不同途徑注入大腸埃希菌致家兔熱癥蒙醫未熟熱期、成熟熱期模型研究△

額爾敦朝魯 加曼·沙俄 紀月齡 李 立 楊玉秋 胡玉榮 趙福全 王高娃 高玉峰 包春生

(1.內蒙古民族大學附屬醫院，內蒙古 通遼 028007;2.內蒙古民族大學蒙醫藥學院，內蒙古 通遼 028000)

蒙醫將溫熱病癥按其發熱過程分若干階段進行辨證、分期論治［1］，其中，未熟熱期、成熟熱期是熱癥最常見的階段即證期。未熟熱期是溫病的初始階段，大多數感染性疾病早期均出現未熟熱期，未熟熱期因疾病和治療干預等或治愈或轉變為多個不同的證期，其每個證期癥候、治療方

法、預后均不同，因此未成熟熱證期是熱癥診療的關鍵時段。成熟熱期為單純熱，因易于診斷并可進行單純的清熱治療，因此使未熟熱證轉變為成熟熱證是臨床治療的主要原則。為以現代方法研究這一病機理論，作者在前期研究基礎上采用家兔不同途徑注射大腸埃希菌致發熱的方法［2］建立蒙醫未熟熱證期轉變成熟熱證期的模型，對比觀察和分析模型動物的體溫和癥狀變化，探討該模型能否應用于蒙醫溫病研究，報道如下。

1 資料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物: 選用日本大耳白兔體重在2.0 ～2.5kg，雌雄兼用，雌兔不孕，購于吉林大學實驗動物中心。許可證號: SCXK-吉20130002。將基礎體溫在38.5 ～39.5 ℃之間的日本大耳白兔隨機分為腦刺痛組、腹刺痛組、黏熱癥組和空白組各8 只。

1.1.2 藥品和儀器: 大腸埃希菌購于衛生部藥品生物制品檢定所，菌號44825 -3。IL -1、IL -6、TNF -α 試劑盒購于上海滬尚生物科技有限公司。全自動多功能酶標儀: 芬蘭Thermo，型號MK3;細菌標準比濁儀: 法國生物梅里埃公司，型號DENSIMAT。

1.2 方法

1.2.1 家兔基礎體溫的測定: 采用人工測肛溫法［3］，實驗前將家兔固定，安靜1h 后，每隔1h 測體溫3 次，取3 次體溫平均值為基礎體溫。

1.2.2 模型的建立: 腦刺痛組采用小腦延髓池法［4］，固定家兔，模型組家兔每只經小腦延髓池注射8 ×107個/mL［5］的大腸埃希菌溶液;腹刺痛組采用腹腔多點注射法，仰臥位固定家兔，模型組家兔每只腹腔內分4 個點注射3 ×108個/mL［5］的大腸埃希菌溶液1mL;“黏”熱癥組采用耳緣靜脈注射法，模型組每只家兔耳緣靜脈注射8 ×107個/mL［6］大腸埃希菌溶液。每種模型試驗空白組按同一途徑注射等量的生理鹽水。注射完畢開始測體溫、觀察家兔癥候表現，此期間家兔處于自由飲水、進食狀態。

1.2.3 觀測指標: 體溫觀察: 采用人工測肛溫法，每隔20min 測體溫、連續測體溫至12h、計算TRI12，繪出體溫曲線。①發熱高峰值;②體溫反應指數(Temperature Response Index，TRI)，計算出12h 體溫反應指數(TRI12)。

1.2.4 觀察未成熟熱、成熟熱期證候 觀察證候包括: 一般活動、精神，飲食水量，被毛，出汗，是否寒戰，心率，心跳，呼吸，眼及眼結膜，耳及部部血管及脈搏、舌、尿、便等。

