雞嗉子葉揮發油成分的GC-MS分析

孫 晶,谷林茂,謝小燕,李桂香

(1.曲靖醫學高等專科學校 藥學系，云南 曲靖 655000；2.云南中醫學院 藥學院，云南 昆明 650200)

雞嗉子葉揮發油成分的GC-MS分析

孫 晶1,谷林茂1,謝小燕2,李桂香1

(1.曲靖醫學高等專科學校 藥學系，云南 曲靖 655000；2.云南中醫學院 藥學院，云南 昆明 650200)

利用水蒸氣蒸餾法提取雞嗉子葉的揮發性成分，采用氣相色譜-質譜聯用(GC-MS)技術對其化學成分進行分離分析，并用色譜峰面積歸一化法測定各成分的相對含量.通過計算機檢索，鑒定出51個化學成分，其中主要成分為5,6,7,8,9,10-六氫-6,7,8,9-四氧合-2-吩嗪甲酸(17.357%)、十八醛(11.042%)、2-氟代-N-[2-(2-糠基氨基)-乙氧羰基]苯甲酰胺(9.371%)、二十烷(6.970%)、1-甲基-5硝基吡唑(4.589%)、β-紫羅蘭酮(2.441%)、10-甲基二十烷(3.463%)、乙酸橙花叔醇酯(2.058%).

雞嗉子； 揮發油； 氣相色譜-質譜聯用

雞 嗉 子 (Dendrobenthamiacapitata(Wall.)Hutch.) 是山茱萸科四照花屬植物，又稱頭狀四照花、野荔枝、山覆盆.在我國主要分布于廣西、云南、貴州、四川、西藏、浙江、湖南等地[1].雞嗉子為藥、食兩用樹種，果實營養豐富，味甜可生食，亦可釀酒、制醋；雞嗉子的葉、 花、 果均可入藥.雞嗉子葉是彝族常用藥， 臨床應用已久，有清熱解毒、利水消腫、消積殺蟲的功效，可治小兒疳積、蟲積腹痛、肝炎、腹水等癥，外用可治水火燙傷、外傷出血等癥[2].目前，關于雞嗉子的研究多集中在栽培技術上，作為民間常用草藥，雞嗉子的藥用和食用研究很少.僅有少量相關文獻報道雞嗉子葉中含有黃酮、 三萜、環烯醚萜、 甾醇、多酚和有機酸等化學成分[3-4]，而雞嗉子葉揮發性成分的組成、含量尚未見報道.為系統地了解雞嗉子葉的化學成分，文中用水蒸氣蒸餾方法提取雞嗉子葉的揮發油成分，采用GC-MS聯用手段分離、鑒定其中含有的化合物，并利用氣相色譜峰面積歸一化法確定各成分相對含量，為進一步探究雞嗉子葉有效化學成分及其藥用生物活性提供必要的實驗數據.

1 實驗

1.1 樣品、儀器與試劑

樣品：雞嗉子葉采自云南尋甸鐘靈山，由曲靖醫學高等專科學校中藥學老師李桂香鑒定.

儀器：揮發油提取器；RE52CS-1旋轉蒸發儀；美國Bruker公司SCION SQ氣質聯用儀 .

試劑：無水乙醚、無水硫酸鈉均為分析純.

1.2 揮發油的提取

根據2010版中國藥典附錄XD方法提取揮發油[5].取粉粹后的雞嗉子葉200 g，置于2 000 mL圓底燒瓶中，加水1 600 mL，搖勻浸泡1 h，水蒸氣蒸餾6 h，至測定器中油量不再增加.冷卻后油層用無水乙醚萃取4次，合并萃取液用無水硫酸鈉干燥過濾，濾液用旋轉蒸發儀回收乙醚.得到有芳香氣味的淡黃色透明油狀雞嗉子葉揮發油，-4 ℃下保存.

1.3 GC-MS條件

GC-MS分析條件考察：由于雞嗉子葉揮發油成分，極性不是很大.在預試驗中,對比采用色譜柱HP-5MS (30 m×0.25 mm×250 μm)，綜合各色譜峰的分離效果、峰個數和穩定性等因素, 發現DB-35柱分離效率較高，因此確定使用DB-35(30 m×0.25 mm×0.25 μm)石英毛細管柱.取雞嗉子葉揮發油供試液,對升溫程序進行考察.柱初始溫度為50 ℃，以2 ℃/min不同升溫程序升至150 ℃，再分別以3 ℃/min不同升溫程序升至300 ℃進行考察.結果顯示以第1次程序升溫為5 ℃/min，第2次程序升溫為8 ℃/min時各主要成分色譜峰的分離效果較好.最終確定升溫程序為：色譜柱初始溫度50 ℃，以5 ℃/min升至150 ℃,再以8 ℃/min升至300 ℃.其他實驗參數均參照相關文獻[6-8].

