大蒜素對IgA腎病纖維化大鼠腎臟保護(hù)作用的研究

黃燕萍，王 祥，高 娜，趙文靜，孫 艷，馬丹萍，劉 麗

(1.西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院兒科，陜西 西安710061；2.萊州市人民醫(yī)院兒科，山東 萊州261400；3.陜西省人民醫(yī)院，陜西 西安710068；4.西安市中心醫(yī)院，陜西 西安710003)

大蒜素對IgA腎病纖維化大鼠腎臟保護(hù)作用的研究

黃燕萍1，王 祥2，高 娜3，趙文靜4，孫 艷4，馬丹萍1，劉 麗1

(1.西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院兒科，陜西 西安710061；2.萊州市人民醫(yī)院兒科，山東 萊州261400；3.陜西省人民醫(yī)院，陜西 西安710068；4.西安市中心醫(yī)院，陜西 西安710003)

目的 研究大蒜素對IgA腎病腎間質(zhì)纖維化的影響，并探討其可能的腎臟保護(hù)機(jī)制。方法 聯(lián)合IgA腎病模型及單側(cè)輸尿管結(jié)扎的方法建立IgA腎病纖維化的動物模型。將SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組、模型對照組及高、低劑量大蒜素治療組，按各組相應(yīng)藥物劑量灌胃。于干預(yù)前、干預(yù)14天及28天檢測各組大鼠尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、尿素氮水平及血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)含量；并于28天末光鏡下觀察各組大鼠腎臟的病理改變。結(jié)果 與模型對照組相比，高、低劑量大蒜素治療組大鼠尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(模型組-高劑量組，干預(yù)14天/28天，t=1.12/5.58；模型組-低劑量組，干預(yù)14天/28天，t=1.62/7.51)、尿素氮水平、血清TNF-α(模型組-高劑量組，干預(yù)14天/28天，t=3.48/11.95；模型組-低劑量組，干預(yù)14天/28天，t=4.76/12.78)、α-SMA含量(模型組-低劑量組，干預(yù)14天/28天，t=5.38/5.77)均降低(均P<0.05)，腎小球系膜區(qū)IgA沉積強(qiáng)度明顯減輕，腎組織病理纖維化程度亦有所減輕。大蒜素高、低劑量治療組在降低尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(干預(yù)28天，t=1.99)、血清TNF-α(干預(yù)28天，t=3.73)和α-SMA(干預(yù)14天/28天，t=5.60/4.81)水平上差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，以大蒜素低劑量效果稍好。結(jié)論 血清TNF-α和α-SMA在IgA腎病纖維化進(jìn)展中進(jìn)行性增高；大蒜素能夠改善IgA腎病纖維化大鼠的臨床癥狀、減輕腎臟病理學(xué)損害，可能通過降低血清TNF-α和α-SMA水平發(fā)揮抗腎臟纖維化的作用。

IgA腎病；腎間質(zhì)纖維化；腫瘤壞死因子-α；α-平滑肌肌動蛋白

IgA腎病(IgA nephropathy，IgAN)是常見的原發(fā)性腎小球疾病之一，其病理特點(diǎn)是腎小球系膜區(qū)以IgA為主的免疫復(fù)合物沉積，常合并有系膜細(xì)胞增生、基質(zhì)增多的組織學(xué)改變。以往認(rèn)為兒童期發(fā)病者預(yù)后良好，但近年研究發(fā)現(xiàn)在確診后的5～25年內(nèi)，約9%～50%的患者呈進(jìn)行性發(fā)展，不可逆轉(zhuǎn)地進(jìn)展為終末期腎病，而腎間質(zhì)纖維化(renal interstitial fibrosis，RIF)是其主要病理學(xué)特征。

IgA腎病RIF的發(fā)生機(jī)制十分復(fù)雜，其中，多種細(xì)胞因子在腎纖維化中的相互作用越來越得到學(xué)者們的關(guān)注。腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)既往作為炎癥因子被廣泛研究，目前發(fā)現(xiàn)TNF-α能影響多種正常細(xì)胞的生長及分化，并刺激成纖維細(xì)胞的增殖，在組織纖維化的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。α-平滑肌肌動蛋白(alpha smooth muscle actin，α-SMA)是真核細(xì)胞的一種細(xì)胞骨架蛋白，也是肌成纖維細(xì)胞的標(biāo)志性蛋白。Badid等[1]諸多學(xué)者認(rèn)為α-SMA可能是預(yù)測腎臟纖維化進(jìn)展的理想指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)旨在建立IgA腎病纖維化大鼠模型，以TNF-α及α-SMA為實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，研究大蒜素對IgA腎病RIF的影響，并探討其可能的抗腎臟纖維化作用。

