紅嘴相思鳥小腸的常規形態學研究

張 莒 ，何 楊 ，徐遠航 ，馮亞坤 ，彭 西 *，袁施彬

（1.四川農業大學動物醫學院，四川 溫江 611130；2.西華師范大學生命科學學院，四川 南充 637000）

紅嘴相思鳥別名紅嘴玉、相思鳥、紅嘴綠觀音,是馳名中外的觀賞鳥類，是一種以昆蟲為主食的雜食性鳥類[1]。紅嘴相思鳥飼養困難，不易存活，且近年來隨著野外捕捉量過大而致數量驟減，《瀕危野生動植物種國際公約》（CITES）于2007年將其列為國家II級保護動物。

本試驗對幼齡紅嘴相思鳥的小腸各段進行了顯微觀察，旨在填補紅嘴相思鳥小腸形態學研究的空白，為紅嘴相思鳥的種群保護提供基礎研究資料。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 1、5、9日齡育雛期紅嘴相思鳥幼鳥以及成年紅嘴相思鳥各3只，均來源于西華師范大學紅嘴相思鳥人工馴繁實驗室。

1.1.2 試劑 HE染色的主要試劑：苦味酸、蘇木素、伊紅、甲醛、95%酒精、無水乙醇、二甲苯、石蠟、冰醋酸、明礬、氧化汞、中性樹膠。

1.1.3 主要儀器設備 切片機、一次性刀片、顯微照相系統、光學顯微鏡、恒溫干燥箱、電子天平、電熱恒溫水溫箱。

1.2 實驗方法

1.2.1 HE染色 分別取1、5、9日齡紅嘴相思鳥幼鳥以及成年紅嘴相思鳥的十二指腸、空腸和回腸于4%多聚甲醛溶液中固定24h以上，脫水包埋；采用連續切片（切片厚度5μm）進行改良HE法[2]染色，中性樹膠封片，然后于光學顯微鏡下觀察十二指腸、空腸和回腸的常規組織學結構。

1.2.2 測定指標 采用Olympus光學顯微鏡觀察，Nickon 3CCD顯微數碼照相系統采集圖像，并用Image Pro Plus 5.0圖像分析軟件測量小腸各段的絨毛高度、隱窩深度和肌層厚度。每只鳥每個組織取5張切片，每張切片隨機取5個視野在4×10倍視野下測量。

1.2.3 數據處理 數據均用SPSS16.0軟件進行統計分析，結果以平均數（）±標準差（SD）表示[3]；用單因素方差分析法比較不同日齡間的差異顯著性。

2 結果與數據分析

2.1 常規形態 紅嘴相思鳥的小腸分為十二指腸、空腸、回腸，小腸管壁由黏膜、黏膜下層、肌層和漿膜層4層構成，小腸黏膜上有環行的皺襞、腸絨毛和小腸腺。絨毛長，但無中央乳糜管，小腸腺短，黏膜下層薄。腸絨毛是腸上皮和固有層共同向腸腔突出形成的細小突起，相思鳥的腸絨毛多呈指狀、葉狀或柱狀，在十二指腸和空腸分布最密，向后則逐漸減少變稀疏。與其他鳥禽相似，相思鳥的黏膜下層無十二指腸腺。

2.2 腸道各層的變化規律 同日齡不同腸段的消化道組織學比較中，腸絨毛高度、隱窩深度、肌層厚度及絨毛隱窩比值都呈現出十二指腸＞空腸＞回腸的趨勢；同腸段不同日齡的消化道組織學比較中，十二指腸、空腸、回腸的腸絨毛高度、隱窩深度以及肌層厚度隨著日齡的增加而增長，絨毛高度與隱窩深度的比值則呈現下降的趨勢。詳細數據及差異性比較見表1。

3 討論

紅嘴相思鳥腸段較短，約為體長的0.94倍，藍翅希鹛和灰胸藪鹛的腸道分別為體長的0.85倍和0.94倍[4]。紅嘴相思鳥與藍翅希鹛和灰胸藪鹛同為雜食性鳥類，可見該類鳥腸道短，盲腸不發達，無明顯的消化優勢[5]。紅嘴相思鳥的腸絨毛無中央乳糜管，與環頸雉、東方白鸛和禽類相同[6-8]，各腸段未見腸絨毛分支現象，與西北冠鶴、環頸雉[6，9]不同，但與非洲鴕鳥[10]相同。

