辛夷芳香性雙四氫呋喃成分研究

李 竣，梅枝意，羅會畏，黃先菊，楊光忠

(中南民族大學 藥學院，武漢 430074)

辛夷芳香性雙四氫呋喃成分研究

李 竣，梅枝意，羅會畏，黃先菊，楊光忠

(中南民族大學 藥學院，武漢 430074)

為闡明辛夷藥材中芳香性雙四氫呋喃化學成分，采用溶劑萃取、高速逆流分段、大孔樹脂和半制備高效液相色譜分離和純化，得到了4個高純度芳香性雙四氫呋喃木脂素單體化合物.通過1H NMR、13C NMR、MS等現代波譜學方法分別鑒定為：松脂醇二甲醚(1)，木蘭脂素(2)，里立脂素B二甲醚(3)，epimagnolin B(4).辛夷芳香性成分的鑒定為其在醫藥、食品工業中的應用提供了更好的理論依據.

辛夷；高速逆流色譜；化學成分；木脂素

辛夷為木蘭科植物望春花、玉蘭或武當玉蘭的干燥花蕾，花蕾緊湊，芳香濃郁，是一種名貴的香料和化工原料[1].作為傳統中藥，它能祛風寒、通鼻竅，可治療風寒頭痛、鼻塞、鼻淵、鼻流濁涕等[2]，因其毒性低、香型優于其他植物，除作為藥用外還可替代人工合成的香料，用于食品加工、日常生活用品和化妝品[3].天然產物的香料以萜類、倍半萜類及其含氧衍生物為主要組成的油狀液體，以氣味和揮發油含量的高低來評價其質量的優劣.辛夷香料常通過水蒸氣蒸餾法、溶劑法和超臨界流體萃取等方法制取揮發油，但水蒸氣蒸餾法提取揮發油成本較低，常破壞揮發油中熱敏性香氣成分，獲得的精油與原植物香氣差異很大，各種萃取方法也常導致揮發油中含有其他脂溶性雜質.

辛夷香料提取物中除萜類成分外，尚含有化學組成不清楚的小分子脂肪族化合物和小分子芳香族化合物[4]，揮發油成分檢測主要通過GC、GC-MS等方法，不能在GC中氣化的脂肪族和芳香族脂溶性雜質則難以被檢測出來.目前對香料組成以外的脂溶性成分和生物活性尚缺乏全面了解，阻礙了辛夷揮發油在醫藥、食品和化妝品生產的使用推廣.為更好地開發辛夷的香料成分，了解辛夷揮發油中脂溶性雜質的組成，本文選擇脂溶性溶劑萃取辛夷揮發油部分，經過半制備高速逆流分段、半制備高效液相分離純化，從辛夷香氣部位中分離得到了4個木脂素成分，分別為松脂醇二甲醚(1)、木蘭脂素(2)、里立脂素B二甲醚(3)、epimagnolin B(4).對辛夷揮發油中其他成分的鑒定也為其香料成分在食品、醫藥工業中的應用提供了更好的理論依據.

1 儀器和材料

1.1 儀器

高速逆流色譜儀(TBE-300B型,上海同田生化技術有限公司)，核磁共振儀(Bruker AM-400、Bruker DRX-500型, 美國Brucker公司)，質譜儀(Micromass ZabSpec MS System, ESI源, 英國Micromass公司)，色譜柱(YMC-Pack ODS-A, 250 mm×10 mm)，色譜儀(Ultimate 3000型, VWD、DAD detector, 美國戴安)，旋轉蒸發儀(RE 52-98型,上海亞榮生化儀器廠)，循環真空泵(SHZ-III型,上海亞榮生化儀器廠)，電子天平(CP214型, 奧豪斯儀器有限公司)，電熱鼓風干燥箱(101-OAB型, 天津市泰斯特儀器有限公司)，三用紫外分析儀(ZF-6型,上海嘉鵬科技有限公司).

1.2 試劑

D101大孔樹脂(三星安徽樹脂科技有限公司)，薄層層析硅膠板(青島海洋化工廠)，HSCCC分離純化、萃取和大孔樹脂分離所用試劑均為分析純(國藥集團化學試劑有限公司)，高效液相所用甲醇、乙腈均為色譜純(Tedia Company, USA)，蒸餾水.

