江蘇省泰州地區寵物重要人獸共患細菌病流行現狀

顏衛　趙莎莎　劉靜等

摘要：對江蘇省泰州地區寵物犬樣品進行沙門氏菌、彎曲菌、分枝桿菌和布魯氏菌的分離鑒定，結果顯示，肛拭樣品、犬糧中沙門氏菌檢出率分別為1.91%、2.23%，空腸彎曲菌、結腸彎曲菌的陽性率分別為4.69%、1.23%，分枝桿菌ESAT-6、CFP-10的基因檢出率分別為25.18%、18.09%；其余基因檢出率較低，RBT檢出粗糙型布魯氏菌感染犬的陽性率為2.01%。

關鍵詞：寵物；人獸共患細菌?。涣餍鞋F狀；防控

中圖分類號： S855.99 文獻標志碼： A

文章編號：1002-1302（2015）03-0198-02

隨著人們生活水平不斷提高，人與動物的關系越來越密切，許多人將各種小動物，尤其是犬作為寵物飼養。但是由于缺乏正確的飼養管理和預防疫病的知識，寵物人獸共患病的發病率也日漸增高。引起人致病的寵物重要人獸共患細菌病包括沙門氏菌、彎曲菌、結核分枝桿菌、布魯氏菌等。沙門氏菌感染犬、貓、家禽、爬行動物較常見，人類接觸糞便中含有大量沙門菌的動物會增加患病的概率。彎曲菌是全球范圍內主要的人獸共患性腸道病菌之一[1]，它是包括犬、貓在內的許多野生、家養動物的正常寄生菌，動物感染后通常無明顯病癥，但可長期向外排菌，從而污染食物和飲水，引起人類感染[1]。犬的結核病主要由人型和牛型分枝桿菌造成，多為亞臨床表現，易與其他呼吸道疾病混淆。已知的布魯氏菌宿主包括家畜、家禽、野生動物在內的60多種動物，能夠通過犬、鹿等寵物傳染給人[2]；大多數犬呈隱性感染，主要表現為生殖器官發炎，可引起流產和各種組織的局部病灶；人主要因為食入被污染的肉或處理布魯氏菌感染而引起流產和分娩的犬而感染。本研究對江蘇省泰州地區的寵物犬樣品進行病原菌的分離鑒定，旨在了解寵物犬中重要人獸共患細菌病的流行狀況，為有效防控疾病提供參考資料，具有公共衛生學意義。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

2011年10月至2013年10月，從江蘇泰州7家寵物醫院就診病犬和2個寵物犬養殖場的健康犬中采集肛拭樣品682份，從15家寵物店采集179份犬糧樣品進行沙門氏菌檢測；對從寵物醫院收集就診的405份糞便樣品進行彎曲菌檢測；采集282份犬、貓鼻液、尿液及飼料樣品進行結核分枝桿菌檢測；采集348份血清樣品進行布魯氏菌血清學檢測。

1.2 樣品的分離培養和鑒定

按照GB 4789.4—2010《食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗》[3]及何曉青主編的《衛生防疫細菌檢驗》[4]中的相關章節進行沙門氏菌的培養、分離和鑒定。應用多重PCR方法[5]結合常規分離方法對采集的寵物樣品進行彎曲菌的流行狀況分析。采用組織消化液提取法提取鼻拭子和尿液樣本基因組DNA，擴增16S rRNA、IS6110、Rv3878、IS1081、ESAT-6、CFP-10基因[6]。參考國標《動物布魯氏菌病診斷技術》進行虎紅平板凝集試驗（rose-bengal plate agglutination test，RBT），包括粗糙型RBT和光滑型RBT；以及試管凝集試驗（standard tube agglutination test，SAT），包括粗糙型SAT和光滑型SAT。

1.3 培養基與試劑

增菌、分離、鑒定用的培養基由北京陸橋技術有限責任公司提供；彎曲菌培養基CCDA瓊脂購自OXOID公司；Taq酶、buffer、dNTPs、marker購自北京天根生物工程公司；布魯氏菌平板凝集抗原、試管凝集抗原及犬布魯氏病標準陽性血清由中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所生產；常規試劑為國產分析純。

2 結果與分析

2.1 寵物犬攜帶沙門氏菌的情況

對861份樣品進行檢測，共分離到沙門氏菌17株，其中7家寵物醫院和2個寵物犬養殖場被檢犬肛拭子樣品共計682份，檢出沙門氏菌陽性樣品13份，陽性率為1.91%；15家寵物店被檢犬糧樣品共計179份，檢出沙門氏菌陽性樣品4份，陽性率為2.23%。

2.2 寵物群體中彎曲菌的流行病學分析

由表1可知，在寵物醫院收集的405份糞便樣品中，19份檢出空腸彎曲菌陽性，陽性率為4.69%，5份檢出結腸彎曲菌陽性，陽性率為1.23%。將收集的寵物犬樣品按年齡分類，在229份幼年犬樣品中，17份為空腸彎曲菌陽性，陽性率為7.42%，4份為結腸彎曲菌陽性，陽性率為1.75%；176份成年犬樣品中，2份為空腸彎曲菌陽性，陽性率為1.14%，1份為結腸彎曲菌陽性，陽性率為0.57%。進一步比較可知，幼年犬空腸彎曲菌的檢測率極顯著高于成年犬（P<001）。將收集的寵物犬樣品按城區、郊區的飼養地區分類，城區312份樣品樣品中，6份為空腸彎曲菌陽性，陽性率為1.92%，1份為結腸彎曲菌陽性，陽性率為0.32%；郊區93份樣品中，13份為空腸彎曲菌陽性，陽性率為13.98%，4份為結腸彎曲菌陽性，陽性率為4.30%。進一步比較可知，郊區樣本中空腸彎曲菌和結腸彎曲菌的檢出率極顯著高于城區（P<0.01）。

