紅細(xì)胞ABO疑難血型檢測(cè)分析與處理方案

夏富益

紅細(xì)胞ABO疑難血型檢測(cè)分析與處理方案

夏富益

目的 分析紅細(xì)胞ABO疑難血型檢測(cè)結(jié)果及產(chǎn)生原因,提出解決處理方案。方法 根據(jù)紅細(xì)胞ABO疑難血型檢測(cè)處理程序，設(shè)計(jì)針對(duì)性試驗(yàn)進(jìn)行正確的紅細(xì)胞分型。結(jié)果 共檢測(cè)紅細(xì)胞ABO疑難血型標(biāo)本41例,由抗原所致的17例（41.46%），其中亞型15例，抗原減弱或缺失2例；由抗體所致的24例（58.54%），其中冷自身抗體13例，抗體減弱或缺失6例，同種抗體5例。結(jié)論 由抗原或抗體所致的紅細(xì)胞ABO疑難血型可根據(jù)相應(yīng)原因，通過(guò)設(shè)計(jì)針對(duì)性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行正確的鑒定或確認(rèn)。

紅細(xì)胞；ABO疑難血型；檢測(cè)分析；處理方案

ABO血型系統(tǒng)是輸血中最重要的血型系統(tǒng),正確鑒定ABO血型是輸血前血型血清學(xué)檢查的重要環(huán)節(jié)，關(guān)乎受血者的用血安全。但在ABO血型血清學(xué)檢測(cè)過(guò)程中,除由于新生兒自然發(fā)生的抗-A、抗-B量很少,只檢測(cè)其紅細(xì)胞抗原正定型外,常規(guī)檢測(cè)、判斷ABO血型,須正反定型相符[1],才能確保ABO血型鑒定的正確性；若出現(xiàn)正反定型不符,則須進(jìn)入ABO疑難血型鑒定程序，查找出現(xiàn)ABO血型正、反不符的原因,并提出解決處理方案。本研究對(duì)41例ABO疑難血型標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果及產(chǎn)生原因進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2012年1月～2014年12月廣元市中心血站血型參比室收到的本血站血液檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室和本地區(qū)各臨床醫(yī)院ABO疑難血型標(biāo)本共41例。獻(xiàn)血者標(biāo)本26例,男11例,女15例,年齡24～51歲。醫(yī)院受血者標(biāo)本15例,男6例,女9例,年齡21～73歲，其中白血病2例，支原體肺炎3例，肺氣腫4例，自身免疫性溶血性貧血2例，消化道出血1例，外科手術(shù)者3例。

1.2 試劑 單克隆抗-A、抗-B、抗-AB、抗-A1、抗-H、抗球蛋白試劑（抗-IgG+C3d、單價(jià)抗-IgG）、A2紅細(xì)胞、篩檢紅細(xì)胞、譜細(xì)胞（由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供）、3%～5% A1、B及O型試劑紅細(xì)胞鹽水懸液由本站血型室自制。

1.3 方法

1.3.1 排除人為因素與技術(shù)錯(cuò)誤，詢問(wèn)、查閱病歷，了解患者病史（尤其輸血史、妊娠史、和家族史等）、臨床診斷、藥物治療情況[2-4]；對(duì)獻(xiàn)血者需查閱相關(guān)獻(xiàn)血檔案及以前血型檢測(cè)記錄。

1.3.2 嚴(yán)格按照“輸血相容性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)流程[5]”重新抽取血液新鮮標(biāo)本，確定血型定型試劑和試劑紅細(xì)胞有效性，洗滌紅細(xì)胞（必要時(shí)使用37℃洗滌，使用血清代替血漿），重新檢測(cè)ABO正反定型。

1.3.3 如仍為ABO正反定型不符，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果查找原因，設(shè)計(jì)針對(duì)性實(shí)驗(yàn)增加項(xiàng)目分析。

