原子吸收分光光度法測定多烯磷脂酰膽堿中砷鹽含量

丘文嘉，張玉英

(廣東省廣州市藥品檢驗所，廣東 廣州 510160)

磷脂酰膽堿(PC)是生命的基礎物質，多烯磷脂酰膽堿可作為藥物制劑的輔料，又能治療肝炎、脂肪肝、高血壓等疾病，廣泛應用于生物醫藥行業。我國生產的多烯磷脂酰膽堿注射劑的原料長期依賴進口，除企業標準外，目前暫無相應的國家標準檢驗方法。砷作為一種有毒元素[1]，在藥品、食品、化妝品標準中均有限量規定。由于多烯磷脂酰膽堿在生產工藝中可能引入砷鹽[2]，筆者參考2010年版《中國藥典(二部)》附錄中的砷鹽檢查法，對該品種的企業標準進行復核，發現相關方法干擾性強[3－7]，不適用于本品的砷鹽測定，故創新性地增加了原子吸收分光光度法進行試驗[8]，旨在為該品種國家標準的制訂和完善提供依據，現報道如下。

1 儀器與試藥

Thermo－3500型原子吸收分光光度計(熱電公司);WHG－102A2型流動注射氫化物發生器(北京瀚時制作所);砷空心陰極燈(北京曙光明電子光源儀器有限公司);電子天平(梅特勒公司)。As國家標準溶液(1 000 μg/mL，國家鋼鐵材料測試中心鋼鐵研究總院，GSBG62028－90，批號為13070982);樣品3批(某公司委托檢驗樣品，批號分別為2120001，2120002，2120003);水為去離子水，其余試劑均為分析純。16%碘化鉀(KI)－10%抗壞血酸溶液(稱取碘化鉀16 g，抗壞血酸10 g，溶于100 mL水)，1%硼氫化鈉－0.3%氫氧化鈉溶液(將1 g氫氧化鈉用0.3%氫氧化鈉溶液溶解，混勻即得)，臨用前配制。

2 方法與結果

2.1 儀器最佳工作條件

載氣:氬氣;載氣壓力:0.25 MPa;載氣流速:200 mL/min;測量時間:20 s;加熱電壓:140 V;載液:1%鹽酸溶液。在此條件下，原子分光光度吸收圖譜見圖1。

圖1 原子分光光度吸收圖譜

2.2 溶液制備

對照品溶液:精密量取砷單元素標準溶液(As 1 000 μg/mL)1 mL，置100 mL容量瓶中，加1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取1 mL，置100 mL容量瓶中，加1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，即得砷標準貯備液(100 ng/mL)。精密量取砷標準貯備液 0，1.0，2.0，5.0，7.0，10.0 mL，分別置 50 mL 容量瓶中，加入16%KI－10%抗壞血酸溶液5 mL，用1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度(標準曲線溶液質量濃度為 0，2.0，4.0，10.0，14.0，20.0 ng/mL)，搖勻，放置 2 h，測定。供試品溶液:取本品約 0.5 g，精密稱定，置100 mL碘瓶中，加硝酸10 mL、硫酸2 mL，靜置過夜;加入2～3粒碎磁片(已經硝酸浸泡并清洗干凈)，于瓶口加小漏斗，置電爐上加熱至出現黑色時，滴加高氯酸至溶液變清(約加6～8 mL)，放冷至室溫;用1 mol/L鹽酸溶液轉移至25 mL容量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置25 mL容量瓶中，加16%KI－10%抗壞血酸溶液2.0 mL，用1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，混勻，放置2 h，測定。同法制備空白溶液，進樣測定。

2.3 方法學考察

線性關系考察:以1%硼氫化鈉－0.3%氫氧化鈉為還原劑，1%鹽酸溶液為載液，吸取對照品溶液進入氫化物發生器，在193.7 nm波長處進樣測定，記錄吸光度值。以峰高(Y)為縱坐標、質量濃度(X)為橫坐標進行線性回歸，得回歸方程 Y=0.031 67 X+0.038 0，r=0.999 4。結果表明，As的質量濃度在2.0～20.0 ng/mL范圍內與吸光度線性關系良好。

檢出限測定:按2.2項下方法，取標準空白溶液重復進樣11次，測定，由公式 DL=3 Sb/K計算檢出限，其中 K為標準曲線斜率，Sb為11次空白標準溶液測定偏差。該方法的檢出限為0.226 ng/mL。

精密度試驗:取標準曲線范圍內的砷(20 ng/mL)對照品溶液，重復進樣7次，測定吸光度。結果平均吸光度值為0.641 2，RSD為0.56%(n=7)，表明儀器精密度良好。

重復性試驗:取同一批樣品(批號為2120001)，按2.2項下方法制備供試品溶液，依法重復進樣6次。結果As平均含量為0.12 mg/kg，RSD 為 1.54%(n=6)，表明方法重復性良好。

穩定性試驗:取質量濃度為20 ng/mL的對照品溶液，分別于0，2，4，12 h 時進樣測定吸光度。結果的 RSD 為 0.71%(n=4)，均未超過5.00%，可見對照品溶液在12 h內穩定。

加樣回收試驗:本研究中進行了高、中、低3種質量濃度的加樣回收試驗，結果見表1。

表1 砷的加樣回收試驗結果(n=9)

2.4 樣品含量測定

稱取一定量樣品，按2.2項下方法消解后進樣測定。結果批號為2120001，2120002，2120003的樣品中砷的含量分別為0.12，0.11，0.10 mg/kg。

3 討論

本研究中采用硝酸鎂法、過氧化氫法、直接炭化法按2010年版《中國藥典(二部)》附錄ⅧJ第二法對樣品進行砷鹽檢查，結果經硝酸鎂法處理后的供試品溶液加標準品溶液的監控管顏色淺于標準管顏色;經氧化氫法處理后標準品溶液管顏色淺于供試品溶液管顏色;直接炭化法中，供試品溶液管顏色淺于標準品溶液管顏色，且標準品溶液管顏色淺于供試品溶液加標準品溶液管，但供試品溶液消化不完全。因此，本品不宜采用2010年版《中國藥典(二部)》附錄中砷鹽檢查法檢查。

本試驗結果表明，原子吸收分光光度法測定多烯磷脂酰膽堿中砷鹽的含量，其檢出限、精密度、加標回收率、穩定性等指標均較好，且試驗過程簡便，測試專屬性強，適用于多烯磷脂酰膽堿中砷的控制。

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