七星對(duì)月湯聯(lián)合參蛇洗劑對(duì)小鼠慢性皮炎濕疹模型的藥效學(xué)研究

楊道秋

(山東煙臺(tái)第107 醫(yī)院皮膚科，山東 煙臺(tái) 264002)

慢性皮炎濕疹是一種因變態(tài)反應(yīng)引起的皮膚疾病，病情反復(fù)纏綿，極難治愈，患者主要表現(xiàn)為瘙癢癥狀。由于本病較之急性反應(yīng)更為復(fù)雜多變，增加了該病的治療難度和復(fù)雜性。隨著本病發(fā)病率的攀升，加大對(duì)新藥開(kāi)發(fā)力度的追求成為了研究重點(diǎn)［1］。參蛇洗劑主要是由蛇床子、當(dāng)歸、冰片、苦參、黃柏以及大黃等諸味中藥組成，具有祛風(fēng)潤(rùn)燥、抗炎抑菌、涼血活血的功效［2］。有實(shí)驗(yàn)報(bào)道證實(shí)［3］，運(yùn)用參蛇洗劑治療小鼠變應(yīng)性接觸性皮炎，可改善小鼠變應(yīng)性接觸性皮炎癥狀。七星對(duì)月湯是廣西壯族民族地區(qū)的經(jīng)驗(yàn)方，其具有疏風(fēng)止癢、散熱解毒的功效。本研究通過(guò)建立小鼠慢性皮炎濕疹模型，對(duì)七星對(duì)月湯外洗聯(lián)合參蛇洗劑外涂的藥效學(xué)進(jìn)行探討。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：自煙臺(tái)魯銀藥業(yè)有限公司(許可證號(hào)：SCXK(魯)2011 -0002)，購(gòu)入小鼠48 只，雄性，體質(zhì)量23 ～26g，清潔級(jí)BALB/c。飼養(yǎng)條件：虛擬清潔級(jí)動(dòng)物房?jī)?nèi)，濕度40% ～60%，溫度20℃-25℃。常規(guī)條件下飼養(yǎng)3d 后納入實(shí)驗(yàn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 建模、分組與給藥：將48 只小鼠隨機(jī)分為4 組，每組各有小鼠12 只，分別設(shè)定為對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、用藥組。參考李詠梅［4］報(bào)道中關(guān)于小鼠皮炎濕疹建模方法，具體方法為：取小鼠腹部脫毛，范圍3cm ×3cm，第1日取7% DNCB 丙酮橄欖油溶液100μl 致敏，取0.5%DNCB 溶液20μl 于第5d、第14d 在小鼠雙耳內(nèi)外側(cè)均勻涂抹，行多次激發(fā)。空白對(duì)照組則在小鼠耳部和腹部均勻涂抹丙酮橄欖油溶液(4：1)。初次激發(fā)之后24h 開(kāi)始給藥，用藥安排為：對(duì)照組(75%酒精)，模型組(75%酒精)，陽(yáng)性對(duì)照組(1%氯化可的松溶液)，用藥組(七星對(duì)月湯外洗，參蛇洗劑1：1)。每日涂抹2 次，每次100μl，用玻璃棒蘸取對(duì)內(nèi)外側(cè)耳反復(fù)涂抹5s 左右，直至最后1 次激發(fā)后第3d。

1.2.2 標(biāo)本采集及指標(biāo)檢測(cè)：(1)耳厚度檢測(cè)：分別于初次激發(fā)之前、每次激發(fā)之后24h、最后1 次激發(fā)后第3d，對(duì)小鼠雙耳厚度進(jìn)行測(cè)定。(2)耳變應(yīng)反應(yīng)評(píng)分：每次激發(fā)之后24h、最后一次激發(fā)后第3d，觀察小鼠雙耳水腫、紅斑、抓痕，并根據(jù)該反應(yīng)評(píng)估雙耳變態(tài)反應(yīng)，最高分值為8分。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：運(yùn)用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(χ±s)表示，運(yùn)用方差檢驗(yàn)多個(gè)樣本間，方差不齊則運(yùn)用秩和檢驗(yàn)，組間樣本采用t 值檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用秩和檢驗(yàn)。若P＜0.05，即表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