1 實(shí)驗(yàn)材料和方法

1.1 動物的選擇

健康、雌性、清潔級SD大鼠32只，鼠齡為6周左右，體重在160～180g，由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。

1.2 藥品與試劑的選擇

大蒜素膠囊(20mg/粒，批號：120607)、牛血清白蛋白(美國Amresco公司)、脂多糖(美國Sigma公司)、正常山羊血清(武漢博士德生物工程有限公司)、兔抗大鼠IgA抗體、異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記山羊抗兔IgG抗體、TNF-α及α-SMA ELISA試劑盒(96T/盒，北京博奧森生物技術(shù)有限公司，批號：120829)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 動物造模

聯(lián)合IgA腎病模型及單側(cè)輸尿管結(jié)扎的方法建立IgA腎病纖維化的動物模型。牛血清白蛋白(400mg/kg)自實(shí)驗(yàn)第1天起，隔日灌胃，持續(xù)9周；四氯化碳(0.1mL/只)自實(shí)驗(yàn)第1周末起，皮下注射，每周1次，持續(xù)9周；脂多糖(0.05mg/只)于實(shí)驗(yàn)第6、8周末，尾靜脈注射。9周末用5%水合氯醛(3mL/kg)腹腔注射麻醉大鼠，沿左側(cè)腹切口(1～2cm)暴露分離左側(cè)輸尿管，結(jié)扎并剪斷輸尿管近腎盂段，縫合切口。術(shù)后常規(guī)予青霉素抗感染治療3天。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)分組及用藥

隨機(jī)選8只作為正常對照組，剩余大鼠進(jìn)行IgA腎病纖維化造模。建模成功后再隨機(jī)分為模型對照組、高劑量大蒜素治療組及低劑量大蒜素治療組，每組8只。其中，正常對照組、模型對照組給予等量生理鹽水灌胃；高、低劑量大蒜素治療組分別給予大蒜素膠囊溶液(60mg/kg)和大蒜素膠囊溶液(40mg/kg)灌胃，每日1次，持續(xù)28天。

1.3.3 標(biāo)本收集

分別于干預(yù)前、干預(yù)14天及干預(yù)28天觀察大鼠的一般情況，收集大鼠尿液、血液以檢測尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、尿素氮水平、血清TNF-α及α-SMA含量。干預(yù)28天末處死大鼠，取腎組織分別做普通光鏡蘇木精-伊紅(HE)染色、三色膠原(Masson)染色及免疫熒光檢查。采用間接免疫熒光法按照國內(nèi)通用標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(5級)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)大鼠的一般情況

正常對照組大鼠一般情況良好，無明顯改變。模型對照組及高、低劑量大蒜素治療組大鼠在造模期間出現(xiàn)毛發(fā)蓬亂、活動量減少、精神萎靡等狀況，大蒜素干預(yù)后兩治療組大鼠上述癥狀較前好轉(zhuǎn)。干預(yù)期間，模型對照組及高劑量大蒜素治療組各死亡大鼠1只，可能與術(shù)后切口感染及眼底靜脈叢采血不當(dāng)有關(guān)。

2.2 血清腫瘤壞死因子-α及α-平滑肌肌動蛋白的變化情況

與正常對照組相比，干預(yù)前、干預(yù)14天、干預(yù)28天，模型對照組及高、低劑量大蒜素治療組大鼠血清TNF-α及α-SMA均明顯升高(均P<0.05)。

①TNF-α：與模型對照組相比，干預(yù)14天及28天時，高、低劑量大蒜素治療組大鼠血清TNF-α均明顯降低，高、低劑量大蒜素治療組均有顯著性差異(均P<0.05)；干預(yù)28天時，高、低劑量大蒜素治療組組間比較有顯著性差異(P<0.05)，低劑量大蒜素治療組降低血清TNF-α效果更明顯(P<0.05)，見表1。

