葉酸聯合辛復寧對人乳頭瘤病毒感染宮頸癌患者血清CRP、HGF、IL-2、TNF-α水平影響研究

賈利剛，張媛，田菲

(河北省人民醫院 婦科，河北 石家莊 050051)

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葉酸聯合辛復寧對人乳頭瘤病毒感染宮頸癌患者血清CRP、HGF、IL-2、TNF-α水平影響研究

賈利剛Δ，張媛，田菲

(河北省人民醫院 婦科，河北 石家莊 050051)

目的 探討葉酸聯合辛復寧對人乳頭瘤病毒感染宮頸癌患者血清C反應蛋白(C reactive protein，CRP)、肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor，HGF)、白細胞介素-2(interleukin-2，IL-2)及腫瘤壞死因子-α(tuumor necrosis factor-α,TNF-α)水平的影響。方法 選取宮頸癌患者80例，隨機分為對照組40例，予常規化療方案；實驗組40例，在常規化療的基礎上加用葉酸及辛復寧，1周為一個療程，治療2個療程。比較2組患者治療前后CRP、HGF、IL-2、TNF-α及T淋巴細胞亞群的變化。結果 與對照組比較，實驗組患者血清CRP、HGF及TNF-α水平較低(P<0.05)，IL-2水平較高(P<0.05)，實驗組CD4+及CD4+/CD8+水平較高(P<0.05)，CD8+水平較低(P<0.05)，臨床總有效率較高(P<0.05)。結論 葉酸聯合辛復寧對宮頸癌患者治療具有重要意義，推測其機制可能為降低人乳頭瘤病毒感染宮頸癌患者血清CRP、HGF水平，升高IL-2水平，調節免疫細胞因子。

葉酸；辛復寧；宮頸癌；C反應蛋白；肝細胞生長因子；白細胞介素-2;腫瘤壞死因子-α

宮頸癌是一種易發于女性的常見惡性腫瘤，在很多國家的發病率占女性生殖器腫瘤的首位，嚴重影響人們的生活質量。病因學研究發現，高危型人乳頭瘤病毒(human papillomavirus， HPV)持續感染是宮頸癌發生的主要因素[1-2]。研究發現C反應蛋白(C reactive protein，CRP)是一種急時相蛋白，宮頸癌患者血清CRP水平升高[3]。肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor，HGF)是一種多肽生長因子，能夠刺激多種類型細胞的增殖、分化、形態變化及侵襲運動，其受體c-Met為原癌基因的表達產物[4]。HGF作用于其受體，形成HGF/c-Met信號通路，其高表達能夠導致腫瘤細胞分裂、增殖。腫瘤的發生發展與機體的免疫狀態密切相關，尤其是T淋巴細胞群及免疫細胞因子可導致機體免疫功能失調。本文通過觀察葉酸聯合辛復寧對高危HPV感染宮頸癌患者血清CRP、HGF及白細胞介素-2(interleukin-2，IL-2)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α， TNF-α)的影響，探究葉酸聯合辛復寧治療高危HPV感染宮頸癌的有效性及作用機制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 病例來源選擇2012年1月～2014年12月于河北省人民醫院婦科以宮頸癌為診斷收入院的患者80例。采用隨機數字表法將患者隨機分為實驗組和對照組。其中實驗組40例，平均年齡(38.47±5.36)歲，平均病程(4.58±0.63)個月，病理類型：鱗癌18例，腺癌12例，腺鱗癌10例；分化程度：低分化21例，中分化11例，高分化8例，IGO分期：Ⅰb2期10例，Ⅱa期10例，Ⅱb期20例。對照組40例，平均年齡(39.54±5.47)歲，平均病程(4.63±0.68)個月，病理類型：鱗癌20例，腺癌11例，腺鱗癌9例；分化程度：低分化21例，中分化10例，高分化9例；FIGO分期：Ⅰb2期11例，Ⅱa期12例，Ⅱb期17例。本研究經本院倫理委員會批準，患者自愿加入研究。

診斷標準：參照《2015年NCCN宮頸癌臨床實踐指南》[5]中宮頸癌的診斷標準而擬定以下納入標準：①經病理組織活檢證實為宮頸癌；②年齡在18～60歲之間；③腫塊直徑>4cm，FIGO分期≤Ⅱb期；④患者身體狀況符合化療條件；⑤患者自愿參與本實驗，并簽署知情同意書。排除標準：①不愿參與本實驗或不符合納入標準者；②合并嚴重的血液系統疾病；③伴有嚴重的肝、腎功能不全者；④伴有嚴重的精神疾病不能配合實驗；⑤對葉酸或辛復寧過敏者。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：對照組采用常規化療方案，其中鱗癌采用紫杉醇與順鉑聯合化療方案；腺癌及腺鱗癌采用環磷酰胺+多柔比星+依托泊甘+順鉑或依托泊甘+順鉑方案，同時水化解毒。14天為一個療程，連續治療2個療程。