1.3 材料

實驗所用辛夷藥材全部購置于湖北金貴中藥飲片有限公司，經中南民族大學藥學院李竣副教授鑒定為木蘭科木蘭屬玉蘭(MagnoliadenudateDesr.)的干燥花蕾.

2 實驗方法

2.1 辛夷脂溶性部位的提取分離

3.2 kg 辛夷粉末用95%乙醇回流提取3次，每次2 h，抽濾，合并濾液，旋蒸減壓濃縮，得約470 g深棕色浸膏，將浸膏以水混懸，用氯仿萃取，蒸干得浸膏，得氯仿層提取物241 g.取氯仿層浸膏75 g以D101大孔樹脂層析柱分離，50%乙醇上樣，分別用60%、80%和100%乙醇洗脫得到35.83 g和24.24 g的60%和80%乙醇部位為.取500 mg大孔樹脂60%乙醇洗脫組分浸膏，用5 mLφ(正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水)=4∶6∶4∶6 的溶液的下相溶解，制得樣品溶液，將φ(正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水)=4∶6∶4∶6這一溶劑體系的上相(固定相)和下相(流動相)按照1︰1的體積比比例泵入高速逆流色譜儀(HSCCC)的分離管路，待管路完全充滿兩相溶液后，調整轉速至900 r/min(正向旋轉)，同時將作為流動相的下相溶劑以3 mL/min的流速泵入分離管路.大約60 min之后，當兩相溶劑體系達到動態分配平衡時，通過進樣閥注入樣品溶液.整個分離過程的溫度由恒溫循環器控制在25℃.檢測波長為254 nm. HSCCC色譜圖數據從進樣后開始采集，根據色譜圖一次收集各個部分，將270～300 min收集的組分(組分I,見圖1).

圖1 60%大孔樹脂洗脫部位HSCCC分離色譜圖Fig.1 HSCCC chromatogram of 60% macroporous resin elution part

2.2 HPLC制備色譜分離

YMC-Pack ODS-A色譜柱(250 mm×10mm,5μm)，柱溫 40℃，流動相：0～100% 甲醇-水為流動相；梯度洗脫，檢測波長為254 nm，進樣量100 μL，洗脫時間26 min，理論板數按峰計算不低于3000.通過制備HPLC分離(見圖2)，得到4個化合物松脂醇二甲醚1(45.2 mg)，木蘭脂素2 (66.7 mg)，里立脂素B二甲醚3 (15.6 mg)，epimagnolin B 4 (17.4 mg) (見圖3).

圖2 組分I 的HPLC色譜圖Fig.2 HPLC chromatogram of Fraction I

圖3 化合物1～4結構Fig.3 The structures of compound 1～4

3 化合物的結構鑒定

化合物1：松脂醇二甲醚，無色油狀物，ESI-MSm/z：386[M]+，分子式為C22H26O6.1H NMR數據見表1，表中數據與文獻[5]松脂醇二甲醚的數據相符，故鑒定為松脂醇二甲醚.

化合物 2：木蘭脂素，無色油狀物，ESI-MSm/z: 416[M]+，分子式為C23H28O7.1H NMR和13C NMR數據見表1，表中數據與文獻[6]木蘭脂素的數據相符，故鑒定為木蘭脂素.

化合物3： 里立脂素B二甲醚，無色油狀物, ESI-MSm/z：446 [M]+，分子式為C24H30O8.1H NMR數據見表1，以上數據與文獻[7]里立脂素B二甲醚的數據相符，故鑒定為里立脂素B二甲醚.

化合物4：epimagnolin B，無色油狀物，ESI-MSm/z：416[M]+，分子式為C23H28O7.1H NMR，13C NMR數據見表1，以上數據與文獻[8]epimagnolin B的數據相符，故鑒定為epimagnolin B.

