6種殺菌劑對5種藍莓枝枯病原菌的室內毒力測定

岳清華+高勇+廖甜甜+鄭建立+董克鋒+姜惠鐵

摘 要：

葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea、棒狀擬盤多毛孢Pestalotiopsis clavispora、烏飯樹擬莖點霉Phomopsis vaccinii、尖孢炭疽菌Colletorichum acutatum、膠孢炭疽菌 Colletotrichum gloeosporioides 5種病原菌是目前引起山東青島膠南地區藍莓枝枯病的主要病原菌。本試驗采用菌絲生長速率法測定6種殺菌劑的毒力。結果表明，吡唑嘧菌酯、咯菌腈、苯甲·丙環唑對5種病原菌抑制作用較強，EC50值介于0.0035～2.2245 mg·L-1之間，對由該5種病原菌引起的藍莓枝枯病防效很好。

關鍵詞：藍莓枝枯病;殺菌劑;毒力測定

中圖分類號：S436.639 ?文獻標識號：A ?文章編號：1001-4942（2015）06-0101-03

Indoor Toxicity Test of Six Fungicides

against Five Pathogens of Blueberry Twig Dieback

Yue Qinghua1，2， Gao Yong1，2， Liao Tiantian1，2， Zheng Jianli1，2， Dong Kefeng1，2， Jiang Huitie1，2

（1.Qingdao Engineering Technology Center of Blueberry/Wallen Blueberry Limited Company of Joyvio，

Qingdao 266000， China; 2. Wallen Agricultural （Qingdao） Limited Company， Qingdao 266000， China）

Abstract Botryosphaeria dothidea， Pestalotiopsis clavispora， Phomopsis vaccinii， Colletorichum acutatum， Colletotrichum gloeosporioides were 5 main pathogens of blueberry twig dieback in Qingdao Jiaonan area of Shandong Province. The indoor toxicities of 6 fungicides against 5 pathogens were detected by mycelium growth rate method. The results showed that pyraclostrobin，fludioxonil，difenoconazole-propiconazole had relatively strong inhibition rate. The EC50 were between 0.0035～2.2245 mg·L-1. ?The control effects were excellent.

Key words Blueberry twig blight; Fungicide;Toxicity test

藍莓果實營養價值高，除一般的果糖、維生素外，還富含抗氧化劑、花青素和黃酮素，具有抗氧化、抗發炎、抗癌、降血壓、降膽固醇、降血脂等作用，是一種營養豐富且蘊含較大經濟價值的水果，市場上對藍莓的需求在不斷增長[1]。引種以來我國栽培面積逐年增加，僅山東青島地區栽種面積就已達到上萬畝。目前我國藍莓病害種類較少[2～5]，枝枯病已成為危害藍莓生產的重要病害。近幾年來，青島膠南地區藍莓園內，枝枯病的發生逐年加重，4～5月和7～9月是枝枯病發生的高峰期，枝條萎蔫枯死，花朵、果實干枯脫落，常造成幾十株至上百株樹體死亡，經過調查并進行了病原菌分離，經形態學及分子生物學方法鑒定，葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea[6]、棒狀擬盤多毛孢Pestalotiopsis clavispora[7]、烏飯樹擬莖點霉Phomopsis vaccinii[8]、尖孢炭疽菌Colletorichum acutatum[9]、膠孢炭疽菌 Colletotrichum gloeosporioides [9]5種病原菌是引起該地區枝枯病的主要病原菌。筆者選用幾種高效低毒的新型殺菌劑進行室內毒力測定，篩選效果較好者，以防治該病害。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

供試5種菌株從山東青島膠南地區藍莓園內枝枯病枝中分離得到，經形態學及分子生物學測序鑒定后使用。菌株目前保存在青島藍莓工程技術中心微生物實驗室。

1.2 供試藥劑

供試藥劑見表1。

表1 供試藥劑

藥劑名稱英文通用名劑型生產廠家

250 g/L 吡唑嘧菌酯Pyraclostrobin乳油德國巴斯夫股份有限公司

24% 腈苯唑Myclobutanil懸浮劑美國陶氏益農公司

25 g/L 咯菌腈Fludioxonil懸浮種衣劑瑞士先正達作物保護有限公司

500 g/L 氟啶胺Fluazinam懸浮劑日本石原產業株氏會社

250 g/L 嘧菌酯Azoxystrobin懸浮劑瑞士先正達作物保護有限公司

300 g/L 苯甲·丙環唑Difenoconazole

-propiconazole乳油深圳諾普信農化股份有限公司

1.3 室內毒力測定方法

采用菌絲生長速率法[10]測定6種殺菌劑對葡萄座腔菌、烏飯樹擬莖點霉、棒狀擬盤多毛孢、尖孢炭疽菌、膠孢炭疽菌的毒力，用無菌水將供試藥液稀釋成一系列梯度濃度（20、10、5、1、0.2、0.05 mg/L）后配制含藥PDA平板。取培養4 d的病原菌菌落，打取直徑為6 mm的菌餅，用接種針將菌餅反面移植到含藥培養基上，每皿接入一個菌餅，以加入無菌水的培養基為對照。每處理重復3次。接菌后將培養皿倒置放入28℃恒溫培養箱中黑暗培養，5 d后采用十字交叉法測量菌落直徑大小，計算抑制率。并以藥劑質量濃度的對數值為橫坐標，各處理濃度的生長抑制率的幾率值為縱坐標，求出毒力回歸方程、EC50值和相關系數[11]，根據EC50值評價殺菌劑毒力大小。endprint