實驗組：在常規化療的基礎上，加用葉酸片及辛復寧。予葉酸片(天津力生制藥股份有限公司，國藥準字H12020215)2片，3次/天口服，辛復寧(重組人干擾素α2b陰道泡騰膠囊，上海華新高技術有限公司，國藥準字S20050075)睡前1粒，將藥放到陰道穹窿處，14天為一個療程，連續治療2個療程。

1.2.2 觀察指標及檢測方法：2組患者均在治療前、治療后空腹采集5 mL肘靜脈血，將其裝入預先裝有EDTA的抗凝采血管中，將采血管按3000 r/min離心15 min，待離心結束后將上層血清裝入EP管中，標記分組，然后放入-80 ℃冰箱中保存備用。

① CRP、HGF、IL-2 及TNF-α的測定：本研究采用ELISA法檢測所有研究對象血清中CRP、HGF、IL-2 及TNF-α的濃度水平。試劑盒由武漢博士的生物制劑有限公司提供，SpectraMax i3x 多功能酶標儀由美谷分子儀器(上海)有限公司。具體操作步驟參照試劑盒說明書進行；

② CD4+、CD8+T淋巴細胞亞群的測定：采用放射免疫法監測患者血清中的CD4+、CD8+T淋巴細胞亞群濃度水平，并計算CD4+/CD8+的比值。具體操作步驟參照試劑盒說明書進行；

③ 臨床療效的評價：治療前后分別通過婦科檢查及陰道B超測量腫瘤大小。療效根據WHO標準制定，完全緩解(complete remission，CR)：治療后宮頸腫塊消失，宮頸變軟；部分緩解(partial remission，PR)：治療后宮頸腫塊減小≥50%；無變化(no change，NC)：宮頸腫塊減小<50%或增大≤25%，時間至少持續4周；進展(progress，PD)：宮頸腫塊增大>25%或出現新腫瘤病灶。總有效率(RR)=(CR+PR)/總人數×100%。

2 結果

2.1 2組治療前后血清細胞因子水平比較 治療后，2組血清CRP、HGF及TNF-α水平降低，IL-2水平升高(P<0.05)，與對照組相比，實驗組血清CRP、HGF及TNF-α水平較低，IL-2水平較高(P<0.05)。見表 1。

表1 2組治療前后血清細胞因子水平比較±s)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.2 2組治療前后T淋巴細胞亞群水平比較 治療后，2組患者CD4+及CD4+/CD8+水平升高，CD8+水平降低(P<0.05)，與對照組相比，實驗組CD4+及CD4+/CD8+水平較高，CD8+水平較低(P<0.05)。見表2。

表2 2組治療前后T淋巴細胞亞群水平比較±s)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.3 2組治療前后臨床療效比較 研究顯示，與對照組相比，實驗組總有效率較高(χ2=6.08，P<0.05)。見表3。

表3 2組治療前后臨床療效比較[n(%)]

#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group

3 討論

宮頸癌的發生是一種多因素、多步驟共同作用的結果，WHO世界衛生組織在1992宣布高危HPV感染是宮頸癌發病的首要因素[6]，約90%的宮頸癌患者伴有高危HPV感染。葉酸是B族維生素之一，其在體內經葉酸還原酶作用還原成具有生理活性的四氫葉酸，它是一碳單位轉移酶系的輔酶，能夠傳遞一碳單位。它攜帶一碳單位參與嘌呤和胸腺嘧啶的合成、氨基酸的相互轉換及血紅蛋白的合成。有研究表明，體內葉酸水平與宮頸癌的發病有一定的相關性[7]，體內低葉酸水平能夠增加宮頸癌的患病率。辛復寧是一種重組人干擾素，具有廣譜抗病毒作用。干擾素通過與靶細胞膜上受體結合，激活其抗病毒蛋白基因，抑制病毒DNA的復制和mRNA的轉錄，從而阻斷了HPV病毒的復制過程[8]。可見葉酸聯合辛復寧對治療宮頸癌能夠抑制高危HPV病毒的復制，具有一定的療效。

