外周血基質金屬蛋白酶－9（MMP－9）和血管內皮生長因子檢測在子宮肌瘤早期診斷中的應用研究

劉文博，陳玲玲，曹麗娟

（承德市中心醫院婦產科，河北承德067000）

外周血基質金屬蛋白酶－9（MMP－9）和血管內皮生長因子檢測在子宮肌瘤早期診斷中的應用研究

劉文博，陳玲玲，曹麗娟＊

（承德市中心醫院婦產科，河北承德067000）

子宮肌瘤屬于良性腫瘤，在女性生殖器中極其常見，可導致月經過多等異常出血。據調查，在子宮肌瘤患者中有40%會伴隨異常子宮出血現象。當前臨床認為子宮異常出血關聯于子宮內膜微環境出現改變，進而導致月經紊亂?？刂圃陆浶璞ＷC凝血與血管收縮功能的正常發揮，同時還與月經后子宮內膜重建時的血管形成有關。VEGF屬于強效調節因子，可促進血管形成；而基質金屬蛋白酶（MMP－9）密切關聯于子宮腫瘤的生長與發展。本文為探討MMP－9與VEGF診斷子宮肌瘤的臨床價值，現回顧性分析40例患者的臨床資料，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2013年5月至2014年5月收治的子宮肌瘤患者40例作為研究對象，設為觀察組，年齡在39至54歲，平均（46.3±3.1）歲。患者均表現出經期延長、經量增加、下腹部疼痛、有硬塊等癥狀，而后經超聲、病理檢查后確診。選取同期在我院體檢的健康婦女40例設為對照組，年齡為37至52歲，平均（43.7±3.5）歲，排除患有婦科疾病患者。使用B超對兩組子宮內膜予以檢測，結合厚度、孕酮以及血清雌二醇分為分泌期與增生期。本組排除標準：高血壓、惡性腫瘤、糖尿病、心臟病、肝腎功能與血尿功能異常以及近期服用激素類藥物患者。

1.2 檢測方法［1］

主要采用免疫組織化學染色法對VEGF與MMP－9予以檢測，需使用VEGF、MMP－9、單克隆鼠抗與SP試劑盒，具體步驟如下：連續切片厚石蠟，為4μm，準備3張，開展VEGF與MMP－9以及蘇木素－伊紅染色；按照常規法行脫蠟與水化處理，PBS沖洗，持續3次，5min／次；經由微波爐開展抗原修復處理，行VEGF染色；在3張切片中均使用過氧化酶，并于室溫開展孵育，時間持續10min， PBS沖洗，持續3次，5min／次，再加入非免疫血清10%，同樣孵育10min，再將多余液體去掉，添加50 μl第一抗體，孵育60min后按照上述次數與步驟行PBS沖洗，而后再添加第二抗體，有生物素標記，孵育10minPBS沖洗。最后行DBA顯色處理，蘇木素復染后給予脫水處理，使用中性樹膠予以封片。

1.3 觀察指標

分別在增生期與分泌期兩個階段檢測兩組患者VEFG水平與MMP－9水平，進行組間對比。

1.4 統計學方法

采取統計學軟件SPSS19.0對匯總數據進行分析和處理。計量資料采?。ā纒）表示，組間數據對比采取t檢驗；計數資料采取率（%）表示，組間率對比采取χ2檢驗；對比以P＜0.05為有顯著性差異和統計學意義。

2 結果

2.1 兩組增生期與分泌期VEFG水平對比

見表1。

表1 兩組增生期與分泌期VEFG水平對比（±s，pg／ml）

表1 兩組增生期與分泌期VEFG水平對比（±s，pg／ml）

n 分泌期增生期觀察組40 214.27±30.53 195.37±26.41對照組40 128.12±25.23 51.49±9.25 t 6.877 17.027 P 0.0000.000

2.2 兩組增生期與分泌期MMP－9水平對比見表2。

表2 兩組增生期與分泌期MMP－9水平對比（±s，ng／mL）

表2 兩組增生期與分泌期MMP－9水平對比（±s，ng／mL）

n 分泌期增生期觀察組40 290.69±33.78 236.78±30.91對照組40 131.53±15.38 106.65±16.76 t 13.561 11.721 P 0.0000.000