2 結果與分析

2.1 6種殺菌劑對B. dothidea的毒力測定

從表2可以看出，吡唑嘧菌酯的EC50值最小，為0.0081 mg·L-1;其次為苯甲·丙環唑、咯菌腈、腈苯唑，EC50值分別為0.0155、0.0177、0.2716 mg·L-1;氟啶胺、嘧菌酯的EC50值較大，分別為8.9653、321.6918 mg·L-1。結果表明，吡唑嘧菌酯對B. dothidea的抑制效果最好，嘧菌酯的抑制效果最差。

表2 6種殺菌劑對B. dothidea的毒力回歸方程

藥劑名稱毒力回歸方程EC50

（mg·L-1）相關系數

（r）

250 g/L 吡唑嘧菌酯Y=1.2459X+7.60740.00810.9426

24% 腈苯唑Y=0.2507X+5.14190.27160.9497

25 g/L 咯菌腈Y=1.0243X+6.79440.01770.9502

500 g/L 氟啶胺Y=0.3626X+6.10508.96530.9541

250 g/L 嘧菌酯Y=0.3293X+4.1743321.69180.9522

300 g/L 苯甲·丙環唑Y=1.2841X+7.32370.01550.9644

2.2 6種殺菌劑對P. vaccinii的毒力測定

從表3可以看出，吡唑嘧菌酯的EC50值最小，為0.0406 mg·L-1;其次為腈苯唑、咯菌腈、苯甲·丙環唑、氟啶胺，EC50值分別為1.5568、1.8358、2.2245、4.5628 mg·L-1;嘧菌酯的EC50值最大，為59.1282 mg·L-1。結果表明，吡唑嘧菌酯對P. vaccinii的抑制效果最好，嘧菌酯的抑制效果最差。

表3 6種殺菌劑對P. vaccinii的毒力回歸方程

藥劑名稱毒力回歸方程EC50

（mg·L-1）相關系數

（r）

250 g/L 吡唑嘧菌酯Y=1.0913X+6.51830.04060.9548

24% 腈苯唑Y=0.3782X+6.81831.55680.9585

25 g/L 咯菌腈Y=0.2786X+6.04091.83580.9411

500 g/L 氟啶胺Y=0.8296X+7.77154.56280.9521

250 g/L 嘧菌酯Y=0.312X+4.447259.12820.9548

300 g/L 苯甲·丙環唑Y=0.8225X+8.00442.22450.9550

2.3 6種殺菌劑對P. clavispora的毒力測定

從表4可以看出，吡唑嘧菌酯的EC50值最小，為0.0085 mg·L-1;其次為咯菌腈、苯甲·丙環唑，EC50值分別為0.0424、0.0452 mg·L-1;氟啶胺、嘧菌酯、腈苯唑的EC50值較大，為7.8400、8.9232、14.3743 mg·L-1。結果表明，吡唑嘧菌酯對P. clavispora的抑制效果最好，腈苯唑的抑制效果最差。

2.4 6種殺菌劑對C. acutatum的毒力測定

從表5可以看出，苯甲·丙環唑的EC50值最小，為0.0035 mg·L-1;其次為咯菌腈、吡唑嘧菌酯、嘧菌酯、腈苯唑、氟啶胺，EC50值分別為0.0038、0.0145、0.0369、0.0802、0.0984 mg·L-1。結果表明，6種藥劑對尖孢炭疽菌均有較強的抑制作用，其中苯甲·丙環唑對C. acutatum的抑制效果最好，氟啶胺的抑制效果稍差。