②α-SMA：與模型對照組相比，干預(yù)14天及28天時，高、低劑量大蒜素治療組大鼠血清α-SMA均明顯降低，低劑量大蒜素治療組均有顯著性差異(均P<0.05)，高、低劑量大蒜素治療組組間比較亦有顯著性差異(P<0.05)，低劑量大蒜素治療組降低血清TNF-α效果更明顯(P<0.05)，見表2。

2.3 臨床指標(biāo)變化情況

與正常對照組相比，模型對照組和高、低劑量大蒜素治療組大鼠尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、尿素氮均明顯升高(均P<0.05)。

①尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)：與模型對照組相比，干預(yù)14天及28天時，高、低劑量大蒜素治療組大鼠尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)均明顯降低，高、低劑量大蒜素治療組均有顯著性差異(均P<0.05)；干預(yù)28天時，高、低劑量大蒜素治療組組間比較有顯著性差異(P<0.05)，低劑量大蒜素治療組降低尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)效果更明顯(P<0.05)，見表3。

組別例數(shù)(n)干預(yù)前t干預(yù)14天t干預(yù)28天t正常對照組813.18±3.59 13.57±3.74 13.35±2.65 模型對照組720.40±2.78★2.7447.33±4.43★14.1366.18±2.90★ 47.50高劑量大蒜素治療組719.53.±3.41★2.2339.78±2.90★■16.06/3.4847.49±2.63★■26.43/11.95低劑量大蒜素治療組821.76±1.92★3.6534.14±3.73★■11.02/4.7640.48±3.71★■◆15.12/12.78/3.73F11.7394.93354.64P0.000.000.00

注：★表示與正常對照組比較P<0.05，■表示與模型對照組比較P<0.05，◆表示與高劑量大蒜素治療組比較P<0.05。

表2 血清α-SMA水平變化情況

注：★表示與正常對照組比較P<0.05，■表示與模型對照組比較P<0.05，◆表示與高劑量大蒜素治療組比較P<0.05。

②尿素氮：與模型對照組相比，干預(yù)14天及28天時，高、低劑量大蒜素治療組大鼠尿素氮均降低，高、低劑量大蒜素治療組均無顯著性差異(均P>0.05)，高、低劑量大蒜素治療組組間比較亦無顯著性差異(P>0.05)，見表4。

表3 尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)變化對照情況

注：★表示與正常對照組比較P<0.05，■表示與模型對照組比較P<0.05，◆表示與高劑量大蒜素治療組比較P<0.05。

表4 尿素氮變化對照情況

注：★表示與正常對照組比較P<0.05。

2.4 腎組織病理學(xué)改變情況

2.4.1 蘇木精-伊紅染色

正常對照組大鼠腎小球、腎小管大小形態(tài)正常；模型對照組大鼠腎小球腫脹明顯，彌漫性系膜細(xì)胞及基質(zhì)增生。腎小管萎縮、壞死明顯，可見大量炎癥細(xì)胞浸潤；高、低劑量大蒜素治療組改變類似，但與模型對照組相比，腎小球系膜細(xì)胞及基質(zhì)增生有所緩解，腎小管萎縮塌陷及間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤程度有所減輕。

2.4.2 三色膠原染色

正常對照組大鼠腎間質(zhì)染色較少；模型對照組大鼠腎小管結(jié)構(gòu)破壞明顯，間質(zhì)染色明顯增多，有大量膠原形成；高、低劑量大蒜素治療組改變類似，但與模型對照組相比，藍(lán)色面積染色減少，RIF的程度有所減輕，見圖1。

圖1 干預(yù)28天各組大鼠腎組織HE染色(左圖)與Masson染色(右圖)

Fig.1 Kidney tissues staining by HE(left) and Masson(right) at 28 days after intervention

2.4.3 腎組織IgA免疫熒光改變

正常對照組大鼠腎小球系膜區(qū)未見IgA沉積；模型對照組大鼠腎小球系膜區(qū)可見黃綠色團(tuán)塊狀及顆粒狀的IgA沉積，熒光較強(qiáng)；高、低劑量大蒜素治療組大鼠系膜區(qū)亦有不同程度的IgA沉積，但熒光強(qiáng)度較弱，與模型對照組相比差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但組間比較未見顯著性差異(P>0.05)，見圖2、表5。