第5d4 組小鼠耳厚度對(duì)比無(wú)差異(P＞0.05);對(duì)照組耳變態(tài)反應(yīng)顯著低于模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、用藥組(P＜0.05);第14d 對(duì)照組耳厚度、耳變態(tài)反應(yīng)無(wú)變化(P＞0.05);模型組耳厚度、耳變態(tài)反應(yīng)均顯著高于對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組與用藥組(P＜0.05，P＜0.01);用藥組耳厚度、耳變態(tài)反應(yīng)與陽(yáng)性對(duì)照組無(wú)差異(P＞0.05)，見(jiàn)表1。

表1 建模后第5d、第14d 小鼠耳厚度與耳變態(tài)反應(yīng)變化

3 討論

參蛇洗劑由蛇床子、當(dāng)歸、冰片、苦參、黃柏以及大黃等中藥組成，方中苦參多用于肝炎、腸炎、AD 以及濕疹等疾病的臨床治療［5］。苦參中含有的氧化苦參堿和苦參堿是其主要的藥效成分，經(jīng)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，其在抑制炎癥上效果顯著［6］。有學(xué)者通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)［7］，苦參中含有的苦參堿，可對(duì)P 物質(zhì)受體表達(dá)進(jìn)行抑制，使成纖維細(xì)胞分泌的單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)、IL-1β、IL-8 以及P 物質(zhì)誘導(dǎo)的HaCaT 細(xì)胞受抑，另還可促使HaCaT 加速I(mǎi)FN -γ 的分泌。有學(xué)者通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)［8］，給予大鼠腸黏膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞不同濃度的苦參堿，發(fā)現(xiàn)脂多糖(LPS)可受到抑制，另還可激發(fā)IL-8、IL -6 以及可溶性細(xì)胞間黏附分子1(sICAM-1)的快速生成。

根據(jù)慢性皮炎濕疹的臨床表現(xiàn)來(lái)看，其以“瘙癢-搔抓-苔癬化”為惡性循環(huán)，為此，在該病的治療中，我們主要對(duì)瘙癢進(jìn)行改善［9］。現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，黃柏具有非常顯著的抗炎、抗菌功效［10］;當(dāng)歸則能夠?qū)γ庖呦到y(tǒng)和微循環(huán)進(jìn)行調(diào)節(jié)［11］。中醫(yī)認(rèn)為導(dǎo)致慢性皮疹濕疹的病機(jī)主要是經(jīng)絡(luò)瘀阻，濕熱久戀致使肌膚失養(yǎng)，引發(fā)該病［12］。故以"疏泄與潤(rùn)澤"的理論為基礎(chǔ)，選用當(dāng)歸、黃柏，取當(dāng)歸養(yǎng)血活血潤(rùn)燥，黃柏清熱燥濕的功效。冰片甚少單獨(dú)用于臨床，多將其作為佐藥和引藥。有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)［13］，為2%巴豆油合劑誘發(fā)炎癥反應(yīng)小鼠提供5%冰片乳劑，可對(duì)炎癥反應(yīng)達(dá)到顯著的抑制功效，另研究者［14］為蛋清性足跖腫脹小鼠提供冰片腹腔注射，發(fā)現(xiàn)抑制功效顯著。有報(bào)道［15］通過(guò)為Ⅱ度燙傷小鼠提供蘆薈冰片燒傷膏，發(fā)現(xiàn)用藥90min 后取得了非常顯著的鎮(zhèn)痛功效，并且還可促使小鼠耳廓腫脹癥狀得到有效改善。另七星對(duì)月湯主要有大葉蛇、七星劍、紅椿皮和對(duì)月草等壯藥組合而成，其以調(diào)氣解毒為原則，調(diào)氣以疏暢三道兩路為氣機(jī)，使陰陽(yáng)升降有道，氣血均行通達(dá)。解毒以清除阻滯兩路之毒邪，從而達(dá)到天地人三氣同步而病自安，瘙癢自止。在本研究中，采用給予小鼠參蛇洗劑，結(jié)果顯示，用藥組小鼠的耳厚度、變應(yīng)反應(yīng)評(píng)分與模型組對(duì)比，均更低(P＜0.05)。

綜上所述，七星對(duì)月湯聯(lián)合參蛇洗劑可改善慢性皮炎濕疹模型小鼠的耳厚度、變應(yīng)反應(yīng)評(píng)分，這表明七星對(duì)月湯與參蛇洗劑在未來(lái)臨床應(yīng)用中，或許可用于慢性皮炎濕疹患者的治療。

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