氣相色譜條件：色譜柱：DB-35毛細管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm)；載氣為氦氣；升溫程序：初始溫度50 ℃，5 ℃/min升至150 ℃，再以8 ℃/min升至300 ℃，保持20 min.進樣口溫度：250 ℃.進樣量：1μL，分流進樣，分流比為20∶1；溶劑延遲：3 min.

質譜條件：EI源，180 ℃，電子電壓：70 eV，傳輸線溫度：250 ℃，質量范圍(m/z)：45～550，譜庫：NIST2011.

2 結果與分析

運用氣相色譜-質譜聯用手段對雞嗉子葉揮發性成分進行了分析，經過計算機質譜數據系統檢索(NIST庫)，同時結合有關質譜圖文獻解析以及保留時間，鑒定了51個化合物，占提取物總量的92.218%，總離子流圖(見圖1).按峰面積歸一化法計算揮發油中各成分的相對百分含量，結果見表1.

表1 雞嗉子葉揮發油中化學成分

(續表)

編號保留時間/min化合物名稱分子式相對百分含量/%1010 3甲基紫羅蘭酮C13H20O0 0981110 44亞丁基二環己烷C16H300 2541210 512，6，10，14-四甲基十七烷C21H440 1731310 772-異丙基-5-甲基環己基-4-甲基苯磺酸C17H26O3S0 2571411 1古巴烯C15H241 0821511 351-甲基氯乙酸庚酯C10H19O2Cl0 1461611 81溴癸烷C10H21Br0 2931711 96石竹烯C15H240 7311812 05畢澄茄烯C15H240 1181912 19大馬士酮0 3022012 63α-紫羅蘭酮C13H20O0 3152112 73香葉基丙酮C13H22O0 7382212 86(Z，E)-3，7，11-三甲基-1，3，6，10-十二碳四烯C15H242 0512313 1依蘭油烯C15H240 8542413 39(+)-δ-杜松烯C15H240 5762513 5β-紫羅蘭酮C13H20O2 4412613 68(2Z，6E)-3，7，11-三甲基-2，6，10-十二碳三烯-1-醇C15H26O0 9022713 8乙酸橙花叔醇酯C17H28O22 0582814 191-(2-異亞丙基環丙基)-4-甲基苯C13H160 7472914 32十五醛C15H30O1 4053014 463-(2-戊烯)-1，2，4-環戊三酮C10H12O31 4763114 71，3，3-三甲基-2-(2-甲基-環丙基)環己烯C13H220 243214 79順-7，10，13-十六碳三烯醛C16H26O0 6913314 95反-9-十六碳烯-1-醇C16H32O0 4453415 14蓽澄茄油烯醇C15H26O0 863515 41杜松醇C15H26O0 6393615 47十八醛C18H36O11 0423715 6摩勒醇C15H26O0 7223816 01十四酸C14H28O20 6493916 66，10，14-三甲基-2-十五烷酮C18H36O1 7364017 412，6，10，14-四甲基十七烷C21H441 6314117 87(9Z，12Z，15Z)-9，12，15-十八碳三烯-1-醇C18H32O1 5494218 145，6，7，8，9，10-六氫-6，7，8，9-四氧合-2-吩嗪甲酸C13H6O6N217 3574318 3910-甲基二十烷C21H443 4634418 83(2E，6E，10E)-3，7，11，15-四甲基-2，6，10，14-十六碳四烯-1-醇乙酸酯C22H36O21 6464519 312-氟代-N-[2-(2-糠基氨基)乙氧羰基]苯甲酰胺C14H13O3N2F9 3714619 79(2Z，6E)-3，7，11-三甲基-2，6-十二碳二烯-1-醇C15H28O0 2764720 05順-13，16-二十二碳二烯酸C20H420 344820 27亞麻酸C18H30O21 3754921 05二十烷C20H426 975021 361-溴二十四烷C24H49Br1 615121 461α-(環己基甲基)-4β-乙基環己烷C15H281 99

