冠心病伴2型糖尿病患者血清中Gas6水平檢測及意義

陳 馨，陳 杰，蔣 冰，徐升強

（武漢市第一醫院檢驗科，湖北武漢430022）

冠心病伴2型糖尿病患者血清中Gas6水平檢測及意義

陳 馨，陳 杰，蔣 冰，徐升強＊

（武漢市第一醫院檢驗科，湖北武漢430022）

目的 探討生長停滯特異性基因產物6（Gas 6）與冠心病伴2型糖尿病患者血清中的變化及其臨床意義。方法 選擇心血管內科120例冠心病患者（CHD）作為冠心病組，120例冠心病伴2型糖尿病患者（CHD＋T2DM）組，同時選擇健康體檢者80例作為對照組。ELISA法對三組血清進行Gas 6的濃度檢測，并檢測其空腹血糖（FBG）、糖化血紅蛋白（HbAlc）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、hs－CRP、同型半胱氨酸（Hcy）含量，并對結果數據進行統計學分析。結果 ELISE法檢測健康對照組Gas 6的含量為227.61±7.28pg／ml，冠心病患者組血清中Gas 6含量為278.57±6.61pg／ml，冠心病伴2型糖尿病患者血清中Gas 6含量為285.66±6.37pg／ml。冠心病患者組和冠心病伴2型糖尿病患者組較健康對照組明顯升高，冠心病伴2型糖尿病患者組明顯高于冠心病患者組，差異有統計學意義（P＜0.05）。冠脈狹窄支數越多，血清Gas 6水平越高（P＜0.05）。結論 生長停滯特異性基因產物6（Gas 6）在冠心病伴2型糖尿病患者血清中濃度明顯升高，且隨冠脈狹窄支數增多而增高，提示Gas 6參與冠心病伴2型糖尿病的發生發展。

生長停滯特異性基因產物6；冠心病；2型糖尿病；炎癥因子

（Chin J Lab Diagn，2015，19：0896）

冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（冠心病，CHD）是一種嚴重威脅中老年人的心血管疾病，近年來認為冠心病是一種炎癥反應性疾病［1，2］。中國心臟調查組研究表明我國住院患者中有超過六成的冠心病患者合并糖代謝異常，糖尿病是冠心病的主要危險因素之一［3］，2型糖尿病和動脈粥樣硬化同屬一種慢性、亞臨床炎性反應性疾病，兩者發病機制存在一定的相似性。研究血清中生長停滯特異性基因產物6（Gas 6）在健康人群、冠心病患者、冠心病合并糖尿病患者三組人群中濃度水平的變化，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 研究對象

收集2012年11月至2014年5月武漢市第一醫院心血管內科冠心病（CHD）患者血清標本120例，其中男性59例，女性61例，平均年齡為45－65歲。冠心病伴2型糖尿病（CHD＋T2DM）患者血清標本120例，其中男性55例，女性65例，平均年齡為45－65歲。患者均經過彩超、CT、冠脈造影等檢查，冠脈造影采用Judkins法經橈動脈做選擇性冠脈造影，由兩位臨床經驗豐富的心內科醫師判定評價冠脈造影結果，冠心病判斷標準為冠脈造影結果至少有1支冠狀動脈病變狹窄程度≥50%，均符合1997年世界衛生組織制定的冠心病診斷標準。糖尿病診斷符合1999年WHO的糖尿病分型診斷標準。對照組為武漢市第一醫院體檢中心健康對照者80例，平均年齡為45－60歲。經體檢及相關實驗室檢查，無心、腦、肝、腎、等疾病，無糖尿病，無急性感染，無血液系統疾病。根據冠心病伴2型糖尿病患者組冠脈造影結果分組，按狹窄累及左冠狀動脈前降支，左回旋支，右冠狀動脈的支數，病變分為單支病變、雙支病變、三支病變，如病變累及左主干計雙支病變。

1.2 研究方法

患者于入院時記錄年齡性別、身高、體重，記錄收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP），并計算體質指數（bodymass index，BMI）。次日晨起空腹采集靜脈血，一管置于EDTA－K2真空采血管中，用來檢測糖化血紅蛋白（HbAlc）。另一管置于分離膠真空采血管中，迅速分離血清，用來檢測其空腹血糖（FBG）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、hs－CRP、同型半胱氨酸（Hcy）含量，生長停滯特異性基因產物6（Gas6）濃度。

FBG、TG、HDL、LDL、hs－CRP、HCY使用OLYMPUS 2700全自動生化分析儀及其配套試劑進行檢測。FBG、TG、HCY采用酶法檢測、HDL、LDL采用直接一步法檢測、hs－CRP采用膠乳增強免疫比濁法。HbAlc使用BIO－RAD VIRANT II糖化血紅蛋白分析儀及其配套試劑檢測，采用高效液相色譜法。Gas 6檢測試劑盒由R＆D公司提供，ELISA法按照試劑盒說明書操作，用Thermo multiskan MK3酶標儀檢測其濃度水平。

