尿NGAL在原發性高血壓腎損傷中的臨床應用*

陳世豪 張偉堅 李珍瑤 李亮

隨著人口老齡化的進程加速，原發性高血壓發病人數和發病率逐年增加，由此帶來的并發癥也增多，而早期的腎損害十分常見，高血壓腎?。℉N）已成為糖尿病外造成終末期腎?。‥SRD）的第二大原因[1]。尋找特異和敏感的標志物有助于早期的診斷和評估治療，EH患者腎小管功能損害多先于腎小球功能損害，近年來中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白（NGAL）作為腎小管損傷的標志物逐漸受到重視，被認為是最有應用前景的腎損傷標志物之一[2-3]。本研究通過對尿NGAL水平的檢測，探討其與EH腎損傷的程度的關系，同時評估其相關性，從而對早期EH腎損傷患者進行有效干預。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年1-10月在本院心內科住院的已確診為原發性高血壓（EH組）患者65例，入選對象均符合我國2010年制定的高血壓防治指南中對高血壓的診斷標準[4]，排除繼發性高血壓、自身免疫性疾病、肝腎異常、糖尿病、惡性腫瘤等，并簽署知情同意書。入選患者至少兩周內未接受降壓藥及治療腎損傷藥物，其中男35例，女30例，年齡42~80歲，平均（56.3±7.2）歲。根據尿白蛋白排泄率（UAER）標準分為三組，正常白蛋白尿（NA組， UAER<30 mg/24 h）23例，微量白蛋白尿（MA組，UAER介于30~300 mg/24 h）27例，臨床白蛋白尿（CN組，UAER>300 mg/24 h）15例，另隨機選取本院體檢中心健康人群25例為對照組，其中男13例，女12例，平均年齡（53.3±6.3）歲。各組年齡和性別比較差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 研究對象空腹12 h后，采集肝素鋰抗凝靜脈血4.0 mL，留取晨尿10 mL。以2000×g離心5 min分離血清以及尿液上清液，檢測標本于-70 ℃凍存。另外病患組以甲苯防腐留取24 h尿量，并記錄尿量。

1.2.2 NGAL、CysC、UAER和肌酐的檢測 NGAL和CysC采用免疫透射乳膠凝聚法檢測，肌酐采用速率法，NGAL試劑盒購自武漢生之源公司，CysC試劑購自北京利德曼公司，其他檢測項目均為羅氏原裝試劑盒，檢測項目均用羅氏800全自動分析系統進行檢測。

根據Cockroff-Gault公式計算GFRCcr（mL/min）=[（140-年 齡 ）× 體 重（kg）×（0.85女 性 ）/72×Scr（mg/dl）]；UAER=UmAlb（mg/L）×24 h 尿總量（L）。

1.3 統計學處理 所有數據均使用SPSS 13.0軟件進行統計分析，正態分布的計量資料比較采用t檢驗，非正態分布定量資料比較采用非參數秩和檢驗M，組間差異比較采用Kruskal-Wallis H檢驗；NGAL與eGFR和CysC相關性分析采用Pearson相關性分析，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 EH組和對照組尿NGAL、eGFR、CysC水平比較 EH組患者尿NGAL、CysC水平較對照組高，而eGFR水平較對照組低，比較差異均有統計學意義（P<0.01）。見表1。

表1 EH組和對照組尿NGAL、eGFR、CysC水平比較

2.2 尿NGAL與UAER、eGFR和CysC的關系 尿NGAL在NA組中為83.6（63.7~111.2）ng/mL，在MA組中為137.3（93.7~163.8）ng/mL，在CN組為271.2（236.6~336.9）ng/mL，三組比較差異有明顯統計學意義（H=31.021，P<0.01）。與NA組比較，MA、CN組尿NGAL濃度明顯升高，比較差異有統計學意義（P<0.01）。