由表1可知，雞嗉子葉揮發油的成分主要為有機酸類、醛類、醇類、酮類、烯烴類、酯類及其他一些化合物.相對含量較高的成分有5,6,7,8,9,10-六氫-6,7,8,9-四氧合-2-吩嗪甲酸(17.357%)、十八醛(11.042%)、2-氟代-N-[2-(2-糠基氨基)乙氧羰基]苯甲酰胺(9.371%)、二十烷(6.970%)、1-甲基-5-硝基吡唑(4.589%)、β-紫羅蘭酮(2.441%)、10-甲基二十烷(3.463%)、乙酸橙花叔醇酯(2.058%)等.其中十八醛為常用的食品香料，具有椰子型香氣，可用作食品香料以及高級化妝品調香用的香料.橙花叔醇酯作為重要的香料品種，已廣泛應用于日用化工、食品、醫藥等行業.天然吩嗪化合物具有廣譜的抗菌、抑菌活性，不僅對小麥、水稻等農作物的病原菌有顯著作用，還可用于肺結核、白血病、結核桿菌和非典型耐酸桿菌及麻風病等疾病的治療，在醫藥、農業領域越來越受到重視[9].氟代苯甲酰胺衍生物對癌細胞有一定的抑制作用[10].因此雞嗉子葉中含量較多的2種成分，5,6,7,8,9,10-六氫-6,7,8,9-四氧合-2-吩嗪甲酸和2-氟代-N-[2-(2-糠基氨基)-乙氧羰基]苯甲酰胺，其生物活性得進一步探究.β-紫羅蘭酮不僅是一種重要的香料，也是合成維生素A的重要原料，也有研究表明其對癌細胞的發生和發展有明顯地抑制作用[11].

3 結語

采用GC-MS法對雞嗉子葉揮發油的化學成分進行研究，方法靈敏度高，是揮發油分離分析的首選方法.通過對雞嗉子葉揮發性成分含量和有效成分的分析評價，為進一步探究雞嗉子的生物活性成分奠定了基礎，為雞嗉子資源深度開發和綜合利用提供了科學依據.

[1] 中國科學院中國植物志編輯委員會. 中國植物志[M]. 第56卷，北京：科學出版社,1990：100.

[2] 國家中醫藥管理局《中華本草》編委會. 中華本草：5冊[M]. 上海：科學技術出版社，1999：743-744.

[3] 字剛，丁中濤. HPLC法測定雞嗉子葉中3種黃酮苷的含量[J]. 云南中醫中藥雜志， 2011, 32(7)：72-73.

[4] 字剛，楊順麗，何雷，等. 雞嗉子葉化學成分研究[J]. 云南民族大學學報：自然科學版, 2011, 20(6)：443-446.

[5] 中華人民共和國國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典(一部)[S]. 北京：中國醫藥科技出版社, 2010.

[6] 普建新，羊曉東，趙靜峰，等. 藏藥心葉兔兒風揮發油成分分析[J]. 云南大學學報：自然科學版，2004, 26(4)：345-347.

[7] 崔鳳俠，杜義龍，杜曉娟，等. 山楂葉揮發油成分的GC-MS分析[J]. 沈陽藥科大學學報，2014, 31(7)：345-347.

[8] 王曉霞，魏杰，陰耕云，等. 不同方法提取的柚子花的揮發性成分分析[J]. 云南師范大學學報：自然科學版，2013, 33(4)：52-59.

[9] 屈麗，劉宏志，胡洪波，等. 天然吩嗪化合物的生物合成[J]. 中國抗生素雜志，2010, 35(3)：542-545.

[10] 薛偉，鄭玉國，熊壯，等. N-(2-(取代苯并噻唑-2-氨基甲酰基)-取代苯基)-4-氟苯甲酰胺衍生物的合成及生物活性[J]. 合成化學，2012, 30(3)：281-285.

[11] 孫向榮，劉家仁，陳炳卿. β-紫羅蘭酮的生物活性研究進展[J]. 毒理學雜志， 2008, 22(6)：447-481.

(責任編輯 王 琳)

GC-MS analysis of chemical components of the volatile oil fromDendrobenthamiacapitata(Wall.)Hutch

SUN Jing1,GU Lin-mao1,XIE Xiao-yan2，LI Gui-xiang1

(1.Department of Pharmacy,Qujing Medical College,Qujing 655000,China; 2.Department of Pharmacy,Yunnan University of Traditional Chinese Medicine,Kunming 650200,China)

The chemical components of the essential oil in the leaves ofDendrobenthamiacapitata(Wall.)Hutch.were extracted by water stream distillation and analyzed by GC-MS.The relative contents of the chemical components were calculated by the chromatographic peak area normalization method.Fifty-one chemical compounds were identified from the essential oil ofDendrobenthamiacapitata(Wall.)Hutch.The main compounds were 5,6,7,8,9,10-hexahydro-6,7,8,9-tetraoxo-2-phenazinecarboxylicacid(17.357%),octadecanal(11.042%),2-fluoro-N-[2-(2-furfurylamino)-2-oxoethyl]benzamide(9.371%),eicosane(6.970%),1-methyl-5-nitropyrazole(4.589%),β-ionone (2.441%),10-methyl eicosane (3.463%),and nerolidyl acetate(2.058%).

Dendrobenthamiacapitata(Wall.)Hutch.;volatileoil;gas chromatography-mass spectrometry

2015-04-10.

云南省教育廳科學研究基金(2013Y526).

孫晶(1980-)，女，碩士，講師. 主要研究方向：天然產物活性成分分離分析.

R284.2

A

1672-8513(2015)04-0266-04