2.4 布魯氏菌血清學檢測結果

對采集的348份血清樣品進行布魯氏病抗體檢測，分別用粗糙型、光滑型抗原RBT初檢，對陽性血清進行SAT。結果RBT檢出粗糙型布魯氏菌感染犬的血樣7份，占檢測總樣品數的2.01%，SAT檢出粗糙型布魯氏菌感染犬的血樣4份，占檢測總樣品數的1.15%。本試驗調查的犬樣年齡階段分布較廣，不同年齡犬對布魯氏菌的感染率見表3；性別比率為公犬58%、母犬42%，不同性別犬的調查結果見表4。

3 結論

隨著人們生活水平的不斷提高，飼養寵物的人越來越多，而相關的飼養規范和疾病預防措施的缺失以及不到位導致寵物發病率日漸增高，加速了動物病原向人類傳播的速度。犬感染沙門氏菌的途徑很多，可能通過進食被污染的水、飼料或其他食物感染，也可經過傷口感染，甚至是可能由人感染后將細菌傳染給犬，引起犬和人共同發病，從而形成循環感染。本研究采集的肛拭樣品中，沙門氏菌檢出率為1.91%，健康犬可能曾被沙門氏菌隱性感染而未發病，或曾感染發病后成為帶菌者不斷向外排菌，對于長期與犬密切接觸的主人是很大的威脅。犬糧的沙門氏菌陽性檢出率為223%，沙門氏菌在原料選擇、生產加工、運輸儲藏以及銷售過程中都有可能污染犬糧，因此加強對飼料中沙門氏菌污染的控制不僅可以減少犬發病，也是減少人感染沙門氏菌的一項重要措施。

本研究采集的糞便樣品中空腸彎曲菌陽性率為4.69%，結腸彎曲菌陽性率為1.23%。幼犬攜帶彎曲菌的陽性率要高于成年犬，這可能與抵抗力、身體狀況及抗體水平有關。郊區飼養犬彎曲菌的陽性率要高于城區飼養犬，這可能與飼養環境、膳食結構有關，因為郊區飼養犬有與其他家禽、家畜接觸的機會，可通過糞口傳播交叉感染，此外郊區犬的疫病防治比率低于城區也是一個重要的方面。

分枝桿菌的檢測結果顯示，針對ESAT-6、CFP-10基因，從寵物醫院采集的有病癥樣本的檢出率遠高于健康犬、貓樣本，此外在寵物糧中存在率也較高。ESAT-6、CFP-10基因除了存在于所有致病性結核分枝桿菌中，還存在于幾種非結核分枝桿菌中，由此可見，被檢的患病犬、貓極有可能受到非結核分枝桿菌的廣泛感染。

布魯氏菌血清學檢測結果顯示，泰州地區犬布魯氏病的陽性率為2.01%，陽性犬感染的病原體主要是粗糙型。各年齡段的犬均存在布魯氏菌感染，主要由于幼犬在3月齡左右，體質較差且是交易的高峰期，傳染源主要來源于母犬、養殖場和交易中心等，12月齡左右是犬發情期，配種感染的可能性較大，12～24月齡和24～36月齡也是犬繁殖盛期，帶菌配種交叉感染、垂直感染的風險較大。

針對江蘇省泰州地區寵物人獸共患病的流行現狀，應加強防控措施研究，進一步建立和健全寵物管理的法律法規與標準體系[7]，逐步實施系統性管理措施如寵物電子戶口、強制定點免疫、流浪寵物收容、定期科普教育等；應積極開展寵物細菌病病原生態學、流行病學、新型疫苗及其他生物防治制品等研究；此外，還應開展寵物病原細菌耐藥性監測工作，規范使用抗生素，積極開展抗生素替代品研究與應用。總的來說，完善寵物細菌病的報告、監測與溯源體系，可以更加有效地預防和控制人類疾病[8]。

參考文獻：

[1]Huang J L，Xu H Y，Bao G Y，et al. Epidemiological surveillance of Campylobacter jejuni in chicken，dairy cattle and diarrhoea patients[J]. Epidemiology and Infection，2009，137（8）：1111-1120.

[2]崔麗瑾，王興龍，王英超，等. 野生動物布魯氏菌病[J]. 中國人獸共患病學報，2010，26（3）：283-288.

[3]GB 4789.4—2010 食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗[S]. 北京：中國標準出版社，2010.

[4]何曉青. 衛生防疫細菌檢驗[M]. 南昌：新華出版社，1989.

[5]何 蕊，黃金林，許海燕，等. 彎曲菌多重PCR檢測方法的建立及其初步應用[J]. 揚州大學學報：農業與生命科學版，2007，28（1）：5-8.

[6]王 偉，劉佩紅，陳鴻軍，等. 犬貓感染分枝桿菌的分子流行病學調查[J]. 畜牧與獸醫，2009，41（10）：73-76.

[7]耿慶華，林 穎，付海濱，等. 伴侶寵物管理機制的初探[J]. 中國動物檢疫，2009，26（4）：19.

[8]李金元，程抱林，王遠清，等. 寵物疫病防控的隱患與對策[J]. 養殖與飼料，2009，4（1）：102-104.