3.1 腸絨毛高度對紅嘴相思鳥消化功能的影響 紅嘴相思鳥與其他禽類一樣，小腸是消化和吸收營養的主要器官。小腸具有吸收和分泌兩種功能，吸收是絨毛的主要功能，而腸腺則具有分泌能力。研究結果顯示：同日齡下，紅嘴相思鳥的腸絨毛高度以十二指腸最高，其次為空腸，回腸最短；同腸段下，腸絨毛高度隨著日齡的增長而增加，且5日齡與1日齡相比絨毛高度成倍數增長。腸絨毛的數量、長度和形態結構在很大程度上決定了消化道的消化和吸收功能強弱[11-12]，當小腸絨毛的高度下降或形狀發生變化時[13-14]，就會減少絨毛單位面積內吸收細胞的數量，降低消化吸收的功能。Pluske et al.[15]也證實絨毛更高的豬能消耗更多的飼料。

表1 紅嘴相思鳥小腸各層的變化規律（±SD） μm

注:同列比較，上標不同大寫字母表示相同日齡不同腸段間差異極顯著（P<0.01），標不同小寫字母表示相同日齡不同腸段間差異顯著（P<0.05）；同行比較，上標不同大寫字母表示相同腸段不同日齡間差異極顯著（P<0.01），不同小寫字母表示相同腸段不同日齡間差異顯著（P<0.05）。

項目 腸道1日齡5日齡腸絨毛高度 十二指腸217.8±5.980AaDd 9日齡 雌 雄490.2±11.67AaCc空腸169.7±11.69BbDd 537.3±16.21AaBb 606.3±27.50AaAa 588.6±15.30AaAa 318.1±21.38BbCc回腸82.74±12.00CcDd 396.9±26.84BbBb 483.±24.66BbAa 458.7±22.92BbAa 141.7±7.101CcCc隱窩深度 十二指腸37.29±6.551AaCd 216.0±8.435CcBb 337.3±12.76CcAa 325.7±9.514CcAa 95.13±8.528AaBc空腸36.44±10.83AaCc 126.1±8.375AaBb 253.8±30.61AaAa 237.9±12.57AaAa 86.12±8.751AaBb回腸24.62±7.101AaDd 104.±3.179ABbBb 183.±15.52BbAa 164.9±15.80BbAa 52.00±1.729BbCc肌層厚度 十二指腸37.73±10.01AaBc 81.77±15.95BcBb 152.34.223BbAa 137.2±12.101BcAa 55.79±8.793AaAb空腸35.07±8.420AaBc 66.24±5.349AaAa 74.22±8.558AaAa 69.60±8.342AaAa 52.70±2.615AaAb回腸33.21±7.408AaCc 61.36±7.835AaAa 69.26±7.476AaAa 65.20±5.292AaAa 49.81±1.099AaBb絨毛長度與隱窩深度的比值十二指腸5.970±1.098AaAa 58.9±5.645Aa ABab 65.55±5.639AaAa 61.98±4.961AaAa 5.17±0.459Aa ABab空腸4.88±1.186AabAa 4.26±0.154AaBb 2.40±0.203AaCc 2.478±0.136AaCc 3.73±0.631Bb ABab回腸3.45±0.482AbAa 3.80±0.339ABb ABab 2.64±0.115AaBb 2.807±0.397AaBb 2.73±0.228Bc ABb 2.716±0.574Bc ABb 2.21±0.120AbBb 2.390±0.285AaBb

3.2 隱窩深度和肌層厚度對紅嘴相思鳥消化功能的影響 隱窩深度是腸上皮細胞成熟率的反應性指標，隱窩變深表明腸上皮細胞成熟率降低，變淺則表明成熟率上升[16]。同日齡下，紅嘴相思鳥十二指腸的隱窩深度大于空腸和回腸，且隨著日齡的增加隱窩深度呈現增長趨勢，這與Poole等[17]的研究結果一致。小腸各段的肌層厚度都隨著日齡的增加而逐漸增長。相同日齡比較，十二指腸是肌層厚度最大的腸段，回腸最薄。腸道肌層厚度越大，其蠕動能力越強，食糜與腸絨毛充分接觸的面越大，越有利于營養物質的吸收。

