光學顯微鏡在尿紅細胞形態檢查中的應用價值

薛白，李靖，王奔放

(江蘇護理職業學院檢驗藥學系，江蘇 淮安223300)

血尿是泌尿系統疾病最常見的臨床表現之一。血尿來源的確定對于疾病的臨床治療有著較為重要的意義。鑒別血尿來源的方法有很多，國內相繼使用相差顯微鏡[1]、掃描電鏡、血細胞分析儀、全自動尿沉渣分析儀、普通光鏡(染色或不染色)[2]等。這些方法通過對尿紅細胞形態的檢查，幫助我們鑒別血尿的來源，主要包括腎小球源性血尿和非腎小球源性血尿。

目前應用相差顯微鏡或聯合全自動尿沉渣分析儀觀察血尿中紅細胞形態來鑒別血尿來源己有較多研究[3]，而普通光學顯微鏡由于其使用方便、成本低等特點也逐漸受到各醫院，特別是基層醫院的青睞。但就使用普通光學顯微鏡來檢查尿紅細胞形態，進而對血尿的定位診斷價值仍存有爭議。本實驗室通過在普通光學顯微鏡下確定血尿診斷的敏感性和特異性，從而對普通光鏡檢測血尿來源的可行性提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2014年3-7月筆者所在醫院門診及病房泌尿科患者183例新鮮中段尿液樣本，其中男98例，女85例，年齡6～75歲。102例經臨床病史、實驗室檢查、B超、靜脈腎盂造影、膀胱鏡、CT、和(或)腎活檢等，證實為腎小球病變．其中急慢性腎小球腎炎87例、狼瘡性腎炎5例、腎囊腫3例、腎病綜合征7例；另81例行泌尿系造影或膀胱鏡或B超檢查等，確診為非腎小球病變，其中腎結石42例、輸尿管結石14例、膀胱癌9例、尿路感染16例。

1.2 方法

1.2.1 設備儀器選用 Olympus顯微鏡、改良牛鮑計數板、刻度離心管、離心機等。

1.2.2 操作方法 取患者清晨新鮮中段尿液20 ml，注入一次性刻度離心管中立即送檢，1500 r/min離心5 min，棄去上清液，留0.2 ml尿沉渣，輕輕混勻后取1滴充入牛鮑計數板中，用普通光學顯微鏡觀察尿中紅細胞形態，記錄尿紅細胞數、畸形紅細胞數及紅細胞畸形率。

1.3 尿紅細胞形態判斷標準

1.3.1正常尿紅細胞形態 紅細胞形態較為完整，膜光滑，血紅蛋白充盈好，胞體大小基本正常。常見的形態有：(1)正常紅細胞大小形態與外周血正常紅細胞相似，呈雙面凹圓盤狀；(2)球形紅細胞胞體正常或偏小，表面光滑呈球形；(3)淡影樣紅細胞扁平腫脹，直徑較大，表面光滑，血紅蛋白含量減少或消失；(4)桑葚形紅細胞呈皺縮球形[4]。

1.3.2 畸形尿紅細胞形態 紅細胞膜有缺損，血紅蛋白多逸出，細胞形態大小差異明顯。常見的形態有：(1)芽孢狀，細胞質外伸，細胞膜外凸，帶有1個或多個芽孢；(2)線狀，紅細胞呈線形甚至扭曲折疊；(3)炸面包卷樣，紅細胞膜呈明顯的內外兩圈、四周肥厚、形似炸面包卷；(4)串珠樣，紅細胞膜下致密顆粒狀沉淀；(5)酵母樣：紅細胞固縮呈酵母菌樣；(6)戒形、靶形紅細胞；(7)膜缺損紅細胞：紅細胞膜不完整，部分血紅蛋白丟失；(8)膜穿孔樣紅細胞：細胞質有空白亮點；(9)碎片狀，紅細胞碎裂成片狀或碎屑。以上參照黃鋒先等[5]，李雪峰和王厚照[6]尿紅細胞形態分類方法。

1.4 血尿判斷標準 尿中紅細胞＞8000個/ml。腎小球性血尿：尿畸形紅細胞類型在2種以上(非均一性血尿)，且占紅細胞總數＞70%[7]；非腎小球性血尿：尿中大部分為正常紅細胞或異常細胞種類不超過2種(均一性血尿)，畸形細胞＜30%；混合型血尿：為上述兩種血尿的混合，尿中畸形紅細胞數＞30%，但＜70%，胞體大小差異明顯，且有血紅蛋白逸出。

