百令膠囊聯(lián)合西黃丸對Ⅲ期乳腺癌患者雌激素受體、基質(zhì)金屬蛋白酶、腫瘤標志物及雌激素的影響研究

周建林，張武坊，楊武森，王興武，李芬

(貴州省貴陽醫(yī)學院附屬黔東南州人民醫(yī)院 普胸外科，貴州 貴陽 556000)

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百令膠囊聯(lián)合西黃丸對Ⅲ期乳腺癌患者雌激素受體、基質(zhì)金屬蛋白酶、腫瘤標志物及雌激素的影響研究

周建林，張武坊，楊武森，王興武，李芬

(貴州省貴陽醫(yī)學院附屬黔東南州人民醫(yī)院 普胸外科，貴州 貴陽 556000)

目的 探討百令膠囊聯(lián)合西黃丸對Ⅲ期乳腺癌患者ER、MMP-9、腫瘤標志物及雌激素影響。方法 選取已確診為Ⅲ期乳腺癌的患者76例，采用隨機數(shù)字表將患者隨機分為實驗組和對照組，對照組予臨床常規(guī)方法治療，實驗組在與對照組相同的臨床常規(guī)方法治療基礎上加用百令膠囊聯(lián)合西黃丸治療，療程8周。觀察2組患者ER、MMP-9、腫瘤標志物及雌激素及生存時間和生活質(zhì)量。結(jié)果 與對照組相比，實驗組患者生存期均長于對照組(P<0.05)；實驗組患者生活質(zhì)量評分高于對照組(P<0.05)，ER、MMP-9、E2、E1水平低于對照組(P<0.05)，血清CA15-3、CA125、CEA表達水平低于對照組(P<0.05)。結(jié)論 百令膠囊聯(lián)合西黃丸能有效降低Ⅲ期乳腺癌患者腫瘤標志物水平，降低ER、MMP-9表達及雌激素水平，延長生存時間、提高生活質(zhì)量，對臨床治療Ⅲ期乳腺癌具有重要意義。

百令膠囊；西黃丸；Ⅲ期乳腺癌；ER；MMP-9；雌激素；腫瘤標志物

乳腺癌(breast cancer)是現(xiàn)代臨床女性較為常發(fā)的惡性腫瘤之一，在部分較大城市其發(fā)病率居所有女性惡性腫瘤首位，是導致女性癌死亡的第一大疾病。流行病學統(tǒng)計顯示，乳腺癌在我國發(fā)病率占全身惡性腫瘤的7%～10%，常發(fā)于40～60歲的婦女，小于35歲的女性較少發(fā)病，近年來其發(fā)病率呈年輕化及升高趨勢[1]。乳腺癌的病因尚不清楚，目前認為雌酮及雌二醇與乳腺癌的發(fā)病有直接關系[2]。Ⅱ、Ⅲ期乳腺癌誘導化療能夠有效防止耐藥細胞株和新轉(zhuǎn)移灶的形成，有效地控制微小轉(zhuǎn)移病變，延長生存期[3]，但也帶來了胃腸道反應以及凝血時間延長等副作用，降低了患者的生存質(zhì)量。

百令膠囊是采用生物工程方法分離的冬蟲夏草菌種經(jīng)低溫發(fā)酵精制而成，含有多種維生素及微量元素,具有補肺腎、益精氣及止咳潤肺的功效[4]，臨床主要用于治療肺腎兩虛引起的咳嗽等，但是也有將百令膠囊應用于治療乳腺癌等惡性腫瘤的報道。西黃丸又名正犀黃丸出自清王洪緒所著《外科證治·全生集卷四》，由牛黃、麝香、乳香、沒藥、黃米飯搗爛為丸,用于治療乳巖、瘰、痰核、流注、肺癰、小腸癰等，具有清熱解毒、活血化瘀、消腫止痛的功效，治療乳巖、痰核、肺癰等疾病的常用方[5]。現(xiàn)代臨床主要將西黃丸用于治療肝癌、乳腺癌等惡性腫瘤疾病。但臨床并無有關于聯(lián)合應用百令膠囊和西黃丸治療乳腺癌的文獻報道。腫瘤標志物是現(xiàn)代臨床主要應用于診斷乳腺癌的指標，也是判斷患者預后是否良好的主要指標，在乳腺癌的診斷和治療中具有重要意義。基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)是一類活性依賴鋅離子的蛋白水解酶，主要牛理功能是降解細胞外基質(zhì)成分[6]，打破了阻礙腫瘤細胞轉(zhuǎn)移的天然屏障，促進腫瘤細胞的增殖。因此，本研究通過觀察百令膠囊聯(lián)合西黃丸對Ⅲ期乳腺癌患者血清雌激素受體(estrogen receptor,ER)、MMP-9、腫瘤標志物及雌激素的影響，來探究百令膠囊聯(lián)合西黃丸治療Ⅲ期乳腺癌患者的療效機制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集貴州省貴陽醫(yī)學院附屬黔東南州人民醫(yī)院2013年5月～2014年12月已確診為Ⅲ期乳腺癌的患者76例，年齡25～75歲。采用隨機數(shù)字表將患者隨機分為實驗組和對照組。實驗組37例，平均(55.83±8.32)歲；對照組39例，平均(56.54±8.83)歲。