2 結 果

2.1 家兔體溫變化: 表1，圖1 可見各模型組體溫曲線有明顯的上升階段，高熱階段，呈現高熱持續的平臺，空白組則體溫處于正常范圍波動狀態。

表1 各組家兔發熱高峰值(℃)、TRI12(cm2)

2.2 模型家兔癥候表現

2.2.1 腦刺痛組: 經小腦延髓池注射大腸埃希菌稀釋液之后約60min 后體溫快速上升，并且出現精神稍差，活動量減少;被毛時而聳立，時而寒戰;呼吸淺快，心跳加速;耳時涼時熱;耳部血管時而纖細時而飽滿;舌無明顯改變;不進食水。其中5 只于180min 時上述證候消失，2 只于120min 消失，1 只持續到400min。實驗期間排尿排便的4 只家兔，尿色黃渾濁，糞便顏色變淺，質地無改變;2 只家兔有扭頭靜臥的現象，以上癥候均符合人體疾病蒙醫溫病未成熟熱期臨床表現［6］，注射大腸埃希菌稀釋液約200min 后多數家兔出現精神倦怠乏力，被毛雜亂，寒戰消失;呼吸深快，心跳加速不明顯;耳灼熱，耳廓深紅，耳部血管充盈，觸之脈搏緊實有力;舌無明顯改變;不進食水;實驗期間排尿排便的5 只家兔，尿色深黃、有沉渣、氣味臭;糞便顏色淺，質地干硬，臭味大。此階段約持續至900min。以上癥候符合人體疾病溫病成熟熱期臨床表現［7］。

2.2.2 腹刺痛組: 在腹腔注射大腸埃希菌細菌后約40min后體溫快速上升，并且出現精神差，活動減少，被毛直聳，寒戰，呼吸淺快，耳涼，耳部血管纖細，舌無明顯改變，進食水差。其中6 只家兔于130min 時消失，1 只家兔于80min 時上述證候消失，1 只家兔持續到200min。在實驗中3 只家兔尿色無改變，糞便顏色無改變，質地有的稀薄，以上癥候符合人體疾病蒙醫溫病未成熟熱期臨床表現［7］。注射大腸埃希菌細菌約140min 后多數家兔出現精神萎靡不振，靜臥不動，被毛雜亂無光，呼吸頻率快，心跳加速，耳熱，耳廓赤紅，耳部血管充盈，觸之脈搏緊實有力，舌紫紅，不進食水;在實驗中5 只家尿色赤黃、有沉渣、氣味騷臭，糞便顏色發黑，質地稀薄，臭味大，此階段約持續至380min。以上癥候符合人體疾病溫病成熟熱期臨床表現［7］。

2.2.3 黏熱癥組: 經耳緣靜脈注射大腸埃希菌細菌后約60min 后體溫快速上升，精神差，活動較前增多，寒戰，體表涼，被毛聳立，呼吸較前加快，心跳快;耳發涼，耳部血管纖細觸不到動脈搏動;舌發白;不進食水，尿無色透明，便硬，氣味少。上述證候約持續到200minm。以上癥候符合人體疾病蒙醫溫病未成熟熱期臨床表現［7］。注射大腸埃希菌細菌約200min 后多數家兔出現萎靡不振，體表熱，被毛雜亂，結膜充血，不再寒戰;呼吸加快，心跳較之前加快，觸之耳熱，耳部脈搏緊實有力，耳廓深紅，耳部血管充盈，舌發紅，鼻尖濕潤，自動少量飲水，進食少;實驗期間排尿排便的家兔，尿色深黃、氣味騷臭;糞便顏色淺，質地干硬，臭味大。此階段約持續至450min。以上癥候符合人體疾病溫病成熟熱期臨床表現［7］。

2.2.4 空白組: 注射等量生理鹽水后未發現異常癥狀，實驗過程體溫波動未超過0.4℃，精神狀態良好，體表溫度正常，舌紫紅色，呼吸心跳平穩，色澤正常，脈搏可觸及，尿稍清亮，糞便稍黃。