研究表明，CRP是一種急時期反應蛋白，在宮頸癌患者血清中表達增多。HGF主要由間質細胞產生，是一種多肽類生長因子，具有強烈的促分裂、侵襲及誘發血管形成的作用。研究表明，HGF特異地結合其受體c-Met，激活一系列復雜的傳導通路，在調節腫瘤增殖、侵襲、轉移及血管生成中發揮了重要作用[9]。腫瘤壞死因子(TNF-α)是一種重要的機體免疫防護因子，且參與機體的免疫損傷，生物學作用具有雙重性[10]。白介素2(IL-2)是重要的免疫因子，是反映惡性腫瘤患者細胞免疫功能的重要指標[11]。本研究結果顯示，經治療后，實驗組患者血清CRP、HGF及TNF-α水平較治療前降低，且明顯低于對照組；實驗組IL-2水平較治療前升高，且明顯高于對照組。可見葉酸聯合辛復寧能夠降低高危HPV感染宮頸癌患者血清CRP、HGF及TNF-α水平，提高IL-2水平，這一結果與相關學者的研究一致。其原因可能是葉酸聯合辛復寧能夠抑制腫瘤細胞的復制，調節機體的免疫功能。

免疫細胞因子在腫瘤細胞發生、發展過程中起到調節作用，主要表現為免疫功能低下及細胞免疫功能紊亂[12]。機體的免疫功能與腫瘤的形成及腫瘤患者的預后密切相關。T淋巴細胞亞群是重要的免疫細胞因子，主要包括 CD4+和 CD8+2個亞群，是維持機體免疫功能的基礎。CD4+T細胞可促進免疫細胞的增殖和分化，調節免疫功能；CD8+T細胞抑制B細胞產生免疫抗體，降低機體免疫功能，使機體易受侵襲。本研究結果顯示，治療后2組患者CD4+及CD4+/CD8+水平較治療前升高，且實驗組明顯高于對照組，2組患者CD8+水平較治療前降低，且實驗組明顯低于對照組。可見，葉酸聯合辛復寧能夠升高宮頸癌患者的CD4+T淋巴細胞水平，降低CD8+T淋巴細胞水平，提高機體免疫功能。

腫塊大小及病灶變化是衡量宮頸癌患者臨床療效的重要指標。本研究結果顯示，經治療后，實驗組總有效率為67.50%，明顯高于對照組(P<0.05)。由此可見，在常規化療基礎上加用葉酸聯合辛復寧治療高危HPV感染宮頸癌患者臨床療效較好，但其應用價值仍需要多中心的循證研究。由此可見，葉酸聯合辛復寧能夠提高高危HPV感染宮頸癌患者的臨床療效。

實驗通過對高危HPV感染宮頸癌患者血清CRP、HGF、IL-2、TNF-α及T淋巴細胞亞群等情況進行比較分析，證實了葉酸聯合辛復寧能夠降低高危HPV感染宮頸癌患者血清CRP、HGF水平，升高IL-2水平，調節免疫細胞因子。

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(編校：譚玲)

Effect of folic acid combined with xin funing on CRP,HGF, IL-2,TNF-α of patients with cervical cancer caused by human papillomavirus

JIA Li-gangΔ, ZHANG Yuan, TIAN Fei

(Department of Gynaecology, Hebei People’s Hospital, Shijiazhuang 050051, China)

ObjectiveTo investigate effect of folic acid combined with xin funing on CRP, HGF, IL-2,TNF-α of patients with cervical cancer caused by human papillomavirus.Methods80 cases of cervical cancer patients were randomly divided into control group, 40 cases in the control group were given conventional chemotherapy, 40 cases in the experimental group were on the base of the control with folic acid combined with xin funing.CRP, HGF, TNF-α, IL-2 and T lymphocyte subsets were compared before and after the treatment.ResultsCompared with the control group, the serum CRP, HGF and TNF-αof the experiment group were lower(P< 0.05), IL-2 levels was higher (P<0.05), CD4+and CD4+/CD8+level were higher(P<0.05), level of CD8+was lower(P<0.05) and the clinical effective rate were higher(P< 0.05).ConclusionFolic acid combined with Xin Funing has important significance for the treatment of patients with cervical cancer. It is speculated that the mechanism may be to reduce the level of serum CRP and HGF in patients with cervical cancer, and to increase the level of IL-2, and to regulate immune cells.

folic acid; Xin Funing; cervical cancer; C reactive protein; hepatocyte growth factor;interleukin-2; tumor necrosis factor-α

賈利剛，通信作者，男，碩士，主治醫師，研究方向：婦科宮頸癌篩查與藥物治療，E-mail：jialiganghb@163.com。

R737.33

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1005-1678(2015)10-0096-03