納入標準：①診斷符合中國進展期乳腺癌共識指南診斷標準[7]：乳房內(nèi)腫塊，Ⅲ度硬度；腫塊活動性差、表面不光滑、界限不清楚；皮膚顯出凹陷；乳頭常有漿血性液體流出；經(jīng)病理檢驗確診為乳腺癌Ⅲ期。②年齡在25～75歲之間；③自愿參與本實驗，并簽署知情同意書者；④影像、超聲檢查無其他臟器嚴重器質(zhì)性病變者。

排除標準：①伴有嚴重的肝功能、腎功能不全；②合并心肌梗死、心力衰竭、呼吸衰竭、肺心病、嚴重血液系統(tǒng)疾病等嚴重的原發(fā)疾病；③患乙肝、艾滋病等嚴重傳染性疾病者；④入院前尚服用其他治療乳腺癌藥物者；⑤近期服用避孕藥或雌激素藥物者；⑥對本藥組成成分過敏者；⑦患有精神類疾病不能配合者。

1.2 治療方法 實驗組：予百令膠囊(杭州中美華東制藥有限公司，批準文號：國藥準字Z10910036)4粒，1天3次，飯后半小時口服，西黃丸(通化金馬藥業(yè)集團股份有限公司，批準文號：國藥準字Z22023534)3 g，1天2次口服，共治療8周。對照組：嚴格按照2010年《中國乳腺癌臨床指南》中關于晚期乳腺癌的治療標準予以治療：進行NP方案化療，順鉑注射液(錦州九泰藥業(yè)有限責任公司，批準文號：國藥準字H20033936)70 mg/m2，分3 d使用；長春瑞濱注射液(江蘇豪森藥業(yè)股份有限公司，批準文號：國藥準字H20031377)25 mg/(m2·d)，與第1、8天使用，以4周為1個周期進行治療，共化療2個周期。2組患者在治療過程中，如并發(fā)其他臨床癥狀，均予相應的對癥處理。詳細記錄治療過程中2組患者的臨床癥狀及體征的緩解情況。2組患者均在治療前、治療結(jié)束后空腹采集5 mL肘靜脈血，將靜脈血裝入預先裝有EDTA的抗凝采血管中，將采血管按3000 r/min，離心10 min，待離心結(jié)束后將上層血清裝入EP管中，在EP管上標明姓名、組別及日期等，放入-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩Ｒ陨暇杀驹簷z驗科專業(yè)人員負責操作。

1.3 觀察指標及檢測方法

1.3.1 腫瘤標志物檢測方法：本研究采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測所有研究對象血清中癌胚抗原(CEA)、糖類抗原15-3(CA15-3)、糖類抗原125(CA125)等乳腺癌腫瘤標志指標的濃物度水平(試劑盒由鄭州安塞生物科技有限公司提供，其操作方法按照說明書嚴格操作)。以上所有操作均由本院檢驗科專業(yè)人員負責操作。

1.3.2 ER、MMP-9表達檢測方法：患者在治療前后取乳房腫塊標本分別放入液氮冷凍后的研缽中迅速研磨至粉末狀(研磨過程中不斷加入液氮以保證組織低溫狀態(tài))，將粉末放入EP管中，室溫下孵育5 min以使組織完全裂解后，12000r/min條件下冷凍離心15 min取其上清液。一部分上清液行ELISA法測定ER濃度水平，余下上清液行ELISA法測定MMP-9濃度水平(試劑盒由廣東通蔚實業(yè)有限公司提供)，其操作方法完全按照試劑盒說明書嚴格執(zhí)行。

1.3.3 雌激素檢測方法：采用本院檢驗科臨床全自動生化分析儀(OLYMPUSAU5400)檢測血清中雌二醇(E2)和雌酮(E1)水平。

1.3.4 生活質(zhì)量評分：采用Karnofsky評分法評定患者用藥后的生活質(zhì)量。①體力正常，無癥狀和體征為100分；②能進行正常活動，有輕微癥狀和體征為90分；③勉強進行正常活動，有一些癥狀或體征為80分；④生活能自理，但不能維持正常生活和工作為70分；⑤生活能大部分自理，但偶爾需要別人幫助60分；⑥常需要人照料為50分；⑦生活不能自理，需要特別照顧和幫助為40分；⑧生活嚴重不能自理為30分；⑨病重，需要住院和積極的支持治療為20分；病重，瀕臨死亡為10分；⑩死亡為0分。