Pearson相關性分析顯示，EH患者尿NGAL與eGFR呈負相關（r=-0.729，P<0.01），與血清CysC呈正相關（r=0.773，P<0.01）。見圖1和2。

圖1 尿NGAL與eGFR水平相關性分析

圖2 尿NGAL與血清CysC水平相關性分析

3 討論

高血壓腎損傷是原發性高血壓常見的并發癥，占老年人腎功能不全發病原因的第一位[5]，作為金標準的腎活組織檢查帶有損傷性而不能用于常規檢查，早期診斷腎損傷以及判斷腎功能改變的程度對于防止病變為終末期腎病有重大意義。NGAL是在激活的人中性粒細胞中發現的相對分子量為25 000的分泌性蛋白，是lipocalin家族的成員，尿液NGAL主要源于腎小管受到損傷刺激后由腎小管上皮大量分泌[2-3]，高血壓患者腎小管功能損害多先于腎小球功能損害尿NGAL變化能有效反映腎小管損傷程度。有研究表明，尿NGAL在急性和慢性期等疾病導致腎損傷中已明顯升高[6-8]；且有報道顯示NGAL可先于肌酐、CysC等腎損傷標志物發生改變，是最具有應用前景的早期腎損傷標志物[9-10]。

長期高血壓引起的小動脈硬化病變可以遍及全身，但以腎臟最明顯，其病變則出現蛋白尿，早期一般是輕到中度，且通常無明顯臨床癥狀。本研究證實了尿NGAL水平與UAER嚴重程度密切相關，由于高血壓患者動脈結構和功能的改變是心腦腎等各重要器官損害的基礎，過高的血壓會引起腎臟的進行性損傷，所以檢測尿NGAL水平明顯升高，說明病情越重，腎功能損傷程度越顯著。臨床上對微量白蛋白的檢測通常收集24 h的尿液進行測定，由于測定時間間隔較長，樣本容易受到外界因素影響，從而導致測定結果受到干擾[11]。筆者測定NGAL僅留取晨尿或者隨機尿，能很好地避免這種不良因素。尿NGAL與eGFR相關性分析中，尿NGAL與eGFR呈負相關，eGFR越低，尿NGAL水平越高。作為腎小管損傷的早期標志物，由于臨床上慢性腎臟病常把GFR作為分期的依據，檢測尿NGAL有利于對腎損傷程度進行分層。

本研究結果顯示，在尿NGAL與血清CysC相關性分析中，兩者呈明顯的正相關，而CysC是研究認為檢測腎小球濾過功能的理想的內源性指標，不受年齡、性別、肌肉量、飲食、炎癥、膽紅素、溶血、腫瘤及三酰甘油等因素的影響[12]，反映腎功能的靈敏度和特異性都優于受腎外影響的尿素氮、肌酐等指標，因而被作為評價GFR新的敏感指標。國內劉紅春等[13]研究認為聯合血肌酐和CysC方程評估GFR在慢性腎臟?。–KD）不同階段內的計算結果比單一估算較為準確，由此為筆者在今后研究提供方向，收集更廣泛病例數據研究CKD打下基礎。同時在既往研究已證明CysC是不良預后的強的預測因子，被認為是心血管疾病的危險因素的指標[14]。由此說明NGAL與CysC同樣具有反映腎損傷穩定性的特點，對心腦血管的危險發生有一定的預警作用。然而當前國內外對NGAL研究較多反映出對于急慢性腎損傷中先于CysC發生變化，如有研究顯示在糖尿病腎損傷中血清NGAL診斷效能高于血清CysC[15]。但本研究由于實驗局限，對血清和尿NGAL、CysC等指標單一和聯合應用診斷效能在今后研究再進一步評價。

目前，NGAL檢測已研究推廣免疫比濁法應用于大型全自動生化分析儀，適合大批量標本操作，方法靈敏重復性好，應用于日常檢測對于早期原發性高血壓患者早期腎損害的診斷以及病程的進展能有積極的意義。

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