1.3 統計學方法

統計學方法采用SPSS 19.0統計軟件對數據進行統計學分析。計數資料用χ2檢驗，計量資料以±s來表示，行正態性檢驗和方差齊性檢驗，兩組間比較用t檢驗，多組間比較用方差分析。以P＜0.05有統計學意義。

2 結果

2.1 健康對照組、冠心病組、冠心病伴2型糖尿病組三組相關臨床資料分析

冠心病伴2型糖尿病組FBG、HbAlc含量較健康對照組和冠心病組明顯增高，差異有統計學意義（P＜0.05）。冠心病組和冠心病伴2型糖尿病組TG、LDL、hs－CRP、HCY含量均較健康對照組增高（P＜0.05），HDL含量較健康對照組降低（P＜0.05）。見表1。

表1 健康對照組、冠心病組、冠心病伴2型糖尿病組三組臨床資料比較（±s）

表1 健康對照組、冠心病組、冠心病伴2型糖尿病組三組臨床資料比較（±s）

注：與健康對照組比較，＊P＜0.05；與冠心病組比較，＃P＜0.05

健康對照組（n＝80）冠心病組（n＝120）冠心病伴2型糖尿病組（n＝120）50±0.86 57±0.67 60±1.33性別（男／女）37／43 59／61 55／65 SBP（mmHg）125.1±10.2 137.1±17.9 147.7±13.75 DBP（mmHg）78.7±6.9 84.6±11.5 87.9±13.8 BMI（kg／m2）23.8±13.5 25.9±1.9 27.1±2.11 FBG（mmol／L）4.22±1.12 5.36±0.69 9.34±1.38＊＃HbAlc（%）5.01±0.87 6.23±1.33 9.72±1.57＊＃TG（mmol／L）1.68±0.12 2.35±0.09＊2.45±0.12＊HDL（mmol／L）1.43±0.03 0.82±0.17＊0.79±0.13＊LDL（mmol／L）2.55±0.07 3.45±0.07＊3.77±0.08＊hs－CRP（mg／L）3.14±0.25 10.53±0.19＊13.66±1.51＊HCY（μmol／L）7.86±0.31 18.87±0.07＊20.92±0.11年齡＊

2.2 健康對照組、冠心病組、冠心病伴2型糖尿病組三組Gas6濃度水平比較

80例健康對照組Gas6的含量為227.61±7.28 pg／ml，120例冠心病組含量為278.57±6.61pg／ml，120例冠心病伴2型糖尿病組含量為285.66± 6.37pg／ml。冠心病組和冠心病伴2型糖尿病組的血清Gas6濃度顯著高于健康對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）。冠心病伴2型糖尿病組較冠心病組Gas6水平升高（P＜0.05）。見表2。

表2 健康對照組、冠心病組、冠心病伴2型糖尿病組三組Gas6濃度水平比較（±s）

表2 健康對照組、冠心病組、冠心病伴2型糖尿病組三組Gas6濃度水平比較（±s）

注：與健康對照組比較，＊P＜0.01；與冠心病組比較，＃P＜0.05

健康對照組冠心病組冠心病伴2型（n＝80）（n＝120）糖尿病組（n＝120）Gas6（pg／ml）227.61±7.28 278.57±6.61＊285.66±6.37＊＃

2.3 冠心病伴2型糖尿病患者冠脈造影分組后Gas6濃度水平結果比較

按狹窄累及左冠狀動脈前降支，左回旋支，右冠狀動脈的支數，病變分為單支病變、雙支病變、三支病變，如病變累及左主干計雙支病變。根據冠脈病變支數，將冠心病伴2型糖尿病組120例患者分成3組研究其血清中Gas6濃度水平。冠脈單支病變患者35例，冠脈雙支病變患者56例，冠脈三支病變患者29例，各組Gas6濃度見表3。冠脈雙支病變和三支病變患者組血清Gas6濃度高于單支病變組，差異有統計學意義（P＜0.05）；冠脈三支病變較雙支病變患者組血清Gas6濃度升高（P＜0.05）。