3.3 絨毛長度與隱窩深度的比值（V/C）對小腸吸收功能的影響 V/C比值下降，則消化吸收功能降低，動物生長發育受阻[18]。本研究顯示：絨毛長度與隱窩深度的比值在相同日齡下，十二指腸大于空腸和回腸；各個腸段的比值隨著日齡的增加逐漸降低；幼齡階段比值較大，成年階段比值較小。紅嘴相思鳥小腸各段的消化吸收能力由強到弱依次為：十二指腸、空腸和回腸；剛出殼的幼鳥的消化能力更強，之后隨著其生長速度減緩，V/C比值相應降低。目前，已有大量的研究發現，幼齡動物小腸絨毛的形態和發育在初乳、斷奶應激、日糧類型改變等因素的影響下均會發生改變。比如，斷奶應激或斷奶日糧中抗原活性物質導致的過敏反應可使絨毛變短、隱窩加深。筆者認為，隨著日齡增加，紅嘴相思鳥各腸段的V/C值下降以及1～5日齡腸絨毛高度的成倍增長，與營養來源和能量代謝的改變等因素有關；并且可推測，育雛期紅嘴相思鳥小腸結構和功能的完善以及機體的生長發育主要集中在5日齡內。Baranyiova et al.[19]有關肉仔雞的研究也證實了這一猜想。這為進一步探索育雛期紅嘴相思鳥小腸發育規律的機理奠定了基礎，同時為其人工繁養過程中制定合理的飼養方法提供了理論依據。

[1]鄭光美.中國鳥類分類與分布名錄[M].北京:科學出版社，2005:270-271.

[2]李愛紅.組織染色中HE染色法的改良[J].生物醫藥，2009，16（10）:54-73.

[3]李偉，李霖，吳孝兵，等.多疣壁虎腸道內分泌細胞的分布及形態學觀察[J].動物學雜志，2001（1）.

[4]徐會，郭延蜀.灰胸藪鹛消化系統形態的初步研究[J].四川動物，2006，25（4）:841-844.

[5]李福來.鳥類食性與消化道的特點[J].生物學通報，1984（2）:24-26.

[6]王麗萍，劉玉堂，肖向紅，等.環頸雉消化系統組織形態學觀察[J].動物學雜志，1994，29（3）:26-28.

[7]賈東平，彭克美，姜國彥，等.東方白鸛消化器官的組織學研究[J].野生動物，1991，64（6）:46-48.

[8]羅克.家禽解剖學與組織學[M].福州:福建科學技術出版社，1991:983.

[9]沈瑞蓮，劉清.西北冠鶴消化管的組織學觀察[J].動物學雜志，2000，35（3）:22-23.

[10]常展偉，楊玉榮，千國勝，等.非洲鴕鳥小腸組織學觀察[J].科學技術與工程，2008，8（6）:1541-1543.

[11]王繼鳳，陳耀星，王子旭，等.丁酸鈉對斷奶仔豬小腸黏膜形態結構的影響[J].中國獸醫科技，2005，35（4）:298-301.

[12]方之平，潘黔生，黃風杰，等.中華絨螯蟹消化道組織學及掃描電鏡研究[J].水生生物學報，2002，26（2）:136-141.

[13]董紅林，楊晶，單罷安，等.谷氨酰胺對氟尿嘧啶誘導的大鼠小腸結構及其飲食量變化的影響[J].中國病理生理雜志，1999，15（5）:446-446.

[14]常文環.黃霉素對肉仔雞促生長作用機理的研究[D].北京:中國農業大學，1996.

[15]Pluske JR，Williams IH，Aherne FX.Villous height and crypt depth in piglets in response to increases in the intake of cows′milk after weaning[J].Animal Science，1996，62（1）:145-158.

[16]李勇，蔡輝益，劉國華，等.地塞米松對肉仔雞空腸二糖酶活性及黏膜形態的影響[J].畜牧獸醫學報，2008，39（1）:48-52.

[17]Poole C A， Wong E A， McElroy A P， et al.Ontogenesis of peptide transport and morphological changes in the ovine gastrointestinal tract[J].Small Ruminant Research，2003，50（1）:163-176.

[18]宋恩亮，陳耀星，王子旭，等.肉犢牛小腸黏膜免疫相關細胞的數量變化研究[J].畜牧獸醫學報，2007，38（10）:1109-1114.

[19]Baranyiova E，Holman J.Morphological changes in the intestinal wall in fed and fasted chickens in 1st week after hatching[J].Acta Vet Brno，1976，45（3）:151-158.