圖2 干預(yù)28天各組大鼠IgA沉積情況

Fig.2 IgA deposits of different groups at 28 days after intervention

表5 干預(yù)28天各組大鼠IgA免疫熒光定量

Table 5 IgA immunofluorescence quantitative of different groups at 28 days after intervention

2.5 實(shí)驗(yàn)大鼠各指標(biāo)間的相關(guān)性

血清TNF-α、α-SMA與尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、尿素氮的相關(guān)性：①干預(yù)14天及28天，各組大鼠血清TNF-α與尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)之間有顯著正相關(guān)(均P<0.05)，相關(guān)系數(shù)rs分別為0.66、0.88；回歸方程分別為Y=11.13X-89.07、Y=8.94X-69.31，其中，X為血清TNF-α，Y是尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)；②干預(yù)14天及28天，各組大鼠血清TNF-α與血尿素氮之間有顯著正相關(guān)(均P<0.05)，相關(guān)系數(shù)rs分別為0.73、0.63；回歸方程分別為Y=0.18X+2.93、Y=0.10X+3.42，其中，X為血清TNF-α，Y是血尿素氮；③干預(yù)14天及28天，各組大鼠血清α-SMA與尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)之間有顯著正相關(guān)(均P<0.05)，相關(guān)系數(shù)rs分別為0.61、0.85；回歸方程分別為Y=6.20X-433.93、Y=5.78X-398.77，其中，X為血清α-SMA，Y是尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)；④干預(yù)14天及28天，各組大鼠血清α-SMA與血尿素氮之間有顯著正相關(guān)(均P<0.05)，相關(guān)系數(shù)rs分別為0.56、0.61；回歸方程分別為Y=0.10X-2.09、Y=0.07X-0.71，其中，X為血清α-SMA，Y是血尿素氮。

血清α-SMA與TNF-α的相關(guān)性：干預(yù)14及28天，各組大鼠血清α-SMA與TNF-α之間有顯著正相關(guān)(均P<0.05)，相關(guān)系數(shù)rs分別為0.71、0.86；回歸方程分別為Y=0.50X-24.62、Y=0.60X-31.29，其中，X為血清α-SMA，Y是血清TNF-α。

3 討論

3.1 IgA腎病纖維化大鼠模型的建立

湯穎等[2]運(yùn)用隔日口服牛血清白蛋白、皮下注射四氯化碳及靜脈注射脂多糖的方法，建立了病理類型及臨床指標(biāo)均與人類IgAN頗為相似的動物模型。國內(nèi)已經(jīng)有學(xué)者成功地應(yīng)用IgA腎病模型聯(lián)合高脂飲食建立起IgA腎病血管病變的動物模型[3]以及應(yīng)用IgA腎病模型聯(lián)合單側(cè)腎臟切除的方法建立起IgA腎病腎小球硬化模型[4]。本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛯φ战M大鼠均出現(xiàn)明顯的血尿，伴尿素氮升高。大鼠腎臟病理學(xué)染色提示彌漫性系膜細(xì)胞及基質(zhì)增生，腎小管萎縮、壞死明顯，間質(zhì)纖維化顯著，可見大量炎癥細(xì)胞浸潤。免疫熒光下腎小球系膜區(qū)可見黃綠色I(xiàn)gA沉積，提示IgA腎病纖維化的大鼠模型建立成功。

