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紅景天粉末水提物對小鼠運動性疲勞的改善作用

2015-07-28 08:16:38游小鳳石鶴坤蔡靜靜王幼妹胡永獅
中國醫藥導報 2015年34期
關鍵詞:小鼠劑量實驗

游小鳳 石鶴坤 蔡靜靜 王幼妹 胡永獅▲

1.廈門大學附屬東南醫院采供辦,福建 漳州 363000;2.廈門大學附屬東南醫院藥學科,福建 漳州 363000

紅景天是景天科大花紅景天屬多年生草本植物,因其花、根、莖的浸出液皆為紅色而得名。在我國,早在兩千多年前西藏高原的人民便以之入藥用以強身健體有被喻為“高原人參”,“主養命以應天,多服久服不傷人”,且有“輕身益氣、不老延年”等功效。現代藥理學研究認為,紅景天的主要活性成分是紅景天苷和黃酮。研究表明,紅景天苷具有保護心血管、抗衰老、保護肝臟、抗炎鎮痛、抑制腫瘤、增強免疫等作用[1];紅景天黃酮化合物具有抗氧化、抗輻射、抗癌、消炎抑菌、抗病毒、抗血栓、調節血脂、保護肝臟作用,此外還能影響學習記憶功能[2]。為進一步闡明紅景天功能和效果,本研究通過力竭游泳試驗,觀察紅景天對小鼠負重游泳時間、運動后血乳酸濃度及肝糖原儲備量變化,考察其抗疲勞運動的作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

SPF級健康昆明種小鼠120只,雄性,體重18~22 g,鼠齡6~8周,購自福建省疾病控制中心動物實驗場,合格證號:SCXK(閩)2012-0002。動物實驗在廈門大學附屬東南醫院中心實驗室進行,許可證號:SYXK(軍)2007-032。

1.2 藥物與試劑

紅景天粉末,江西江中(武寧)中藥飲片有限公司,批號:100303009;肌/肝糖原測定試劑盒,南京建成生物工程研究所,批號:20120319;乳酸檢測試劑盒,英國朗道生物試劑公司,批號:228934;濃硫酸,福建省三明市三圓化學試劑有限公司,批號:T20110914。

1.3 實驗儀器

UV-2250型紫外分光光度計,日本島津公司;Bs223s型電子天平,賽多利斯科學儀器(北京)有限公司;TGL-16G型臺式高速離心機,江蘇金壇江南儀器廠;420-A型電熱恒溫水浴鍋,天津市泰斯特儀器有限公司;ACS-6A型電子計算秤,上海友聲衡器有限公司;SIMENS ADVIA 2400型生化分析儀,德國西門子公司。

1.4 實驗方法

1.4.1 紅景天粉末水提物的制備 取紅景天粉末200 g,10倍蒸餾水浸泡30 min后開始煎煮,待溶液沸騰后開始計時,保持沸騰30 min,過濾后8倍蒸餾水二次煎煮,合并兩次煎液,濃縮至0.1 g/mL。

1.4.2 小鼠負重游泳試驗 先取小鼠40只,按體重分成4個組,分別為:對照組(每天給予等體積的蒸餾水)、低劑量組(0.78 g/kg)、中劑量組(1.56 g/kg)、高劑量組(3.12 g/kg)。每天以0.4 mL/10 g鼠重灌胃給藥,連續7 d,灌胃期間自由攝食和飲水 (末次給藥的前14 h對小鼠進行禁食)。于末次灌胃給藥30 min后,用總重為小鼠體重5%的鉛絲固定于小鼠尾部。將小鼠置于40 cm×30 cm×30 cm的游泳箱中游泳,水溫(25±1)℃,記錄小鼠從游泳開始至死亡的時間(以小鼠沉入水底,10 s內不能浮出水面為溺死指標),作為小鼠負重游泳的時間[3]。

1.4.3 小鼠血乳酸測定試驗 另取小鼠40只,小鼠分組及灌胃給藥方法同“1.4.2”項所述。于末次灌胃給藥30min后,將小鼠置于40 cm×30 cm×30 cm的游泳箱中游泳,水溫(25±1)℃,不負重游泳 90 min。游泳結束后,立即摘除各組小鼠眼球進行采血,將所采得的血置于離心機中以3000 r/min的轉速離心8 min,分離血清,4~8℃下保存待檢。按試劑盒說明書測定血漿中乳酸的含量[4]。

1.4.4 小鼠肝糖原測定試驗 取剩余的40只小鼠,小鼠分組及灌胃給藥方法同“1.4.2”項所述。于末次灌胃給藥30 min后,將小鼠頸椎脫臼處死,取出小鼠肝臟,經生理鹽水漂洗后用濾紙吸干,采用試劑盒法[5]測定肝糖原含量,即:精確稱取肝臟100 mg,將樣本與堿液按1∶3加入試管為水解液,沸水浴20 min后,流水冷卻,將肝糖原水解液配制成1%檢測液,配制空白液與標準液,混勻,沸水浴5 min,冷卻,于620 nm波長比色,按下列公式計算肝糖原含量:

肝糖原含量(mg/g組織)=[(A/B)×0.01×100×10]/1.11

A為測定管OD值;B為標準管OD值;0.01為糖原標準管含量0.01 mg;100為樣本測試前稀釋倍數;10為測試過程中的稀釋倍數;1.11為將葡萄糖換算成糖原的系數。

1.5 統計學方法

采用統計軟件SPSS 12.0對所測得的數據進行處理,正態分布計量資料以均數±標準差()表示,多組間比較采用方差分析,兩兩比較采用LSD-t檢驗。計數資料以率表示,采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

紅景天各劑量組的游泳時間均高于對照組,其中紅景天低劑量組影響不明顯(P>0.05),紅景天中、高劑量組均較對照組明顯延長(P<0.01)。紅景天低劑量組與中劑量組比較,差異有統計學意義(P<0.05),中劑量組與高劑量組比較,差異有高度統計學意義(P<0.01),呈劑量效應。與對照組比較,紅景天各劑量組小鼠的血乳酸均明顯降低,差異有統計學意義(P<0.05或P<0.01),但低劑量組與中劑量、高劑量組比較,差異無統計學意義(P>0.05)。與對照組比較,紅景天各劑量組小鼠的肝糖原含量均明顯升高 (P<0.01),差異有高度統計學意義(P<0.01),紅景天各劑量組間兩兩比較,差異有統計學意義 (P<0.05或P<0.01),呈劑量效應。見表1。

表1 紅景天粉末水提物對小鼠運動性疲勞指標的影響(n=10,)

表1 紅景天粉末水提物對小鼠運動性疲勞指標的影響(n=10,)

注:與對照組比較,*P<0.05,**P<0.01;與紅景天低劑量組比較,△P<0.05,△△P < 0.01;與紅景天高劑量組比較,▲P < 0.05,▲▲P < 0.01;“-”表示無數據

組別 劑量[g/(kg·d)]游泳時間(min)血乳酸值(mmol/L)肝糖原(mg/g)對照組紅景天低劑量組紅景天中劑量組紅景天高劑量組-0.78 1.56 3.12 7.78±2.34 10.18±3.15 15.19±4.77**△25.86±4.13**▲▲4.49±1.04 3.63±0.84*3.50±0.94*3.21±0.87**2.01±0.63 12.13±3.19**26.99±5.35**△△34.81±7.07**▲

3 討論

疲勞是一種普遍的生理現象,主要包括精神疲勞和軀體疲勞兩種,在我國因為過度疲勞致病甚至致死的病例數逐年增加,全球調查顯示35%人群處于疲勞狀態[6-7]。在運動過程中,當生理過程不能繼續維持在特定水平上或不能維持預訂的運動強度時,即稱之為運動性疲勞[8]。抗疲勞能力增強的最直接體現就是運動時間延長,即運動耐力增加[9]。本實驗通過力竭游泳試驗[10]測定小鼠負重游泳時間來觀察小鼠的疲勞程度。本實驗結果提示中、高劑量組紅景天水提物能夠延長小鼠的負重游泳時間,表明紅景天水提物對運動耐力具有提高作用。

紅景天中主要的活性成分是紅景天苷,另外還含有蛋白質、脂肪、淀粉等化合物及鋁、鋅、鐵、鉬、鈦等微量元素,具有扶正固本、滋補強身、補氣養血等功效[11]。紅景天可通過調節機體耗能、促進新陳代謝、調節中樞神經等功能,從而起到抗疲勞及提高機體免疫力的作用[12-13]。根據文獻報道,紅景天能夠增強心臟功能、減輕心臟的負荷、擴張冠脈血管、增加血氧含量,從而降低了心肌的耗氧量[14],還可以降低血液黏度及增加血液中紅細胞的數量等。

另外,糖原的儲存量直接影響機體的運動能力,同時儲量大小與疲勞的延緩也有直接關系。長時間運動時,為機體內的血糖維持平衡水平,肝糖原儲備量下降[15]。持續運動將導致機體相對缺氧、糖酵解加快,進而產生大量的乳酸,使肌肉組織內的pH值下降,最終導致疲勞,因此血乳酸水平也是反映機體有氧代謝能力和疲勞程度的重要指標[16-19]。本實驗以小鼠運動的血乳酸濃度變化及肝糖原儲備量為指標,對紅景天的抗運動性疲勞作用進行考察。實驗結果提示,在持續性運動后血乳酸測定實驗中,給藥組小鼠的血乳酸值均顯著低于對照組(P<0.05),而在肝糖原測定實驗中,給藥組小鼠的肝糖原含量均高于對照組(P<0.05);表明紅景天水提物對減少乳酸蓄積、增加糖原儲備具有促進作用。

綜上所述,紅景天粉末水提物對運動性疲勞具有改善作用。特殊營養品有調節身體功能、加快消除疲勞、促進功能恢復進而提高運動能力的作用,因而日益受到教練員和隊醫的重視,但是這些營養品也有不同程度的副作用,若使用不當,反而會產生不良后果,損害運動員的身體健康[20]。按照《中國藥典》2010版,紅景天的成人推薦劑量為3~6 g。本實驗中采用的劑量遠高于藥典推薦劑量,試驗中組間的結果呈一定的劑量反應關系,但未能找到最佳劑量。對于最佳的劑量,有待進一步的研究。

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