4 組家兔在不同階段在一般活動、精神，飲水，被毛，鼻尖出汗，是否寒戰，噴嚏，呼吸，眼及眼結膜充血，耳部血管及耳部脈搏、舌、尿、便等方面表現出不同的癥狀變化。

表3 3 組家兔證期及癥狀對比

3 討 論

蒙醫溫病學是研究發熱性疾病的學科，它把蒙醫溫病的病因歸結為疫、騷、傷、毒四大類，把發熱過程歸結為8 個階段即未熟熱、成熟熱、空虛熱、隱伏熱、澡濁熱、散播熱、陳舊熱和寒熱間期等［1］。現代醫學感染性疾病屬蒙醫疫原性溫病。未熟熱證期是疾病初期臨床表現發熱伴有寒戰，熱型不規則，常于傍晚時體溫升高，全身關節、肌肉、骨骼酸痛，乏力、口苦等癥狀以及體現赫依、稀拉、巴達干共同病因的舌、脈、尿特征性表現的階段。由于未熟熱證期為疾病初始階段，且為此階段可轉變為空虛熱、隱伏熱、澡濁熱、散播熱等證期［1］而導致疾病遷延不愈，蒙醫視未成熟熱證期為治療溫病的關鍵點。蒙醫溫病機制研究尚未見他人報道，作者在前期內毒素致蒙醫“黏”性腦刺痛癥未熟熱證至成熟熱證期模型研究的基礎上［2］進行了大腸埃希菌不同途徑給藥致不同病癥的未熟熱證至成熟熱證期模型。結果顯示: 與空白組比較，3 個模型組發熱高峰值、TRI12 均有顯著升高、有顯著性差異(P＜0.05)，其發熱高峰值較空白組升高1.3 ～2.0℃，各模型組家兔發熱過程相當并與人體感染性發熱疾病的發熱程度相近，體溫達到40.5℃～41℃。各模型組注射大腸埃希菌溶液后體溫逐漸上升，并出現精神萎靡，活動量減少，閉眼，打噴嚏，蜷縮不動，被毛直聳，寒戰，呼吸淺快，心跳快，耳時涼時熱，耳部血管時而纖細時而飽滿，有的耳下垂、抽搐，舌苔淺白，進食水差等同樣的癥狀。腦刺痛組出現抽搐，尿色黃、渾濁，糞便顏色變淺等表現，其它兩組未見此類表現。以上完全符合人體疾病未熟熱證期的診斷要點。繼以上癥狀階段之后，3 組模型均出現精神倦怠乏力，被毛雜亂，寒戰消失;呼吸深快;眼紅，結膜充血，舌紫紅，鼻尖濕潤，耳灼熱，耳廓深紅，耳部血管充盈，觸之脈搏緊實有力;尿色赤黃、有沉渣、氣味騷臭，糞便顏色發黑，質地稀薄，臭味大，不進食、有飲水等共同的癥狀。此類癥狀符合人體疾病成熟熱證期診斷要點。3 組模型發熱程度基本一致，差距＜0.5℃。注入細菌后起始發熱時間相近，腹刺痛組于40 min 始出現發熱，較其它3 組滯后20 min。發熱持續時間各異，腦刺痛組持續時間長900 min，腹刺痛、黏熱證各為380 min、450 min。未熟熱證期持續時間腦刺痛組較短，占總的發熱時間的16.6%，腹刺痛、黏熱證各占41.6%、56%。

綜上，大腸埃希菌不同途徑給藥致熱癥引起的蒙醫未熟熱證期、成熟熱證期的家兔模型癥狀易于觀察，證期表現迥異易于觀察和鑒別，發熱持續時間、各證期持續時間較長，能夠滿足相關研究內容的實施所需，認為此3 種熱癥及證期模型符合蒙醫疾病特征及演變規律，可作為相關機理及藥效研究模型使用。

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