三種消毒劑在煙草漂浮育苗中控制TMV傳播的藥效試驗*

尹利方，胡 昳 ，李志兵 ，趙曉紅，張曉瓊，胡靖祥 ，蔣淑萍 ，趙明方 ，羅清秀

（1.昆明學院農學院，云南 昆明 650214；2.云南省都市特色農業(yè)工程技術研究中心，云南 昆明 650214）

煙草漂浮育苗需要實施3～5次剪葉，剪葉又是病毒傳播蔓延的主要途徑。以TMV為代表的煙草病毒對煙草生產危害嚴重，為控制病毒對煙草生產造成的損失，培養(yǎng)健康煙苗在生產中意義重大。篩選安全、環(huán)保、有效的消毒劑對控制漂浮育苗中病毒病的傳播蔓延是一項重要工作。目前，云南省全面推廣烤煙漂浮育苗技術，至2004年推廣面積已達27.67萬hm2，占移栽大田面積的82.6%。影響烤煙漂浮育苗推廣最大的病害是病毒病，因病毒病在大田發(fā)生后，沒有較好的防治方法。煙草病毒病有“植物癌癥”之稱，該病的發(fā)生危害已成為烤煙生產向優(yōu)質、適產、高效目標邁進的一個主要障礙。煙草普通花葉病在烤煙漂浮育苗過程中的發(fā)生危害具有“一株發(fā)病，危及全棚”的特點，已成為漂浮育苗技術推廣的主要風險之一。為有效控制烤煙漂浮育苗階段煙草普通花葉病的發(fā)生危害，必須對最容易傳播該病的剪葉途徑進行研究。剪葉是漂浮育苗工作中一項必不可少的程序，是達到培育整齊一致壯苗的重要手段，但同時他又是造成TMV傳播污染的重要途徑之一，所以在剪葉時應十分注意對工具的消毒。而當前生產中主要應用10%漂白粉和2%福爾馬林等藥劑進行消毒，很難達到預期效果，因此試用目前生產上應用的幾種消毒藥劑進行對比試驗，從而篩選出符合生產實際的消毒藥劑，為漂浮育苗用具消毒提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試煙苗：按照烤煙漂浮育苗實用技術方法，選擇云南農業(yè)大學后山試驗基地溫室大棚培育的健康試驗用煙苗，品種為云煙85包衣種，試驗時將162穴漂盤連同煙苗一起處理。

TMV毒源：TMV病株，紗網隔離盆栽作為試驗用TMV毒源，接種時選擇有明顯花葉發(fā)病癥狀的葉片。

TMV接種毒液：取TMV接種發(fā)病明顯的嫩葉，加入0.005 mol/L磷酸緩沖液（配方為磷氫二鉀7.6 g、磷酸二氫鉀 2.25 g、亞硫酸鈉 1.26 g，pH 7.5）研磨后制成毒液，供試驗用。

剪葉工具：普通剪刀。

1.2 試驗設計

1.2.1 消毒藥劑及配制方法

毒消：北京市東旺農藥廠提供，24%混脂酸銅水乳劑。中國煙葉生產購銷公司推薦農藥，科技部國家級星火計劃項目，農業(yè)部無公害農產品生產推薦農藥，北京市高新技術成果轉化項目。本產品煙草專用，防治病毒病。取毒消0.83 mL，加入500 mL自來水中，充分拌勻，為600倍液。

育寶：育寶為育苗專用消毒劑，由昆明育寶科技公司提供。主要成分三丹油，是一種高效低毒的水溶性殺菌劑，能殺死或抑制微生物的繁殖，是廣譜型抗菌劑。取育寶2.5 mL，加入500 mL自來水中，充分拌勻，為200倍液。

