自體細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞聯(lián)合XELOX方案治療晚期胃癌的療效觀察

李慧杰，竇珊珊，王金爍

（1.河北省石家莊市第一醫(yī)院 腫瘤二科，河北 石家莊 050011；2.河北省石家莊市第三醫(yī)院腫瘤科，河北 石家莊 050011）

自體細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞聯(lián)合XELOX方案治療晚期胃癌的療效觀察

李慧杰1，竇珊珊1，王金爍2

（1.河北省石家莊市第一醫(yī)院 腫瘤二科，河北 石家莊 050011；2.河北省石家莊市第三醫(yī)院腫瘤科，河北 石家莊 050011）

目的觀察自體細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK）聯(lián)合XELOX方案治療晚期胃癌的療效。方法回顧性分析經(jīng)病理學(xué)確診的晚期胃癌患者65例。隨機(jī)分為兩組：觀察組32例，采用自體CIK細(xì)胞聯(lián)合XELOX方案化療；對(duì)照組33例，單獨(dú)采用XELOX方案化療。療程為2周期，治療結(jié)束后對(duì)兩組的近期療效、免疫功能、毒副反應(yīng)進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果觀察組客觀緩解率（ORR）為46.88%，對(duì)照組為39.39%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；觀察組疾病控制率（DCR）為78.13%，對(duì)照組為54.55%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。觀察組T細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD56升高，CD4+/CD8+比值上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。觀察組骨髓抑制、胃腸反應(yīng)、神經(jīng)毒性、手足綜合征不良反應(yīng)發(fā)生率低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論自體CIK細(xì)胞聯(lián)合XELOX方案治療晚期胃癌可以提高近期療效，增強(qiáng)患者免疫功能，減輕毒副作用，值得臨床推廣使用。

自體CIK細(xì)胞；化療；晚期胃癌

胃癌是我國(guó)常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率、死亡率僅次于肺癌、肝癌。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，每年死于胃癌的人數(shù)高達(dá)16萬(wàn)，占惡性腫瘤全部死亡人數(shù)的25%左右［1］。絕大多數(shù)胃癌患者就診時(shí)已處于中晚期，單純手術(shù)治療效果不佳，以化療為主的綜合治療成為晚期胃癌的主要治療手段。但化療同時(shí)會(huì)影響機(jī)體的免疫功能，導(dǎo)致許多腫瘤患者因不能耐受化療毒副反應(yīng)而中斷化療。近年來，隨著分子生物學(xué)和腫瘤免疫學(xué)的不斷發(fā)展，以免疫治療為基礎(chǔ)的生物治療模式越來越受到人們的重視。由細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokine-induced killer cells，CIK）作為一類新型的抗腫瘤效應(yīng)細(xì)胞，可直接殺傷腫瘤細(xì)胞，并可調(diào)節(jié)和增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，是繼淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞、細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞、腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞后出現(xiàn)的一類更為有效的殺瘤效應(yīng)細(xì)胞［2］。本研究采用自體 CIK細(xì)胞聯(lián)合 XELOX化療方案和單用XELOX化療方案治療晚期胃癌觀察臨床療效及免疫功能情況。

1　資料與方法

1.1一般資料

晚期胃癌患者65例為研究對(duì)象。其中男39例，女26例；年齡42～69歲，中位年齡52歲；按入院順序隨機(jī)分為兩組：觀察組32例，對(duì)照組33例。兩組患者在年齡、性別、病理類型及疾病分期等差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

病例選擇：①按新的胃癌國(guó)際分期法TNM分期：ⅢB～1V期；②所有病例均經(jīng)病理組織學(xué)證實(shí)；③失去手術(shù)機(jī)會(huì)，既往未接受任何方案化療和放療；④根據(jù)RESIST標(biāo)準(zhǔn)，至少有1個(gè)可測(cè)量病灶；⑤化療前血常規(guī)、心電圖、肝腎功能、血凝5項(xiàng)無明顯異常，無明顯化療禁忌，Karnofsky評(píng)分≥60分，預(yù)計(jì)生存期＞3個(gè)月；⑥血常規(guī)中單核細(xì)胞+淋巴細(xì)胞≥2.0×109/L，對(duì)生物制品無過敏反應(yīng)，無嚴(yán)重細(xì)菌、病毒感染，符合人體試驗(yàn)的倫理委員會(huì)制定的倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，均簽署知情同意書。

1.2方法

對(duì)照組：?jiǎn)渭兘邮躕ELOX方案化療，具體為：奧沙利鉑130 mg/m2第1天，靜脈滴注＞2 h；卡培他濱1 000 mg/（m2·d），口服，2次/d，1～14 d，休息7 d，于早餐、晚餐后服用，21 d為1個(gè)化療周期。