3 討論

在中年婦女中子宮肌瘤發病率較高，臨床經統計后發現約為25%。該病初期癥狀不明顯，隨著病情惡化會誘發盆腔疼痛與月經不調等癥狀，若病情嚴重還會導致急性扭轉。臨床多認為雌激素為子宮肌瘤發病的基本因素，該病發展離不開雌激素持續作用與肌瘤組織中雌激素受體的高表達。隨著臨床對子宮肌瘤研究的逐漸深入，發現肌瘤組織中VEFG與MMPS家族存在異常表達，且在促進子宮肌瘤病情發展中發揮重要作用。

VEFG為肝素結合性雙價糖蛋白，其表達密切關聯于生長因子、細胞因子、局部氧濃度以及激素等，且機體中諸多生長因子與細胞因子在對VEFG表達進行調節時會發揮其間接作用，加快血管與抗血管的生成［2］。人體子宮內膜中會表達出VEFG，同時其變化具有周期性，在分泌晚期其表達強度會達到高峰。若在子宮肌瘤增生過長子宮內膜表達中出現VEFG減少現象，則會致使血管結構出現不良現象，進而誘發子宮異常出血。而子宮肌瘤患者在分泌期與增生期其VEFG會出現上升現象，致使微血管生成更多，導致異常子宮出血［3］。在本研究中，觀察組相較于對照組其分泌期（t＝6.877、P＝0.000）與增生期（t＝17.027、P＝0.000）的VEFG顯著高于對照組，對比差異有統計學意義（P＜0.05）。

MMPS是蛋白水解酶家族，其中含有Ca2＋與Zn2＋，成員在17個以上［4，5］。依據作用底物的差別可分為四類，其中MMP－9為IV型膠原酶，作用在于對基底膜與其結締組織等ECM予以降解，主要是對存在于基底膜中的巢蛋白予以分解。在惡性或者正常腫瘤MMP－9均有所表達［6，7］。在VEFG于 MMP－9的共同作用下會形成新生血管，并對基底膜造成破壞，為腫瘤生長、浸潤以及轉移創造了優良環境。在本研究中觀察組相較于對照組其分泌期（t＝13.561、P＝0.000）與增生期（t＝11.721、P＝0.000）的MMP－9顯著高于對照組，對比差異有統計學意義（P＜0.05）。

綜上所述，在子宮肌瘤患者中若VEFG與MMPS水平存在異常則提示子宮肌瘤發生或者在逐漸惡化，故而可將其作為判斷標準，以盡早診斷子宮肌瘤［8］。

［1］王志偉.FGFR－2和MMP－9在膀胱移行細胞癌中的表達及臨床意義［D］.天津醫科大學，2013.

［2］申麗媛.WAVE1、MMP－2及MMP－9在上皮性卵巢癌中的表達及其臨床意義［D］.重慶醫科大學，2013.

［3］周少飛.乳頭狀甲狀腺癌患者外周血中MMP－2、MMP－9、TIMP－1、TIMP－2的研究［D］.山東大學，2013.

［4］李慧敏，李一雷，宋雪霏.人子宮頸癌組織中MMP－26、MMP－9和TIMP－4的表達及其意義［J］.吉林大學學報（醫學版），2010，02（14）：354，433.

［5］蘇書娟，邢魯奇，陳登庭，等.MMP－2、MMP－9在乳腺導管癌中表達及意義［J］.中國公共衛生，2011，3（21）：268.

［6］Wormald PJ.The agger nasi cell：the key to understanding the anatomy of the frontal recess［J］.Otolaryngol Head Neck Surg，2011，129：497.

［7］Choi BI，Lee HJ，Han JK，et al.Detection of hypervascular nodular hepatocellur carcinomas：value of triphasic helical CT compared with iodized oil CT［J］.AJR，2010，157（2）：219.

［8］Khan MA，Combs CS，Brunt EM，et al.Positron emission tomography scanning in the evaluation of hepatocellular carcinoma［J］.Ann Nucl Med，2009，14（2）：121.

劉文博（1982－），女，副主治醫師，研究方向：婦科腫瘤。

2014－12－08）

1007－4287（2015）06－0983－02

＊通訊作者