4 結語

隨著人們生活質量的提高，綠色的有機的香料正在逐漸受到人們的青睞，從天然產物中提取、研究與開發高效、安全的天然香料，是當今食品添加劑研究領域的熱點之一.同時，運用經典的提取分離方法，篩選出具有較好抗菌效果的中草藥，并解析其化學組成成分，為今后食品添加劑的合理高效應用提供理論依據.食品的防腐保鮮始終是一個亟待解決的重要問題[9]，辛夷揮發油能明顯改善和修飾卷煙香氣, 有降低煙氣的粗糙度、改善吸味、減輕刺激性、去除雜氣的作用[10].

本文從辛夷香料中分離得到4個木脂素類化合物，木脂素類化合物作為一種植物雌激素已引起營養學家、食物化學家和藥物學家的普遍關注，具有調節激素平衡、抗氧化活性、抗腫瘤活性、等多種生物活性[11].

辛夷香料成分中尚有化學組成不清楚的小分子脂肪族、芳香類化合物.揮發油常規的檢測方法GC，GC-MS難以檢測其不揮發的雜質，若不能預知未知雜質的生物活性，則其安全性難以保證.通過HSCCC-HPLC制備的方法能快速檢驗未知成分，具有操作簡單、分離純度高、制備量大等特點，對快速簡單制備未知的天然產物成分具有實際使用價值.

表1 化合物1～4的氫譜和碳譜數據

[1] 程朝暉,龔春暉,金 波,等.辛夷超臨界萃取物的氣相色譜-質譜分析[J].中國食品添加劑， 2003, 3(2):109-111.

[2] 南京中醫藥大學.中藥大辭典(上冊)[M].上海:上?？茖W技術出版社, 2006: 1616-1619.

[3] 趙銘欽. 卷煙調香學 [M]. 北京: 科學出版社,2008.

[4] 湯天曙, 張 鑫, 熊衛東,等. 辛夷揮發油的提取及其化學組分的研究[J]. 精細與專用化學品,1997,18:1-5.

[5] Kakisawa H. Lignans in flower buds ofMagnoliafargesii. [J].Phytochemistry, 1972, 11(7): 2289-2293.

[6] Miyazawa M,Kasahara H,Kameoka H. Phenolic lignans from flower buds ofMagnoliafargesii.[J].Phtochemistry,1992,31(10): 3666-3668.

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[8] Kim J Y,Lim H J,Lee da Y.Invitroanti-inflammatory activity of lignans isolated fromMagnoliafargesii[J]. Bioorg Med Chem Lett,2009,19(3):937-940.

[9] 蔣志國. 抗果蔬致腐真菌中草藥的篩選及有效成分的分析[J].中國食品添加劑,2006(1):151-154,92.

[10] 李 曉,紀曉楠,宋 豪,等. 辛夷再造煙葉對卷煙煙氣成分的影響[J].光譜實驗室,2013,30 (1):238-241.

[11] 李 欣,袁建平,劉 昕,等. 木脂素----一類重要的天然植物[J].中國中藥雜志,2006,31 (24):2021-2025,2089.

Study on the Aromatic Ditetrahydrofuran Constituents fromMagnoliadenudataDesr.

LiJun,MeiZhiyi,LuoHuiwei,HuangXianju,YangGuangzhong

(College of Pharmacy, South-Central University for Nationalities, Wuhan 430074, China)

In order to investigate the ditetrahydrofuran constituents of spicery fromMagnoliadenudataDesr., solvent extraction, high speed counter-current chromatography (HSCCC), macroporous resin and semi-preparative high performance liquid chromatography (HPLC) were used and four highly purified aromatic lignans were obtained. They were identified as pinoresinol dimethy ether (1), magnolin (2), lirioresinol-B dimethyl ether (3) and epimagnolin B (4).The structures of these compounds were elucidated based on the1H NMR,13C NMR,and MS characterization. The identification of these aromatic components ofMagnoliadenudateDesr. provided a theoretical basis for its application in medicine and food industry.

MagnoliadenudateDesr.; high speed counter-current chromatography; chemical composition; lignin

2014-10-08

李 竣(1975-)，男，副教授，博士，研究方向：天然藥物化學成分及質量標準，E-mail：lijun-pharm@hotmail.com

國家自然科學基金資助項目(31000157)，湖北省高等學校優秀中青年科技創新團隊計劃資助項目(T201220)

R284.1

A

1672-4321(2015)03-0037-04