豐 蕾,楊 帆,李彩霞,徐 珍,凃 政,李萬水,胡 蘭,*
(1.公安部物證鑒定中心 法醫遺傳學公安部重點實驗室,北京 100038;2.上海市公安局刑偵總隊,上海 200083)
單細胞分離檢驗技術在法醫學中的應用研究
豐 蕾1,楊 帆2,李彩霞1,徐 珍1,凃 政1,李萬水1,胡 蘭1,*
(1.公安部物證鑒定中心 法醫遺傳學公安部重點實驗室,北京 100038;2.上海市公安局刑偵總隊,上海 200083)
法醫單細胞分離檢驗技術是微量混合DNA樣本檢驗最有效的方法之一。 常規的單細胞分離檢驗技術包括單細胞分離、單細胞裂解、PCR擴增、數據分析。本文將詳細介紹單細胞分離檢驗技術原理和應用進展,同時展望了單細胞測序在法醫DNA的應用前景。近5年來,單細胞分離、全基因組擴增和二代測序技術的結合而產生的單細胞測序技術,將 為法醫遺傳學檢測提供一種全新的技術和思路,尤其為微量混合生物樣品檢驗提供全新的技術手段。
法醫遺傳學;單細胞分離檢驗技術;微量混合樣本;單細胞測序;二代測序
生物體是由單個細胞構成的,人體大約由不同組織的3.72×1013個細胞組成[1]。微量混合DNA的檢驗一直都是法醫DNA檢驗的難題。雖然通過計算的方法可以對混合DNA圖譜拆分解釋[2,3], 但是對于復雜混合圖譜,比如一個成分占主要時次要成分的檢驗,或者3人以上混合圖譜的解釋就非常困難。細胞分離是一種獲得單一個體DNA分型相對直接的方式,低至幾個細胞甚至單個細胞的單細胞檢驗技術[4]也是微量DNA檢驗的有效途徑。以高通量為特點的第二代測序技術(next generation sequencing,NGS),能夠對幾十萬條DNA同時測序,實現了快速、高效、低成本的測序[5]。……