觀察組：所有患者在接受XELOX方案化療的基礎(chǔ)上，加用靜脈回輸自體CIK細(xì)胞治療。于化療前2天空腹?fàn)顟B(tài)下采集外周血50 ml，第3天行XELOX方案化療，化療方法同前。采集的外周血經(jīng)實(shí)驗(yàn)室離心、洗滌、純化后置于37℃、5%二氧化碳CO2培養(yǎng)箱中，在體外進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)14 d。當(dāng)CIK細(xì)胞總數(shù)達(dá)到5×109/L個(gè)以上、培養(yǎng)基經(jīng)細(xì)菌、霉菌培養(yǎng)為陰性后開始收集。采用生理鹽水洗滌，加入含5%清蛋白、IL-2等，最后加生理鹽水配成100 ml混懸液，于培養(yǎng)第15天將誘導(dǎo)培養(yǎng)的CIK細(xì)胞隔日分3次經(jīng)靜脈回輸給患者，每次輸注時(shí)間不超過1 h。第1個(gè)化療周期結(jié)束血常規(guī)恢復(fù)正常后，于第2個(gè)化療周期前2天，再次采集外周血單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)14 d，同時(shí)行第2周期化療，于培養(yǎng)第15天再次回輸，方法同前。1個(gè)周期化療聯(lián)合1個(gè)周期的過繼免疫治療為1個(gè)療程。化療期間每周檢測(cè)血常規(guī)、肝腎功能、心電圖1次，治療2個(gè)療程后評(píng)價(jià)療效。

自體CIK細(xì)胞輸注過程中注意事項(xiàng)：輸注前30 min給予肌內(nèi)注射苯海拉明20 mg以預(yù)防過敏反應(yīng)，如治療期間出現(xiàn)不可耐受的毒副反應(yīng)發(fā)生及時(shí)終止治療［3］。輸注過程中囑護(hù)士每隔10 min輕輕擠壓轉(zhuǎn)輸袋底部，使沉淀細(xì)胞重新懸浮。

化療不良反應(yīng)處理：①合并惡心、嘔吐時(shí)，給予格拉司瓊止吐及質(zhì)子泵抑制劑保護(hù)胃黏膜；②合并骨髓抑制時(shí)，給予重組人粒細(xì)胞集落刺激因子等對(duì)癥治療；③合并手足綜合征時(shí)，給予維生素B6、維生素B1對(duì)癥處理。所有患者均接受2個(gè)周期的化療，化療結(jié)束后進(jìn)行療效評(píng)價(jià)。

1.3觀察指標(biāo)

1.3.1腫瘤客觀療效評(píng)價(jià)所有患者均接受2個(gè)療程治療后進(jìn)行療效評(píng)價(jià)。根據(jù)美國(guó)國(guó)家癌癥研究所實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)（NCI-RECIST）對(duì)所有靶病灶和非靶病灶進(jìn)行療效評(píng)價(jià)［4］，完全緩解（CR）：所有靶病灶消失并維持4周以上；部分緩解（PR）：基線靶病灶長(zhǎng)徑總和縮小達(dá)30%以上并維持4周以上；疾病穩(wěn)定（SD）：基線靶病灶長(zhǎng)徑總和有縮小但未達(dá)PR，或有增大但未達(dá)進(jìn)展（PD）；疾病進(jìn)展（PD）：基線靶病灶長(zhǎng)徑總和增加20%或出現(xiàn)新病灶。

1.3.2檢測(cè)T細(xì)胞亞群所有患者于治療前和治療2個(gè)療程后抽取外周血，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)T細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD56。

1.3.3毒副反應(yīng)分析按照WHO標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià)，分為0～I(xiàn)V級(jí)。研究主要關(guān)注的毒副反應(yīng)為骨髓抑制、胃腸道反應(yīng)、神經(jīng)毒性、手足綜合征。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，計(jì)量資料滿足正態(tài)性要求，計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1近期療效

65例晚期胃癌患者均可評(píng)價(jià)療效。經(jīng)評(píng)價(jià)無患者獲得CR，觀察組PR 15例，SD 10例，PD 7例，客觀緩解率（ORR）為46.88%，疾病控制率（DCR）為78.13%；對(duì)照組PR 13例，SD 5例，PD 15例，客觀緩解率（0RR）為39.39%，疾病控制率（DCR）為54.55%。兩組客觀緩解率經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），疾病控制率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1　兩組患者近期療效比較