1.5 統計學處理 采用SPSS 13.0進行數據統計，計數資料采用卡方檢驗，P<0.05具有統計學意義。

2 結果

腎小球性血尿與非腎小球性血尿中畸形紅細胞含量見表1，以出現非均一性形態計算紅細胞畸形率；從中得出，光鏡下尿畸形紅細胞對診斷腎小球性血尿敏感性為87.3%，特異性為82.7%；兩組尿畸形紅細胞含量(%)組間比較P=0.00<0.05，結果差別有統計學意義。

表1 183例腎性和非腎性血尿患者普通光鏡觀察紅細胞形態統計(n)

3 討論

尿液中紅細胞數量增多，超過8000個/ml一般提示泌尿系統疾病，并且常伴隨著紅細胞形態異常，其形成原因有很多。尿液主要由血液經過腎臟時，經腎小球濾過膜濾過，大部分水和一些小分子物質進入腎臟而形成。當腎小球濾過膜發生病變，孔徑變大時，血液中的紅細胞也進入腎臟，同時又受到腎小球濾過膜的擠壓變形，從而表現出多種畸形狀紅細胞，呈現形態的不均一性。除此以外，紅細胞形態也會受尿液中酸堿度和滲透壓值的影響。在堿性、高滲尿中紅細胞皺縮變形；在酸性、低滲尿中紅細胞脹大甚至破裂成影紅細胞或面包圈樣[8]。在非腎小球性血尿中，由于不存在腎小球濾過膜病變的前提，紅細胞形態一般不發生改變，即使有尿pH和滲透濃度的影響，也是呈現均一性的形態改變。

在本文一共183例標本中，利用普通光學顯微鏡診斷腎小球源性血尿的敏感性是87.3%，與國內用相差顯微鏡診斷腎源性血尿的臨床數據敏感性[3]相近；而特異性是82.7%，與相關文獻報道有些差異[9]，可能原因是標本收集后放置時間過久或離心時間過長等，從而出現皺縮或脹大的同時伴隨著裂片紅等形態；也有可能是科室工作人員在細胞形態觀察上相對經驗缺乏等。本文中腎性和非腎性紅細胞形態畸形率P<0.05，提示在腎源性血尿診斷上，腎小球源性紅細胞畸形率明顯高于非腎小球源性，與相關文獻報道基本一致[10]。說明將普通光學顯微鏡應用在尿紅細胞形態鑒別上，從而幫助臨床進行血尿的腎源性鑒別是可行的，并有較大的臨床應用價值。同時普通光鏡相比相差顯微鏡等儀器，成本較低，更易于在基層醫院檢驗科普及使用。但由于普通光學顯微鏡在細胞形態表現的清晰度上確是沒有相差顯微鏡高，這也要求檢測者具有較強的細胞形態辨認能力。同時，為提高結果準確性，也可以聯合尿化學檢測結果或病人臨床資料，從而做出更為正確的診斷。

[1]李樹平,劉文東.相差顯微鏡檢查腎小球性血尿的診斷標準評價[J].實驗與檢驗醫學,2010,28(3):301-302.

[2]王平平,馬文.普通光鏡檢查尿紅細胞形態在血尿來源診斷中的價值[J].國際檢驗醫學雜志,2012,33(23):20-21.

[3]肖笑,葉任高,蔣文功.尿紅細胞位相顯微鏡檢查診斷腎小球性血尿的臨床評估[J].中國中西醫結合腎病雜志,2004,5(3):32.

[4]范金斌.血尿紅細胞形態及其分類在臨床應用中的價值[J].實驗與檢驗醫學,2011,29(6):645-646.

[5]黃鋒先,董秀清,葉任高,等.普通光鏡對血尿定位診斷的評價[J].中華腎臟病雜志,1996,12(2):104-105.

[6]李雪峰,王厚照.尿紅細胞形態鑒別血尿來源的應用價值探討[J].醫學論壇雜志,2010,31(14):35-36.

[7]劉成玉,羅春麗.臨床檢驗基礎[M].北京:人民衛生出版社,2013:170.

[8]從玉隆,馬駿龍.幾種檢側尿紅細胞方法的價值與互補關系[J].中華檢驗醫學雜志2002,25(5):263-264.

[9]許艷茹.光鏡下尿紅細胞形態檢查在血尿診斷中的應用價值[J].國際檢驗醫學雜志,2012,33(10):21-22.

[10]盧新兆,黃曉華.尿中紅細胞形態在腎小球腎炎診斷中的應用價值[J].檢驗醫學與臨床,2011,8(16):27.