表3 冠心病伴2型糖尿病組Gas6按冠脈病變支數分組比較（±s）

表3 冠心病伴2型糖尿病組Gas6按冠脈病變支數分組比較（±s）

注：與冠脈單支病變組比較，aP＜0.05；與冠脈雙支病變組比較，bP＜0.05

單支病變雙支病變三支病變例數（n＝120）35 56 29 Gas6（pg／ml）277.57±5.63 284.66±7.97a289.66±7.11ab

3 討論

對冠心病發病機制的研究，近年來偏向于炎癥介質學說［1，2］，其病理表現具有炎癥病理的基本表現形式：變質、滲出和增生。糖尿病可能是一種由免疫功能紊亂參與的、細胞因子介導的炎癥性疾病［4，5］，炎癥反應在糖尿病的發生發展中的作用日益受到關注。大量實驗證明炎癥因子在冠心病、冠心病伴2型糖尿病患者中表達增強［6－8］，如：hs－CRP、HCY等。我們的研究也證明了這一點，冠心病、冠心病伴2型糖尿病患者中的hs－CRP、HCY水平均較健康組增高（P＜0.05）。

臨床癥狀和實驗室結果病理資料表明冠心病伴2型糖尿病患者動脈粥樣病變嚴重程度都比非糖尿病患者嚴重［9］。其中的機制可能為：①糖尿病患者長期高血糖，致使高級糖基化終產物（advanced glycosylation end product，AGE）增多，聚集損傷血管內膜，促進單核細胞和淋巴細胞向受損內皮趨化，加重內皮細胞損傷，促進血管收縮，血液當中的有害物質如血脂、血小板等沉積在血管內壁上，導致管腔變窄［10］。②糖尿病患者血糖增加導致細胞能量代謝紊亂，破壞內皮細胞，血小板在受損內皮上黏附，聚集增加［11］，血栓形成，結果導致冠狀動脈粥樣硬化發生和發展加速。③冠心病的獨立危險因素如高血壓、高TG血癥、低HDL等，也導致冠心病的發生發展。

Gas6屬于維生素K依賴蛋白家族成員，參與炎癥反應，動脈粥樣硬化和糖尿病的發生發展［12，13］。亦有學者認為Gas6同CRP一樣也可能是一種急性時相反應蛋白，在腦梗死、腦出血和AMI急性期反應性增高［14］。Saller等［15］研究指出Gas 6在人及小鼠動脈粥樣硬化斑塊中的內皮細胞、平滑肌細胞和巨噬細胞中表達，Gas6參與凋亡細胞的吞噬作用，在細胞凋亡增加時表達有所上調，在炎癥發生時Gas6合成可明顯增加［16，17］，這些機制都可能與Gas6參與炎癥反應進而導致動脈粥樣硬化和糖尿病有關。有研究表明Gas6還參與了泡沫細胞的形成及增殖，泡沫細胞形成是動脈粥樣硬化形成和發展中的早期變化［18］，大量泡沫細胞聚集形成動脈粥樣硬化斑塊。

我們用ELISE法檢測冠心病患者和冠心病合并2型糖尿病患者血清中Gas6的含量，發現其濃度較健康體檢者明顯增高，冠心病患者含量為278.57 ±6.61pg／ml，冠心病伴2型糖尿病組含量為285.66±6.37pg／ml，健康對照組Gas6的含量為227.61±7.28pg／ml，差異有統計學意義（P＜0.01）。冠心病伴2型糖尿病組較冠心病組Gas6水平升高（P＜0.05）。

國內關于Gas6與動脈粥樣硬化的報道很少，國外亦有類似報道。我們的研究發現在冠心病患者中Gas6水平較正常對照是升高的，這點與唐開放［14］的研究是一致的。

在選取的120例冠心病伴2型糖尿病組中，對其冠脈造影結果進行分組后比較Gas6濃度水平，得出的結論是病變支數越多，其Gas6水平越高（P＜0.05）。其原因可能如前所述，冠心病伴2型糖尿病患者動脈內皮損傷嚴重，管腔狹窄，病變支數多，炎癥程度加重。

本研究顯示，Gas6在冠心病伴2型糖尿病發生發展過程中起著重要作用，檢測冠心病伴2型糖尿病患者Gas6水平對病情的發生發展及治療效果監測有著重要臨床意義，可作為臨床冠心病伴2型糖尿病組常規檢測項目來應用于臨床。

［1］Li J J.Inflammation an important mechanism for different clinical entities of coronary artery disease［J］.Chin Med J，2005，118（21）：1817.

［2］Libby P.Inflammation in atherosclerosis［J］.Nature，2002，420（6917）：868.

［3］呂樹錚，王立新.糖尿病合并冠心病流行病學現狀與研究進展［J］.中華老年心腦血管病雜志，2009，11（12）：910.

［4］King GL.The role of inflammatory cytokines in diabetes and its complications［J］.J Periodontol，2008，79（8）：1527.

［5］Li ZZ.Liu JB，Li L，et al.Intensive therapy for diabetes through influence on innate immune system［J］.Med Hypotheses，2009，72（6）：675.

［6］孫余華，裵衛東.炎癥與動脈粥樣硬化基礎和臨床研究的新進展［J］.中國循環雜志，2003，18（3）：232.