2 結(jié)果

2.1 2組患者生存時間比較 本研究中，實驗組患者生存期均長于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 2組患者生存時間比較 ±s，月)Tab.1 Comparison of survival time between two groups ±s, month)

#P<0.05，與對照組相比，compared with control group

2.2 2組患者生活質(zhì)量比較 本研究中，經(jīng)治療后2組患者生活質(zhì)量評分均顯著提高，其中實驗組患者生活質(zhì)量評分顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 2組患者生活質(zhì)量評分比較 ±s，分)Tab.2 Comparison of quality of life score between two groups ±s,score)

*P<0.05，與治療前相比，compared with before treatment；#P<0.05，與對照組相比，compared with control group

2.3 2組患者ER、MMP-9和雌激素水平比較 本研究中，經(jīng)治療后2者患者ER、MMP-9、E2、E1水平均有所下降，但實驗組明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 2組患者ER、MMP-9和雌激素水平比較Tab.3 Comparison of ER, MMP-9 and estrogen levels between two groups ±s)

*P<0.05，與治療前相比，compared with before treatment；#P<0.05，與對照組相比，compared with control group

2.4 2組患者血清腫瘤標志物水平比較 本研究中，經(jīng)治療后2者患者血清CA15-3、CA125、CEA表達水平均有所下降(P<0.05)，實驗組明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表4。

表4 2組患者血清CA15-3、CA125、CEA表達水平比較Tab.4 Comparison of serum levels of CA15-3, CA125 and CEA between two groups ±s)

*P<0.05，與治療前相比，compared with before treatment；#P<0.05，與對照組相比，compared with control group

3 討論

乳腺癌一直都是女性最常發(fā)的惡性腫瘤之一，研究發(fā)現(xiàn)[8]，乳腺癌在我國女性惡性腫瘤中的發(fā)病率占第一位，2012年全國腫瘤登記最新資料顯示乳腺癌女性發(fā)病率達42.55/10萬，且發(fā)病率呈逐年上升的趨勢。隨著當今社會工作壓力過大導致廣大女性精神過度緊張、情志不舒，或頻繁熬夜、過食辛辣等不良生活習慣等誘因，引起內(nèi)分泌功能紊亂，導致乳腺癌的發(fā)生，晚期乳腺癌會由于癌細胞通過血行轉(zhuǎn)移或淋巴轉(zhuǎn)移而擴散全身，形成腫瘤轉(zhuǎn)移從而危及患者生命。研究發(fā)現(xiàn)，雌激素與女性相關的重要內(nèi)分泌指標，內(nèi)分泌紊亂，主要是雌激素分泌過多，孕激素，黃體酮分泌相對不足導致雌激素分泌紊亂[9]，導致乳腺上皮細胞、纖維組織增生以及引起乳腺癌變。百令膠囊主要提取自冬蟲夏草，祖國醫(yī)學認為，冬蟲夏草具有補肺益腎,止血化痰的功效，而現(xiàn)代臨床研究發(fā)現(xiàn)百令膠囊具有抗腫瘤作用，且臨床療效明顯，而西黃丸也是現(xiàn)代臨床較為常用的抗腫瘤藥物之一，但將兩者聯(lián)合治療乳腺癌的報道卻并不多見。

研究結(jié)果顯示，百令膠囊聯(lián)合西黃丸能有效改善Ⅲ期乳腺癌患者生活質(zhì)量、延長生存時間。對于晚期乳腺癌臨床主要以化療方案治療為主。研究發(fā)現(xiàn)，惡性腫瘤患者凝血功能發(fā)生高凝狀態(tài)異常改變，導致在癌癥中晚期發(fā)生血栓栓塞性并發(fā)癥明顯升高[10]，化療會導致晚期癌癥患者PT、APTT、TT時間較化療前又有降低，可見化療對晚期癌癥患者凝血系統(tǒng)具有明顯促進其增強的作用，其原因可能與化療過程中血管內(nèi)皮的損傷進一步加劇了機體凝血因子的釋放有關。本研究中，實驗組患者生存期明顯長于對照組，其原因可能與對照組應用化療藥物后并發(fā)靜脈血栓栓塞癥而導致死亡有關。在表3中可以看出，實驗組MMP-9的表達水平明顯受到抑制，而MMP-9是在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的過程中具有降解細胞外基質(zhì)的作用，打破阻礙腫瘤細胞轉(zhuǎn)移的天然屏障，促進腫瘤細胞的增殖，實驗組經(jīng)治療后MMP-9水平降而對照組相對較高，說明對實驗組癌轉(zhuǎn)移的幾率低于對照組(P<0.05)，這可能也是實驗組患者生存時間和生存質(zhì)量優(yōu)于對照組的原因之一。中醫(yī)學者認為[11]乳腺癌與氣血瘀滯有關，而西黃丸以人工牛黃、麝香、乳香、沒藥中藥組方而成，其中牛黃味苦、甘，性涼，有清熱解毒、化痰利膽的功效；麝香味辛性溫，香竄通絡，具有散瘀消腫散結(jié)的功效；乳香、沒藥則能行氣活血、消腫止痛、祛腐生肌；諸藥合用，共奏清熱解毒、行氣活血、和營消腫、散結(jié)止痛之功效。由此可見，西黃丸的應用可能是緩解患者疼痛、改善生活質(zhì)量的主要原因。

