四種血吸蟲病檢測方法在傳播控制地區病情監測中的對比觀察

佘有彬

(南京市六合區疾病預防控制中心，江蘇 南京211500)

南京市六合區位于長江下游北岸，地型自南向北漸升高，南部多河網，是江灘型的血吸蟲病流行區。經過50多年的積極防治，全區于2009年達到了血吸蟲病傳播控制標準[1，2]。為掌握達標后血吸蟲病疫情變化，在該區東溝鎮大河口村設一個血吸蟲病防治監測點，在2012年的病情監測中，我們采用免疫學檢測(ELISA、DDIA)和病原學檢測(Kato-Katz法糞檢、糞便集卵孵化)4種診斷方法[3]，對583例受檢對象的血液和糞便樣本進行對比檢測觀察，就4種診斷方法的敏感性、特異度及其相互間的關聯性進行了分析，結果如下。

1 材料與方法

1.1 人群的選擇 2012年10-11月，選擇六合區東溝鎮大河口村6周歲以上(含6周歲)常住居民共583人為檢測對象。

1.2 儀器設備 檢測使用的設備有：Wellsccan MK3型自動酶標儀、Wellsccan MK3型自動洗板機 、電熱恒溫培養箱(HH、BII、420)、光照培養箱(LRH-250-G)、 可調移液器 (0~200μl)、 三角燒瓶、Kato-Katz定量板、Olympus顯微鏡等

1.3 檢測方法 采用ELISA和DDIA法檢測待測血清中抗體，ELISA法是一種特殊的試劑分析方法,在免疫酶技術的基礎上發展起來的一種新型的免疫測定技術[4]，使用上海市寄生蟲病防治研究所生產的試劑盒，DDIA法采用無錫賽德科技開發有限公司生產的試劑盒。

采用尼龍絹集卵孵化法(3送3檢)和改良加藤法(kato-katz法，1送3檢)檢測毛蚴和蟲卵。

免疫學檢測和病原學檢測的操作要求參見 《中華人民共和國衛生行業標準 血吸蟲病診斷標準(WS261-2006)，附錄 B 和附錄 C》。

2 結果

2.1 血清學與病原學檢測結果 對583例受檢對象的血液和糞便檢測結果為，ELISA法、DDIA法、集卵孵化法、Kato-Katz陽性率分別為3.26%(19/583)，3.43%(20/583)，0.34%(2/583)和 0.34%(2/583)，由此可見血清學檢測方法的陽性率與當地居民抗體水平有關。

2.2 集卵孵化法與Kato-Katz法的比較 結果見表1，一致性檢驗顯示集卵孵化法與改良加藤法的檢測方法敏感度完全一致(Kappa=1.0)。

表1 集卵孵化法與改良加藤法的檢測結果

2.3 ELISA法與DDIA法的比較 結果見表2，一致性檢驗顯示ELISA法與DDIA法的檢測方法敏感性一致程度相當滿意(Kappa=1.0)。

表2 ELISA法與DDIA法的檢測結果

3 討論

在大規模血吸蟲病防治中連續多年的擴大化療和預防服藥必然使血吸蟲的排卵及卵的孵化收到抑制[5]，導致病原學檢測的檢出率低。本文結果顯示：集卵孵化法與Kato-Katz法兩者一致性檢驗能有相當滿意的一致程度，但孵化法在現場大規模使用很困難、成本高、需花費大量的人力、物力，而Kato-Katz法操作比較簡單、省工省力等，現場大規模病原學查病中，Kato-Katz法的適用性優于孵化法。

ELISA與DDIA都有較高的檢出率，一致性檢驗能有相當滿意的一致程度，ELISA法在檢測過程中費時、需要專用儀器設備、操作煩瑣，而DDIA法省時、不需儀器設備、操作簡單、判斷直觀[6]。所以在現場免疫學查病方法DDIA法優于ELISA法。按全國血吸蟲病綜合治理重點項目查病化療技術方案開展現場工作時，免疫學檢測的特異性都不夠理想，且抗體檢測難以區分過去感染(包括經化療治愈者)與現癥感染，檢測陽性不一定是反映出現癥病人，其診斷價值有限。所以本文認為在現場查病時，用免疫學檢測方法過篩后，陽性者再用病原學檢測方法確定體內有無活蟲存在，效果會更好。

[1]雷正龍,鄭浩,張利娟,等.2010年全國血吸蟲病疫情通報[J].中國血吸蟲病雜志,2011,2(6):599-604.

[2]梁幼生,黃軼昕,洪清標,等.江蘇省實現血吸蟲病傳播控制的新策略與新技術[J].中國血吸蟲病防治雜志,2012,24(2):119-122.

[3]中國人民共和國衛生行業標準WS261-2006.血吸蟲病診斷標準[S],2006:附錄 B,附錄 C.

[4]譚立明.ELISA法檢測的影響因素及其對策[J].實驗與檢驗醫學,2013,31(4):300-305.

[5]祝紅慶,曹淳力,王強,等.山丘型流行區血吸蟲感染者人數低估原因探討[J].中國血吸蟲病雜志,2006,18(3):214-216.

[6]孫樂平,黃軼昕,洪清標,等.膠體染料試紙條試驗在血吸蟲病大規模現場查病中應用價值的評價 [J].中國血吸蟲病防治雜志,2004,16(6):426-431.