表4 ?6種殺菌劑對P. clavispora的毒力回歸方程

藥劑名稱毒力回歸方程EC50

（mg·L-1）相關系數

（r）

250 g/L 吡唑嘧菌酯Y=1.2555X+7.59890.00850.9487

24% 腈苯唑Y=0.0514X+4.940514.37430.9457

25 g/L 咯菌腈Y=1.0139X+6.39200.04240.9552

500 g/L 氟啶胺Y=0.2498X+6.77507.8400 0.9507

250 g/L 嘧菌酯Y=0.1152X+6.38818.92320.9107

300 g/L 苯甲·丙環唑Y=1.4781X+6.98770.04520.9605

表5 6種殺菌劑對C. acutatum的毒力回歸方程

藥劑名稱毒力回歸方程EC50

（mg·L-1）相關系數

（r）

250 g/L 吡唑嘧菌酯Y=1.3629X+7.50410.01450.9550

24% 腈苯唑Y=0.1304X+5.14290.08020.9479

25 g/L 咯菌腈Y=0.3044X+5.73840.00380.9494

500 g/L 氟啶胺Y=0.5931X+5.59730.09840.9515

250 g/L 嘧菌酯Y=0.1377X+5.19740.03690.9432

300 g/L 苯甲·丙環唑Y=1.0588X+7.59950.00350.9612

2.5 6種殺菌劑對C. gloeosporioides的毒力測定

從表6可以看出，氟啶胺的EC50值最小，為0.0075 mg·L-1;其次為吡唑嘧菌酯、苯甲·丙環唑、咯菌腈，EC50值分別為0.0079、0.0267、0.2167 mg·L-1;腈苯唑、嘧菌酯的EC50值大，分別為97 296.0565、54 858.7470 mg·L-1。結果表明，氟啶胺對C. gloeosporioides的抑制效果最好，腈苯唑的抑制效果最差。endprint

表6 6種殺菌劑對C. gloeosporioides的

毒力回歸方程

藥劑名稱毒力回歸方程EC50

（mg·L-1）相關系數

（r）

250 g/L 吡唑嘧菌酯Y=1.243X+7.61000.00790.9509

24% 腈苯唑Y=0.0756X+4.622997296.0565 0.9387

25 g/L 咯菌腈Y=0.3245X+5.21550.21670.9549

500 g/L 氟啶胺Y=0.4838X+6.02820.00750.9494

250 g/L 嘧菌酯Y=0.1883X+4.107654858.7470 0.9507

300 g/L 苯甲·丙環唑Y=1.3888X+7.18560.02670.9598

3 結論與討論

本試驗測定了6種殺菌劑對5種藍莓枝枯病原菌的室內毒力，針對引起藍莓枝枯病的病原菌較多、在田間發病癥狀相似的特點，應選擇殺菌譜廣、高效低毒的農藥進行防治。根據本試驗結果，吡唑嘧菌酯、咯菌腈、苯甲·丙環唑對5種病原菌均有很好的抑制作用，EC50值介于0.0035～2.2245 mg·L-1之間。并且3種藥作用方式各有不同，吡唑嘧菌酯為新型甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，作用方式為抑制病原菌線粒體呼吸;咯菌腈為新型吡咯類保護性殺菌劑，作用方式為抑制病原菌葡萄糖磷?；嘘P的轉移，抑制真菌菌絲體的生長;苯甲·丙環唑由兩種三唑類殺菌劑組合而成，作用方式為抑制病原菌的麥角甾醇生物合成，破壞真菌細胞膜的生理作用。3種農藥均具有抗菌譜較廣、高效低毒的特點，為避免病原菌產生抗藥性，建議3種農藥輪換使用。

目前國內針對藍莓枝枯病還沒有系統性的防治措施報道。防治藍莓枝枯病除了要加強田間水肥管理、及時清理銷毀病枝外，適時使用殺菌劑化學防治也是十分快速有效的手段。枝枯病菌潛伏期長，多在溫度適宜、天氣潮濕的季節發病，為預防枝枯病害的發生，應在春季和夏季產果后提早噴灑藥劑進行預防。本試驗中篩選的3種殺菌劑室內試驗對病原菌有很好的抑制作用，在田間影響因素較多，其效果還需田間驗證。

參 考 文 獻：

[1]

陳介甫，李亞東，徐哲. 藍莓的主要化學成分及生物活性[J]. 藥學學報，2010，45（4）：422-429.

[2] 高海霞，趙洪海，姜惠鐵，等. 青島地區藍莓病蟲害調查初報[J]. 中國園藝文摘，2009（12）：62-65.

[3] 竇連登，張紅軍，黃國輝，等. 遼寧藍莓病害的發生調查[J]. 中國果樹，2009，3（2）：64-65.

[4] 田小青，黎春剛. 上海郊區藍莓果園病蟲害的調查及防治對策[J]. 江蘇農業科學，2012，40（4）：147-148.

[5] 楊燕林，和志嬌，王朝文，等. 云南藍莓病蟲害調查及防治方案[J]. 植物保護，2014，40（4）：153-156.

[6] 徐成楠，周宗山，張紅軍，等. 藍莓枝干潰瘍病病原鑒定[J]. 植物病理學報，2012，42（5）：532-535.

[7] 趙洪海，岳清華，梁晨. 藍莓擬盤多毛孢枝枯病的病原菌[J]. 菌物學報，2014，33（3）：577-583.

[8] 岳清華，趙洪海，梁晨，等. 藍莓擬莖點枝枯病的病原[J]. 菌物學報，2013，32（6）：959-966.

[9] 徐成楠，王亞南，胡同樂，等. 藍莓炭疽病病原菌鑒定及致病性測定[J]. 中國農業科學，2014，47（20）：3992-3998.

[10]慕立義. 植物化學保護研究方法[M]. 北京：中國農業出版社，1994.

[11]楊軍，高智謀，張紹陽，等. 10種殺菌劑對葡萄黑痘病菌的抑菌活性及聯合毒力研究[J]. 安徽農業大學學報，2005，32（4）：518-522.endprint