1.3.4 （1）出現(xiàn)減弱或缺失抗原的抗原反應(yīng)：I ABO亞型：①正定型增加抗-AB、抗-A1、抗-H；反定型：增加A2紅細(xì)胞；②吸收放散試驗(yàn)陽(yáng)性確認(rèn)紅細(xì)胞A、B抗原存在；③唾液型物質(zhì)檢測(cè)輔助鑒定ABO血型；④有條件可作血型基因檢測(cè)和家系調(diào)查。

ⅡA、B抗原減弱：①延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（放置≥30min）；②吸收放散試驗(yàn)及唾液型物質(zhì)檢測(cè)；③既往血型調(diào)查；④血型基因檢測(cè)；⑤臨床追蹤（一般病情緩解后血型抗原恢復(fù)）。

（2）抗體減弱或缺失：①延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，室溫下孵育15～30min；②增加血清量（紅細(xì)胞：血清比例1∶2或1∶3以上）；③于室溫及4℃檢查血清中的抗體，用A、B、O（或酶處理的A、B、O）及自身紅細(xì)胞進(jìn)行檢查（必要時(shí)需進(jìn)行冷抗體自身吸收）；④確定受血者年齡及臨床診斷（如新生兒、免疫病、輸血史、異型血漿輸注等）。

（3）冷自身抗體：①將血清和紅細(xì)胞分別在37孵育后再混合；②用37℃溫鹽水洗滌紅細(xì)胞；③45℃熱放散3min；④（抗體濃度較高時(shí)）巰基試劑(DTT)處理紅細(xì)胞[6]；⑤自身吸收去除血清中的自身冷抗體。

（4）室溫反應(yīng)的同種抗體：①用譜細(xì)胞做抗體鑒定；②選擇沒有相應(yīng)抗原的A、B細(xì)胞做反定型。

2 結(jié)果

通過(guò)對(duì)41例血液樣本進(jìn)行上述試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)造成ABO血型正反不符的主要原因?yàn)檠涂乖瓬p弱或缺失、冷自身抗體、抗體減弱或缺失及同種抗體。見表1～4。

表1 41例ABO血型正反不符檢測(cè)結(jié)果分析（n）

表2 41例ABO血型正反不符原因統(tǒng)計(jì)［n（%）］

表3 抗原所致ABO血型正反不符原因統(tǒng)計(jì)［n（%）］

表4 抗體所致ABO血型正反不符原因統(tǒng)計(jì)［n（%）］

3 討論

3.1 通常認(rèn)為，ABO疑難血型是指排指除人為因素、技術(shù)操作錯(cuò)誤外，血型試劑有效性確定的情況下，紅細(xì)胞定型與血清定型出現(xiàn)矛盾，不能呈現(xiàn)ABO血型抗原和抗體的互補(bǔ)結(jié)果，與年齡、疾病、遺傳、藥物、臨床治療等諸多因素有關(guān)。主要包括多或少的抗原、抗體反應(yīng)，抗原、抗體的不凝集和弱凝集結(jié)果。

3.2 在本文的41例正反定型不符樣本中，因抗原所致的17例（41.46%），其中亞型15例，抗原減弱或缺失2例；因抗體所致的24例（58.54%），其中冷自身抗體13例，抗體減弱或缺失6例，同種抗體5例。其原因分類為：（1）紅細(xì)胞（抗原）：包括A、B抗原亞型、血液?。ㄈ绨籽　⒐撬柙錾惓＞C合征）所致抗原減弱及機(jī)體含過(guò)多血型物質(zhì)（如腹腔腫瘤）導(dǎo)致凝集強(qiáng)度減弱等。其中亞型主要來(lái)自成人，未患使抗原、抗體減弱疾病，有明顯的血清學(xué)特征，抗原減弱或血清中出現(xiàn)意外抗體（抗-A1、抗-B），具有遺傳基礎(chǔ)；（2）血漿：先天性無(wú)ABO抗體；年齡（4個(gè)月內(nèi)嬰兒、老年人），低丙種球蛋白血癥，單采血漿或血漿置換治療及大量輸液等所致抗體減弱；體內(nèi)存在冷自身抗體，輸注異型血漿，ABO亞型產(chǎn)生的抗體與室溫反應(yīng)性同種抗體（主要為MN、Lewis、P血型系統(tǒng)IgM類同種抗體）所致的抗體增多等。

