食品和公共場所從業人員致瀉性大腸埃希菌攜帶情況分析

鄧艷華

(新建縣疾病預防控制中心檢驗科，江西 南昌330100)

大腸埃希菌(Escherichia coli)，是腸道正常菌群的重要成員之一，主要寄居于人和動物的腸道內。少數大腸埃希菌具有致病性，可引起機體腸道感染和腸道外感染兩大類疾病，并可以通過食物、水源等方式傳播，從而暴發疫情[1]。自1982年大腸埃希菌在美國感染暴發以來，包括中國等許多國家都發現致瀉性大腸埃希菌(Enterovirulent E.coli)，歐洲、加拿大及日本等國家近年來也暴發數起因食物污染該菌導致的疫情[2]，如1991年加拿大西北部地區的O157:H7型大腸埃希菌的暴發流行[3]和2011年德國發生的O104:H4型大腸埃希菌的暴發流行[4]。致瀉性大腸埃希菌主要分為5類，即腸侵襲性大腸埃希菌(Enteroinvasive E.coli，EIEC)、腸致病性大腸埃希菌 (Enteropathogenic E.coli EPEC)、腸產毒性大腸桿菌(Enterotoxigenic E.coli，ETEC)、腸聚集性大腸桿菌 (Enteroaggregative E.coli，EAEC)、腸出血性大腸埃希菌(Enterohemorrhagic E.coli，EHEC)[5]。為了解新建縣食品和公共場所從業人員致瀉性大腸埃希菌的攜帶情況，2013年4月至2014年12月對新建縣食品和公共場所從業人員的肛拭子標本在做常規預防性健康體檢項目同時進行致瀉性大腸埃希菌的檢測和分析。

1 材料與方法

1.1 標本來源 2013年4月至2014年12月新建縣食品和公共場所從業人員的常規預防性健康體檢項目的肛拭子標本，共收集到標本3032例。

1.2 儀器和試劑

1.2.1 儀器 LRH-150型生化培養箱 (上海一恒科技有限公司)；E200 型生物顯微鏡(日本 NIKON)；BHC-130ⅡA/B型生物潔凈安全柜 (江蘇蘇州凈化設備有限公司)；ATB全自動微生物鑒定系統 (法國梅里埃)；ABI7300實時熒光PCR系統(美國應用生物系統)。

1.2.2 試劑 培養基由青島高科園海博生物制品有限公司提供。ID32E生化鑒定反應板由法國梅里埃提供。診斷血清為寧波天潤生物有限公司生產，均在有效期內使用。熒光PCR試劑盒由深圳市生科源技術有限公司提供。

1.3 檢測方法 按照GB17012-1997感染性腹瀉診斷標準和處理原則[6]、GB4789.6－2003致瀉性大腸埃希菌檢測方法[7]將采集的肛拭子標本放入GN肉湯中，立即送達實驗室進行36℃±1℃培養過夜。將GN肉湯培養物接種到EMB和SS平板培養基，36℃±1℃培養18～24h，挑取可疑致瀉性大腸埃希菌菌落接種三糖鐵瓊脂斜面，然后再選擇可疑的菌落進行玻片血清凝集鑒定、接種至ID32E生化鑒定反應板進行生物化學鑒定。將上述檢測出的疑似陽性菌株保存到BHI甘油肉湯中送至南昌市疾病預防控制中心進行復核鑒定(血清學鑒定和分子生物學鑒定)。1.4統計學分析 采用SPSS19.0統計分析軟件，定性資料率的比較用χ2檢驗，結果分析以P＜0.05有統計學意義。

2 結果

2.1 食品從業人員和公共場所從業人員的致瀉性大腸埃希菌的檢出結果 見表1。

表1 食品從業人員和公共場所從業人員的致瀉性大腸埃希菌的檢出率

2.2 食品和公共場所從業人員的沙門菌、志賀菌與致瀉性大腸埃希菌的檢出率 見表2。

表2 沙門菌、志賀菌及致瀉性大腸埃希菌的檢出率

2.3 致瀉性大腸埃希菌的血清型 從3032例標本中共檢出致瀉性大腸埃希菌12株，檢出率為3.96‰。其中腸侵襲性大腸埃希菌(EIEC)7株，占2.30‰，檢出血清型別有O112:K66 4株,O144:K?2株,O143:K?1株;腸致病性大腸埃希菌 (EPEC)5株，占1.65‰，檢出血清型別有055:K59 2株，O44:K74、O125:K70、O26:K60各1株。檢出的致瀉性大腸埃希菌有腸侵襲性大腸埃希菌和腸致病性大腸埃希菌，而未檢出其他致瀉性大腸埃希菌。

2.4 致瀉性大腸埃希菌的毒力基因檢測 對12株致瀉性的大腸埃希菌用熒光PCR進行致病性大腸埃希菌(eae和bfp基因)和侵襲性大腸埃希菌(ipaH基因)的測定[8]，其中1株致病性大腸埃希菌檢出eae基因，1株致病性大腸埃希菌檢出bfp基因，1株侵襲性大腸埃希菌ipaH基因。

3 討論

大腸埃希菌是國際公認的衛生監測指示菌，以食物傳播為主要傳播途徑，且致瀉性埃希菌可以通過傳播而暴發疫情[9]。近年來由該菌引起的食源性疾病在世界范圍內呈上升趨勢[10],在中國各類致瀉性大腸埃希菌在食物中毒中也占有重要比例,其引起的散發病例亦有發生[11]。我市也發生過由于廚師攜帶侵襲性大腸埃希菌而引起的食物中毒事件[12]。調查結果顯示，致瀉性大腸埃希菌的攜帶人群中食品從業人員高于公共場所從業人員,并且攜帶毒力基因的3株致瀉性大腸埃希菌都來源于食品從業人員，這些人可能對所接觸的食品造成污染,因此加強對食品從業人員的監管是防止引起食源性食物中毒事件的必要手段。掌握食品和公共場所從業人員的致瀉性大腸埃希菌的攜帶情況，對預防和控制腹瀉病病原，尤其是食源性食物中毒方面起到重要的預警作用。按照《中華人民共和國食品安全法》、《公共場所衛生管理條例》、《預防性健康檢查管理辦法》規定，食品和公共場所從業人員預防性健康體檢中主要檢查病毒性肝炎、痢疾、傷寒、活動性肺結核和皮膚病等，腸道致病菌做沙門菌和志賀菌檢測，而沒有致瀉性大腸埃希菌檢測。調查結果顯示致瀉性大腸埃希菌的檢出率(3.96‰)明顯高于沙門菌的檢出率(0.99‰)及志賀菌的檢出率(0.66‰)，且有顯著統計學意義。此結果表明在食品從業人員的健康檢查項目腸道致病菌檢測中增加致瀉性大腸埃希菌的檢測具有一定的可行性，為預防和控制腹瀉病病原及食源性食物中毒等有重要意義。

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