［7］Bertoni AG，Burke GL，Owusu JA，et al.Inflammation and the incidence of type 2diabetes：the Multi－Ethnic Study of Atherosclerosis（MESA）［J］.Diabetes Care，2010，33（4）：804.

［8］Lee HJ，Her SH，Im YS，et al.Significance of inflammatiory markers in diabetic patients with stable coronary artery disease［J］.Korean J Intern Med，2009，24（3）：212.

［9］汪小萍，王 青.合并糖尿病的冠心病患者冠狀動脈病變特點［J］.臨床醫學，2009，4（27）：103.

［10］Kriszbacher I，Koppan M，Bodis J.Inflammation，atherosclerosis，and coronary artery disease［J］.N Engl J Med，2005，353（4）：429.

［11］Falcone C，Nespoli，Geroli D，et al.Silent myocardial ischemia in diabetic and non－diabetic patients with coronary artery disease［J］.Cardiol，2003，90（2－3）：219.

［12］Sandrine Laurance，Catherine A.Lemarié，Mark D.Blostein.Growth Arrest－Specific Gene 6（gas6）and Vascular Hemostasis［J］.Adv Nutr，2012，3（2）：196.

［13］Hung YJ，Lee CH，Chu NF，et al.Plasma protein Growth arrestspecific 8Levels are associated with altered glucose tolerance，Inflammation，and endothelial dysfunction［J］.Diabetes Care，2010，33：1840.

［14］唐開放，潘學誼.血漿Gas 6水平及其基因多態性與腦梗死和腦出血的相關性研究［J］.血栓與止血學，2012，18（1）：9.

［15］Saller F，Burnier L，Schapira M，et al.Role of the growth arrestspecific gene 6（gas6）product in thrombus stabilization［J］.Blood Cells Mol Dis，2006，36（3）：373.

［16］Ekman C，Gottsater A，Lindblad B，et al.Plasma concentrations of Gas6and soluble Axl correlate with disease and predict mortality in patients with critical limb ischemia［J］.Clin Biochem，2010，43（10－11）：873.

［17］Ekman C，Site DF，GottsaterA，et al.Plasma concentrations of growth arrest specific protein 6and the soluble form of its tyrosine kinase receptor Axl as markers of large abdominal aortic aneurysms［J］.Clin Biochem，2010，43（1－2）：110.

［18］Tjwa M，Moons L，Lutgens E.Pleiotropic role of growth arrestspecific gene 6in atherosclerosis［J］.Curr Opin Lipidol，2009，20（5）：386.

The clinical significance of Gas6 in conronary heart disease complicated with type 2 diabetes mellitus

CHEN Xin，CHEN Jie，JIANG Bing，et al.（Department of Clinical Laboratory，Wuhan NO.1 Hospital，Wuhan 430022，China）

Objective To study the change of growth arrest－specific gene 6（Gas 6）in serum of coronary heart disease combined with type 2diabetes mellitus，and clinical significance.Methods We have selected 120cases of patients with coronary heartdisease（CHD）out of the in－part patients in cardiovascular department as the coronary heart disease group，and 120cases of patients with coronary heart disease combined with type 2diabetes mellitus（CHD＋T2DM）as

Gas 6；coronary heart disease；type 2diabetes mellitus；inflammatory factor

R541.4；R587.1

Acoronary heart disease combined with type 2diabetes mellitus group，80healthy people were selected as controls.Serum levels of Gas6were determined by an enzyme－linked immunosorbent assay（ELISA）kit，FBG，HbAlc，triglyceride（TG），high density lipoprotein（HDL），low density lipoprotein（LDL），hs－CRP，homocysteine（Hcy）were detected and the data were statistically analyzed.Results ELISA adopted to detect the content of Gas 6in the healthy group was 227.61±3.28pg／ml，in CHD group was 278.57±1.61pg／ml and in CHD＋T2DM group was 285.66±2.37pg／ml，in CHD group and CHD＋T2DM group are significantly higher than the control group，CHD＋T2DM group are significantly higher than the CHD group，and the data has statistically significant（P＜0.05）.The more the amount of coronary stenosis is，the higher level of Gas 6is（P＜0.05）.Conclusion The concentraction of growth arrest－specific gene 6（Gas 6）in serum of coronary heart disease combined with type 2diabetes mellitus increased evidently and rise with the increase in the number of coronary stenosis，Gas 6reaction was closely associated with coronary heart disease combined with type 2diabetes mellitus.

陳馨（1983－），女，檢驗醫師，研究方向：臨床分子檢驗。

2014－10－14）

1007－4287（2015）06－0896－04

國家自然科學基金資助項目（81170035）；武漢市衛生局科研課題（WX12C29）；武漢市衛生局科研課題（WX14D02）

＊通訊作者