表2　兩組治療前后對(duì)T細(xì)胞亞群表達(dá)的影響 （x±s）

表3　不良反應(yīng)比較

2.2T淋巴細(xì)胞亞群的變化

兩組間比較，治療前各項(xiàng)指標(biāo)無明顯異常（P＞0.05）；觀察組治療后較治療前CD3+、CD4+、CD56升高，CD4+/CD8+比值上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；對(duì)照組治療前后差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

2.3兩組不良反應(yīng)比較

觀察組不良反應(yīng)發(fā)生率均低于治療組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

3　討論

腫瘤細(xì)胞與機(jī)體免疫系統(tǒng)之間的相互作用在胃癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸中起重要作用。當(dāng)機(jī)體的免疫平衡受到腫瘤細(xì)胞破壞時(shí)，機(jī)體失去對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖周期的調(diào)控，繼而抑制機(jī)體免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致機(jī)體免疫功能下降，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增長(zhǎng)。機(jī)體免疫功能下降主要表現(xiàn)為T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫功能下降或缺失［5］。有研究發(fā)現(xiàn)，晚期胃癌患者外周血T細(xì)胞克隆數(shù)目明顯低于早期及無轉(zhuǎn)移的胃癌患者，證實(shí)胃癌的進(jìn)展與T細(xì)胞免疫反應(yīng)減弱有關(guān)［6］。

腫瘤生物免疫治療是指從自體外周血中分離的單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)過體外激活和擴(kuò)增培養(yǎng)后輸入患者體內(nèi)，調(diào)節(jié)和增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的一種最新腫瘤治療技術(shù)，能夠較徹底清除腫瘤細(xì)胞。目前，腫瘤生物治療手段主要包括腫瘤基因治療、免疫治療和分子靶向藥物治療，已成為繼手術(shù)、放療、化療后的第4種治療模式，對(duì)改善胃腸道腫瘤的預(yù)后顯示出良好的應(yīng)用前景［7］。

CIK是一種新型免疫活性細(xì)胞，是過繼免疫療法中的殺瘤效應(yīng)細(xì)胞。將人外周血單個(gè)核細(xì)胞在體外經(jīng)多種細(xì)胞因子共同刺激后獲得的一群異質(zhì)細(xì)胞，其主要效應(yīng)細(xì)胞是CD3+CD56+細(xì)胞，兼具T淋巴細(xì)胞抗瘤活性和NK細(xì)胞非主要組織相容性抗原（MHc）限制性殺瘤特點(diǎn)［8］。CIK細(xì)胞抗腫瘤機(jī)制可能為：CIK細(xì)胞通過靶細(xì)胞表面分子與效應(yīng)細(xì)胞的受體結(jié)合釋放穿孔素等物質(zhì)導(dǎo)致癌細(xì)胞的裂解引起腫瘤細(xì)胞的直接殺傷；活化的CIK細(xì)胞分泌大量Th1類細(xì)胞因子，上調(diào)腫瘤細(xì)胞的MHC分子及其刺激分子的表達(dá)，激活腫瘤特異性CTL、自然殺傷（NK）細(xì)胞等，起到間接殺傷腫瘤細(xì)胞的作用［9-10］；此外，CIK細(xì)胞還可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。CIK細(xì)胞治療還具有增殖速度快、殺瘤活性高的特點(diǎn)。本研究采用自體CIK細(xì)胞聯(lián)合XELOX方案聯(lián)合治療晚期胃癌，在近期療效方面，觀察組客觀緩解率（ORR）為46.88%，疾病控制率（DCR）為78.13%；對(duì)照組ORR為39.39%，DCR為54.55%。兩組客觀緩解率經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，疾病控制率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明CIK細(xì)胞聯(lián)合化療可以提高腫瘤治療的效果。此外，自體CIK細(xì)胞體外擴(kuò)增明顯，觀察組患者治療后，外周血CD3+、CD4+、CD56升高，CD4+/CD8+比值上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；CD8+治療前后變化不大。而對(duì)照組治療前后外周血免疫細(xì)胞的變化不明顯。說明自體CIK細(xì)胞治療聯(lián)合化療可明顯改善晚期胃癌患者的免疫功能狀態(tài)，提高患者的免疫力，進(jìn)而抑制腫瘤細(xì)胞增長(zhǎng)。在毒副反應(yīng)反面，觀察組可明顯降低骨髓抑制、胃腸反應(yīng)、神經(jīng)毒性及手足綜合征發(fā)生率。說明自體CIK細(xì)胞聯(lián)合化療可減輕患者因化療毒副反應(yīng)所產(chǎn)生的痛苦，明顯改善患者的生活質(zhì)量。

本研究結(jié)果顯示，對(duì)于晚期胃癌患者，自體CIK細(xì)胞過繼免疫聯(lián)合化療可以緩解和穩(wěn)定瘤灶，控制瘤體發(fā)展，增強(qiáng)患者免疫功能，減輕化療毒副反應(yīng)，改善患者生活質(zhì)量。此外，自體CIK細(xì)胞在治療過程中主要不良反應(yīng)為發(fā)熱，無其他不良反應(yīng)，給予對(duì)癥處理后可恢復(fù)正常，患者耐受性好，具有較高的安全性，值得臨床推廣使用。

［1］馮丹，張穎一，傅強(qiáng)，等.不同化療方案一線治療老年晚期胃癌近期療效分析［J］.醫(yī)學(xué)研究雜志，2011，40（8）:64-67.