3.2 大蒜素對IgA腎病纖維化大鼠腎臟保護(hù)作用

細(xì)胞因子調(diào)控失衡是腎組織纖維化的形成和發(fā)展的重要原因之一。TNF-α是一種由多種細(xì)胞產(chǎn)生的具有廣泛生物學(xué)活性的細(xì)胞毒細(xì)胞因子，近年來發(fā)現(xiàn)TNF-α亦可刺激成纖維細(xì)胞增殖，對正常細(xì)胞的生長及分化有一定的調(diào)節(jié)作用，提示TNF-α可能是一種潛在的致纖維化因子。羅小良等[5]在研究大蒜素對脂多糖誘導(dǎo)人牙周膜成纖維細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，大蒜素能抑制牙周膜成纖維細(xì)胞TNF-α的分泌，進(jìn)而促進(jìn)成纖維細(xì)胞的凋亡。核因子-κB(NF-κB)是調(diào)節(jié)細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵因子之一，多項(xiàng)研究顯示TNF-α可激活NF-κB途徑而介導(dǎo)多種炎癥介質(zhì)的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)。張鵬等[6]在研究大蒜素對膿毒癥大鼠腦保護(hù)作用的研究中發(fā)現(xiàn)，大蒜素能降低膿毒癥大鼠腦組織中NF-κB值，進(jìn)而降低膿毒癥大鼠的血糖、谷丙(草)轉(zhuǎn)氨酶及血尿素氮值，其可能的保護(hù)機(jī)制是否通過下調(diào)TNF-α水平而抑制NF-κB在腎組織的表達(dá)，有待后續(xù)的進(jìn)一步研究。

曾玉蘭等[7]在研究大蒜素對博萊霉素復(fù)制大鼠肝纖維化的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，大蒜素能降低肺組織內(nèi)羥脯氨酸的濃度，其可能的保護(hù)作用與下調(diào)轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)的表達(dá)，從而減少成纖維細(xì)胞α-SMA基因的表達(dá)有關(guān)。董正華等[8]在研究糖尿病腎病大鼠模型時發(fā)現(xiàn)，中藥治療組大鼠血清TNF-α水平及腎小管上皮細(xì)胞α-SMA表達(dá)均明顯降低，提示降低TNF-α水平可能會延緩腎小管上皮細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示模型對照組大鼠血清TNF-α、α-SMA水平明顯增高，而大蒜素能夠顯著降低上述指標(biāo)含量，提示大蒜素延緩RIF的作用可能與降低上述兩者的水平而抑制細(xì)胞外基質(zhì)沉積或者抑制腎小管上皮轉(zhuǎn)分化有關(guān)。

α-SMA是肌成纖維細(xì)胞(MF)的標(biāo)志性蛋白，轉(zhuǎn)化后的MF既能大量合成間質(zhì)膠原，又具有強(qiáng)大的收縮能力，引起腎臟結(jié)構(gòu)的重塑，共同促進(jìn)腎臟纖維化的發(fā)生。有研究提示組織中α-SMA的檢測有助于了解腎小球或腎小管間質(zhì)的病損程度，對慢性腎病的長期預(yù)后有一定的預(yù)測意義[9]。既往關(guān)于α-SMA的研究僅涉及腎臟組織中的表達(dá)，而腎臟穿刺作為一種有創(chuàng)檢查，血清中α-SMA的測定更加凸顯出意義。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示模型對照組大鼠血清α-SMA在IgA腎病纖維化進(jìn)展中進(jìn)行性增高，且與尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、尿素氮及TNF-α均呈正線性相關(guān)，提示血清α-SMA測定可能是一種理想的替代物，可作為一種新的纖維化指標(biāo)有助于IgA腎病RIF的診斷。

IgA腎病RIF是一個極其復(fù)雜的病理過程，是在多種致病因子作用下，多種效應(yīng)細(xì)胞、細(xì)胞因子等共同作用的結(jié)果。本實(shí)驗(yàn)只檢測了血清中TNF-α和α-SMA的含量，且關(guān)于血清中α-SMA的來源及去路不甚清楚，因此大蒜素抗RIF的作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

[1]Badid C, Mounier N, Costa A M,etal.Role of myofibroblasts during normal tissue repair and excessive scarring:Interest of their assessment in nephropathies[J].Histol Histopathol,2000,15(1):269-280.

[2]湯穎,婁探奇,成彩聯(lián),等.實(shí)驗(yàn)性IgA腎病模型的改進(jìn)[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào),2006,27(2):184-187.

[3]邵健娜,張建榮.來氟米特對IgA腎病大鼠血管病變的保護(hù)作用[D].新鄉(xiāng):新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文,2012.

[4]黃國東,許健,姜云,等.復(fù)方仙草顆粒對IgA腎病腎小球硬化大鼠TGF-β/Smads信號通路的影響[J].時珍國醫(yī)國藥,2010,21(11):2822-2824.

[5]羅小良,謝曉莉.大蒜素對脂多糖誘導(dǎo)人牙周膜成纖維細(xì)胞凋亡及IL-1β、TNF-α分泌的影響[D].長沙:中南大學(xué)碩士學(xué)位論文,2010.

