酶聯(lián)免疫法以及高效液相色譜分析法，在這些方法中液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法可以將三聚氰胺定性與定量快速地檢測(cè)出來(lái)，所以現(xiàn)在已經(jīng)變成首選的檢測(cè)手段。

2.5 在醫(yī)藥領(lǐng)域中高效液相色譜分析法的應(yīng)用和前景

高效液相色譜分析法具有準(zhǔn)確、快速以及高效的特點(diǎn)，因此在藥品儀器分析中具有十分重要的作用。在質(zhì)譜儀以及高效液相分析技術(shù)不斷發(fā)展的今天，現(xiàn)在其已經(jīng)能夠有效的測(cè)定中藥及其原料中各種難提取、難分離、易揮發(fā)、易氧化以及低穩(wěn)定性的組分含量，并且取代了很多手工測(cè)試方法和其他儀器分析法。

3 結(jié)束語(yǔ)

總之，高效液相色譜法相對(duì)于其他很多的檢測(cè)方法而言，具有較高的效率、精密性、準(zhǔn)確性以及可行性，因此在這些領(lǐng)域中高效液相色譜法幾乎都屬于首選的檢測(cè)方法。從上述的分析我們可以發(fā)現(xiàn)，高效液相色譜分析法除了現(xiàn)在發(fā)揮了十分重要的作用之外，在未來(lái)的發(fā)展中其也擁有令人看好的發(fā)展前景。

參考文獻(xiàn)

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[2]朱佳，孫杰.液相色譜法測(cè)定果汁中糖精鈉的不確定度研究[J].食品研究與開(kāi)發(fā)，2012（2）.

[3]梁立娟，呂平，杜國(guó)冬，等.液相色譜雙檢測(cè)器串聯(lián)法測(cè)定農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留[J].食品科技，2011（10）.