［2］WU C，JIANG J，SHI L，et al.Prospective study of chemotherapy in combination with cytokine-induced killer cells in patients suffering from advanced non-small cell lung cancer［J］.Anticancer Res，2008，28:3997-4002.

［3］郝一文，和予馨，周文玲.自體外周血單個(gè)核細(xì)胞制備CIK細(xì)胞治療惡性實(shí)體腫瘤應(yīng)用價(jià)值研究［J］.中國(guó)輸血雜志，2011，24（9）:746-749.

［4］THERASSE P.ARBUCK SG，EISENHAUER EA，et al.New guidelines to evaluate the response to treatment in solid tumors. European Organization for Research and Treatment of Cancer，National Cancer Institute of the United States，National Cancer Institute of Canada［J］.J Natl Cancer Inst，2000，92（3）:205-216.

［5］王婷婷，徐曼，耿衛(wèi)樸，等.B7-H4在人子宮頸癌的表達(dá)與腫瘤內(nèi)浸潤(rùn)T細(xì)胞亞群的相關(guān)性研究［J］.中國(guó)免疫學(xué)雜志，2012，28（9）:812-816.

［6］ZHANG XY，CHAN WY，WHITNEY BM，et al.T cell receptor Vbeta repertoire expression reflects gastric carcinoma progression ［J］.2001，101（1）:3-7.

［7］夏建川，翁德勝.生物治療在胃腸道腫瘤應(yīng)用中的進(jìn)展［J］.中華胃腸外科雜志，2013，10（1）:22-27.

［8］MA Y，ZHANG Z，TANG L，et al.Cytokine-induced killer cells in the treatment of patients with solid carcinomas:a systematic review and pooled analysis［J］.Cytotherapy，2012，14（4）:483-493.

［9］JIANG J，XU N，WU C，et al.Treatment of advanced gastric cancer by chemotherapy combined with autologous cytokine induced killer cells［J］.Anticancer Res，2006，26（3B）:2237-2242.

［10］MARTEN A，ZISKE C，SCHOTTKER B，et al.Interactions between dendritic cells and cytokine-induced killer cells lead to an activation of both populations［J］.Immunotherapy，2001，24: 502.

（張西倩 編輯）

Autologous cytokine-induced killer cells combined with XELOX regimen in treatment for patients with advanced gastric cancer

Hui-jie LI1，Shan-shan DOU1，Jin-shuo WANG2
（1.The Second Department of Oncology，the First Hospital of Shijiazhuang，Shijiazhuang，Hebei 050011，P.R.China；2.Department of Oncology，the Third Hospital of Shijiazhuang，Shijiazhuang，Hebei 050011，P.R.China）

【Objective】To observe the efficacy of autologous cytokine-induced killer（CIK）cells combined with XELOX regimen in the treatment for patients with advanced gastric cancer.【Methods】A total of 65 patients with advanced gastric cancer confirmed by pathology were retrospective analyzed.They were randomly divided into two groups with 32 cases in observation group and 33 cases in control group.The observation group was given CIK cells combined with XELOX regimen，while the control group was given XELOX regimen alone.The recent curative effect，immunity and side effects were compared between both groups after two cycles of chemotherapy.【Results】The Objective Response Rate（ORR）was 46.88%in the observation group and 39.39%in the control group；the difference between the two groups was not statistically significant （P＞0.05）.The Disease Control Rate（DCR）was 78.13%in the observation group and 54.55%in the control group，the difference between both groups was statistically significant（P＜0.05）.After treatment CD3+，CD4+，CD56 and the ratio of CD4+/CD8+were significantly increased in the observation group（P＜0.05）.The incidences of side effects in the observation group were obviously lower than those in the control group（P＜0.05）.【Conclusions】Autologous CIK cells combined with XELOX regimen could increase the curative effectand enhance the immunity of the patients with advanced gastric cancer，meanwhile reduce side effects.

autologous cytokine-induced killer cell；chemotherapy；advanced gastric cancer

R735.2

A

1005-8982（2015）33-0040-04

2015-05-04