從表3中可以看出，實驗組患者經(jīng)百令膠囊聯(lián)合西黃丸治療后其ER、MMP-9、E2、E1水平均明顯下降且低于對照組，其原因可能與應用百令膠囊有關。百令膠囊主要提取自冬蟲夏草，而研究發(fā)現(xiàn)冬蟲夏草提取物由有抗衰老、抗腫瘤等多種生物活性，且有用于臨床治療乳腺癌的報道。研究表明，乳癌的治療和預后與癌細胞內(nèi)雌激素受體(ER)水平有密切關系[12]，因此檢測乳癌細胞的ER對臨床治療方案的選擇有一定的指導意義。導致乳腺增生、乳腺癌的發(fā)生。本研究中，經(jīng)治療后實驗組患者ER和雌激素水平均有降低(P<0.05)，長期暴露于高水平的外源性及內(nèi)源性雌激素是乳腺癌發(fā)生發(fā)展的重要因素之一[13]，而實驗組經(jīng)治療后較低的雌激素水平以及ER表達率(P<0.05)，也從側(cè)面說明實驗組患者生存時間會高于對照組。表4中可以看出，2組患者經(jīng)治療后其血清CA15-3、CA125、CEA表達水平均有所下降(P<0.05)，可見化療和實驗組藥物治療都能在一定程度上抑制腫瘤的發(fā)展，達到治療目的。但是實驗組患者上述指標水平明顯優(yōu)于對照組(P<0.05)，其原因可能與實驗組應用百令膠囊和西黃丸具有明顯抗腫瘤作用有關，但是其具體藥理機制目前并不十分明確。

本研究通過對III期乳腺癌患者的腫瘤標志物、ER表達率、MMP-9、雌激素水平以及對患者生存時間和生活質(zhì)量的變化，證實百令膠囊聯(lián)合西黃丸對III期乳腺癌患者的治療具有一定的意義。在未來的研究中，將對百令膠囊聯(lián)合西黃丸治療III期乳腺癌患者的藥理作用進行更入的研究，為本實驗所得出的結(jié)果做出進一步的論證和分析。

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(編校：譚玲)

Study on effect of Bailing Capsule combined with Xihuangwan on estrogen receptor,matrix metalloproteinase-9, tumor markers and estrogen in stage III breast cancer patients

ZHOU Jian-lin, ZHANG Wu-fang, YANG Wu-sen, WANG Xing-wu, LI Fen

(Department of Thoracic Surgery, Guiyang Medical University Affiliated to People’s Hospital of Qiandongnan, Guiyang 556000, China)

ObjectiveTo investigate effect of Bailing Capsule combined with Xihuangwan in stage III breast cancer patients of ER, MMP-9, tumor markers and estrogen.Methods76 Patients with stage III breast cancer were selected and divided into control group anf experiment group.Control group were treated by clinical routine method.Experiment group were treated on the base of the control group with Bailing Capsule combined with Xihuangwan.The ER, MMP-9, tumor markers, estrogen, survival time and quality of life were observed and compared.ResultsCompared with control group, the survival period of the experiment group were longer(P<0.05),the quality of life score were higher(P<0.05),the ER, MMP-9, E2, E1 level and the serum levels of CA15-3, CA125 and CEA were lower(P<0.05).ConclusionBailing capsule combined with Xihuang Pill can effectively reduce stage III breast cancer tumor marker levels, decrease the ER, the expression of MMP-9 and estrogen level and prolong survival time, improve the quality of life, has the vital significance to the clinical therapy for stage III breast cancer.

Bailing Capsule; Xihuangwan; stage Ⅲ breast cancer; estrogen receptor; matrix metalloproteinase-9; estrogen; tumor markers

周建林，男，副主任醫(yī)師，研究方向：甲狀腺、乳腺、普胸外科，E-mail:cmazjl@163.com。

R737.9

A

1005-1678(2015)07-0060-04