3.3 ABO血型疑難鑒定通過(guò)查閱相關(guān)資料與病史分析，設(shè)計(jì)針對(duì)性實(shí)驗(yàn)，通常均能獲得較為滿意結(jié)果。對(duì)獻(xiàn)血者的血液無(wú)論什么原因，只要明確ABO血型正反不符，需對(duì)其建立相關(guān)檔案，僅供血型研究之用。對(duì)正反定型不符的受血者，其疑難血型鑒定需要一定的時(shí)間，在ABO血型難以確定（如：ABO血型系統(tǒng)的亞型表型，或其它生理、病理因素引起的ABO血型鑒定困難），生命體征不平穩(wěn)，危及生命的急性失血的緊急情況下，須向受血者充分告知并取得其書面知情同意可首選主側(cè)交叉配血陰性的O型紅細(xì)胞與AB型血漿輸注；血型確認(rèn)后，若需繼續(xù)輸血治療，應(yīng)重新抽取受血者血液標(biāo)本做交叉配血，應(yīng)遵循輸注與受血者ABO同型的交叉配血陰性紅細(xì)胞，若交叉配血陽(yáng)性則應(yīng)輸注O型紅細(xì)胞的原則[7]，其中冷自身抗體可采用凝聚胺方法在37℃條件下配血，保溫輸注可有效提高受血者配血成功率[8]；產(chǎn)生同種抗體時(shí)，應(yīng)及時(shí)記錄并告知受血者，以后需輸血時(shí)，即使抗篩陰性也應(yīng)選擇相應(yīng)抗原陰性的血液輸用，避免引起回憶性免疫反應(yīng)導(dǎo)致溶血性輸血反應(yīng)發(fā)生的不良后果[9]。

［1］ 李勇，楊貴貞.人類紅細(xì)胞血型學(xué)實(shí)用理論與實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].北京：中國(guó)科學(xué)技術(shù)出版社,1999：126-127.

［2］ 蘭炯采，劉景漢，馬麗紅.輸血前試驗(yàn)中值得研討的若干問(wèn)題[J].中國(guó)輸血雜志，2013，26（1）：1-2.

［3］ 丁蘇鄂.抗體效價(jià)與同種自身抗體的檢測(cè)[A]//劉達(dá)莊.免疫血液學(xué)[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2002：39-217.

［4］ 蘭炯采，陳靜嫻，武平英，等.推薦疑難配血三步分析法[J].中國(guó)輸血雜志，2010，3（4）：43-44.

［5］ 臨床輸血規(guī)范流程協(xié)作組.輸血相容性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)流程[J].中國(guó)輸血雜志，2012，25（9）：815-817.

［6］ 李勇，楊貴貞.人類紅細(xì)胞血型學(xué)實(shí)用理論與實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].北京：中國(guó)科學(xué)技術(shù)出版社,1999,289-290.

［7］ 中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)輸血科醫(yī)師分會(huì)，中華醫(yī)學(xué)會(huì)臨床輸血學(xué)分會(huì).特殊情況緊急搶救輸血推薦方案[J].中國(guó)輸血雜志，2014，27（1）：1-2.

［8］ 陶翠華，張真路，王文武.高效價(jià)冷自身抗體致血型鑒定和交叉配血困難的處理方法[J].臨床血液學(xué)雜志，2011，24（4）：201-203.

［9］ 孔文兵，賴福才，彭道波，等.紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體與安全輸血[J].中國(guó)輸血雜志，2014，27（9）：929-930.

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.35.050

四川 628017 廣元市中心血站 (夏富益)