[6]張鵬,曹農(nóng).大蒜素對膿毒癥大鼠腦保護(hù)機(jī)制的探討[D].蘭州:蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文,2014.

[7]曾玉蘭,冷凡.大蒜素對肺纖維化大鼠肺組織α-SMA和TGF-β1表達(dá)的影響[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2011,21(15):1814-1818.

[8]董正華,趙曉睿,馬拯華,等.通絡(luò)益腎滋陰方對糖尿病腎病大鼠血清TNF-α及腎小管上皮細(xì)胞α-SMA的影響[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥,2009,29(2):58-61.

[9]周瑤,楊林.CKD患者腎組織α-SMA的表達(dá)與頸動脈內(nèi)膜厚度的關(guān)系[D].石家莊:河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文,2014.

[專業(yè)責(zé)任編輯：古桂雄]

Protection function of tumor necrosis factor-α and α-smooth muscle actin in IgA nephropathy fibrosis

HUANG Yan-ping1, WANG Xiang2, GAO Na3, ZHAO Wen-jing4, SUN Yan4, MA Dan-ping1, LIU Li1

(1.DepartmentofPediatrics,TheFirstAffiliatedHospitalofXi’anJiaotongUniversity,ShaanxiXi’an710061,China; 2.DepartmentofPediatrics,LaizhouCityPeople’sHospital,ShandongLaizhou261400,China;3.ShaanxiProvincialPeople’sHospital,ShaanxiXi’an710068,China; 4.CentralHospitalofXi’an,ShaanxiXi’an710003,China)

Objective To study the influence of diallyl trisulfide on IgA nephropathy renal interstitial fibrosis and to explore its possible renal protective mechanism. Methods IgA nephropathy fibrotic model in rats were established in study by combining IgA nephropathy model with unilateral ureteral obstruction. The healthy SD rats were randomly and equally divided into 4 groups: normal control group, model control group, high-dose dially trisulfide (DATS) treatment group and low-dose DATS treatment group. The above groups were lavaged with corresponding drug. The urine and blood of rats were examined for urinary red blood cell count, blood urea nitrogen, TNF-α and α-SMA before intervention, 14 and 28 days after intervention. At the 28th day, all rats were sacrificed and their pathomorphological changes in kidneys were observed by immune fluorescence microscope. Results Compared with model control group, the levels of urine erythrocyte (model control group —high-dose DATS treatment group, at 14/28 days after intervention,t=1.12/5.58; model control group— low-dose DATS treatment group, at 14/28 days after intervention,t=1.62/7.51), blood urea nitrogen, TNF-α (model control group—high-dose DATS treatment group, at 14/28 days after intervention,t=3.48/11.95; model control group —low-dose DATS treatment group, at 14/28 days after intervention,t=4.76/12.78) and α-SMA (model control group—low-dose DATS treatment group, at 14/28 days after intervention,t=5.38/5.77) reduced in both DATS treatment groups. The degree of IgA deposits at glomerular mesangial area and the renal pathological fibrosis relieved in both DATS treatment groups. There were significant differences between high-dose and low-dose DATS treatment groups in reducing the levels of urine erythrocyte (at 28 days after intervention,t=1.99), TNF-α (at 28 days after intervention,t=3.73) and α-SMA (at 14/28 days after intervention,t=5.60/4.81) (allP<0.05). The effect of low-dose DATS treatment was more obvious.Conclusion The levels of TNF-α and α-SMA increase progressively in IgA nephropathy fibrosis developing. The dially trisulfide can relieve the clinical symptoms and pathological damages in IgA nephropathy fibrotic rats, and can prevent the occurrence of renal interstitial fibrosis by reducing the levels of serum TNF-α and α-SMA.

IgA nephropathy (IgAN)；renal interstitial fibrosis (RIF)；tumor necrosis factor-α (TNF-α)；alpha smooth muscle actin (α-SMA)

2014-07-11

黃燕萍(1963-)，女，教授，博士，主要從事小兒腎病的臨床與基礎(chǔ)研究。

10.3969/j.issn.1673-5293.2015.03.007

R392

A

1673-5293(2015)03-0418-05