博邦牌二氧化氯：由北京博邦食品配料公司提供。穩(wěn)定性二氧化氯（簡稱二氧化氯）是繼漂白粉、次氯酸鈉、氯氣等氯化消毒劑之后的第四代殺滅微生物的消毒產品，與傳統的氯化消毒劑相比，該產品不產生致癌氯代烴（如三氯甲烷等），不受水質條件的制約，具有高效、廣譜、性能穩(wěn)定且無毒等特點，被世界衛(wèi)生組織（WHO）確認為A1級環(huán)保殺菌消毒產品。廣泛用于水產、食品保鮮、加工、飲用水的消毒、殺菌和除臭。其作用機理是活化后的ClO2在H+的作用下產生具有強氧化作用的新生態(tài)氧，能迅速附著在微生物細胞表面，滲入微生物的細胞膜，與微生物蛋白質中的氨基酸產生氧化分解反應，從而使氨基酸斷裂、蛋白質失去活力而達到殺滅微生物的目的。取博邦牌二氧化氯0.62 g加入500 mL自來水中，充分拌勻，為800倍液。

1.2.2 試驗處理

處理1：剪刀蘸取病毒液后用清水沖洗然后剪葉。

處理2：剪刀蘸取病毒液后放入博邦牌二氧化氯800倍液中消毒5 min，用清水沖洗后剪葉。

處理3：剪刀蘸取病毒液后放入育寶200倍液中消毒5 min，用清水沖洗后剪葉。

表1 不同剪葉處理TMV傳染發(fā)病

表2 各處理藥劑對煙草花葉病的預防效果

處理4：剪刀蘸取病毒液后放入毒消600倍液中消毒5 min，用清水沖洗后剪葉。

1.2.3 剪葉方法

待煙苗生長至貓耳期時，用剪刀蘸取TMV毒液，將染毒剪刀浸泡在各消毒劑中5 min，用清水沖洗后剪葉。按從左到右，從下到上的順序，每苗剪3葉。 用0.1%三元烤煙專用復合肥 （10∶12∶24）為營養(yǎng)液。置于溫室大棚內培養(yǎng)。剪葉后20 d調查計算各小區(qū)煙苗發(fā)病率。

1.2.4 試驗設置

用每盤6～7葉期的漂浮育苗煙苗，剪葉后培養(yǎng)，每盤一個處理3次重復，共12個小區(qū)，隨機區(qū)組排列。剪葉后的煙苗做好標記，中間做好防蟲等管理工作。

1.3 TMV發(fā)病率調查

以出現典型花葉癥狀為標準，觀察記錄發(fā)病株數和健康株數。發(fā)病率（%）=發(fā)病總株數/調查總株數×100%，相對防效（%）＝（對照發(fā)病率－處理發(fā)病率）/對照發(fā)病率×100%

2 結果與分析

從表1可以看出，用不進行任何消毒處理的剪刀剪葉，花葉病發(fā)病率為50.41%。而用經過博邦牌二氧化氯800倍液、育寶200倍液、毒消600倍液消毒劑消毒的剪刀剪葉，花葉病發(fā)病率明顯降低。相對防效分別為93.87%、67.03%、27.32%（表2）。結果表明，本試驗所有供試消毒劑均能在短時間內殺死或鈍化剪刀上的TMV，具有對TMV進行消毒的效果。

試驗結果還表明，經博邦牌二氧化氯800倍液、育寶200倍液5 min浸泡消毒后，能高效抑制TMV在剪葉中的傳播，各煙草漂浮育苗生產基地可結合本地實際，盡量采用博邦牌二氧化氯、育寶消毒劑，并對濃度和消毒時間進行搭配，達到有效控制TMV在剪葉過程中的傳播。

3 討論

烤煙漂浮育苗是當今世界上比較先進的一種育苗技術，近年來，我國大部分產煙區(qū)已經由過去的苗袋育苗轉為漂浮育苗。采用漂浮育苗可以培育出無病、莖高、均勻一致的壯苗。其中，苗床剪葉則是達到這一目的的一項重要措施。苗床剪葉處理可以極顯著增加煙苗莖粗，葉綠素含量也有增加的趨勢，同時促進根系發(fā)育，提高煙苗的壯實和生產效率，還可預防早花。但烤煙漂浮育苗中病毒病傳播、蔓延的最主要途徑也是剪葉，所以應高度重視對剪葉工具的消毒。目前使用的10%漂白粉和2%福爾馬林等藥劑不能達到理想的效果。本試驗結果表明使用博邦牌二氧化氯、育寶等可以達到殺滅病毒、阻斷病毒通過剪葉刀片傳播的目的。值得在生產中推廣使用。為避免抗性的產生，建議交替使用。

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