離心處理—氣相色譜法測定黃瓜中多種有機氯農(nóng)藥殘留

羅俊霞　申戰(zhàn)賓　樊彥超等

摘要： 建立了離心處理-固相萃取-氣相色譜法-電子捕獲檢測器同時測定黃瓜中的六氯苯等9種農(nóng)藥殘留的方法。該方法是將樣品用乙腈提取，經(jīng)SPE小柱（弗羅里硅土）凈化，采用電子捕獲檢測器測定，外標(biāo)法定量，分別對黃瓜進(jìn)行3個水平（其中7種為0 02、0 04、0 08 mg/kg，敵稗和丁草胺為0 04、0 08、0 16 mg/kg ）的添加回收試驗，平均添加回收率為57 1%～134 8 %，RSD為2 4%～13 0%，方法的最低檢測限為0 000 9～0 027 4 mg/kg，在103的范圍內(nèi)線性較好，相關(guān)系數(shù)r≥0 998 7。試驗結(jié)果表明，本方法靈敏度高、重復(fù)性好，可以作為蔬菜中這幾種農(nóng)殘的測定方法。9種農(nóng)藥在黃瓜基質(zhì)中存在不同程度的基質(zhì)效應(yīng)，其中敵稗和丁草胺存在較強的基質(zhì)抑制效應(yīng)，其他幾種存在較弱的基質(zhì)增強效應(yīng)。

關(guān)鍵詞： 黃瓜；農(nóng)藥；除草劑；電子捕獲檢測器；外標(biāo)法；基質(zhì)效應(yīng)

中圖分類號： TQ450 2+63 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號：1002-1302（2015）08-0299-03

近年來為了節(jié)省勞力，有機氯類除草劑在生產(chǎn)中被越來越多的使用，有機氯農(nóng)藥是一類曾被世界各國廣泛使用的高效、廣譜殺蟲劑，雖然禁用多年，但由于其半衰期長、不易降解，所以長期積存于植物和土壤中，至今仍有檢出 [1-2]。七氯、艾氏劑、狄氏劑、異狄氏劑是氯化環(huán)戊二烯殺蟲劑，六氯苯和氯硝胺是殺菌劑，敵稗和丁草胺是除草劑，胺菊酯是擬除蟲菊酯，這些農(nóng)藥對動物具有致畸、致癌和致突變等毒性 [3]。目前檢測這類農(nóng)藥較普遍使用氣相色譜法 [4-6]、氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法 [7-8]；劉長武等在標(biāo)準(zhǔn)NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》 [9]中列舉了用GC-ECD檢測的農(nóng)藥種類，但沒有具體的測定數(shù)據(jù)。為了快速對這幾種農(nóng)藥進(jìn)行測定，筆者進(jìn)行了固相萃取-氣相色譜法-電子捕獲檢測器同時測定黃瓜中的六氯苯等多種農(nóng)藥殘留的試驗，經(jīng)過在0 02、0 04、0 08 mg/kg（敵稗和丁草胺為0 04、0 08、0 16 mg/kg）3個水平下的添加回收試驗，結(jié)果表明該方法能滿足日常檢測的需要。

1 試驗部分

1 1 試驗儀器與試劑

瓦里安CP3800，配8400自動進(jìn)樣器和ECD檢測器，其色譜柱為VF-5，30 m×0 32 mm，液膜厚0 25 μm；WH-861型渦旋混合器；天孚牌電子計數(shù)天平（DT 500A）；德國Heidolph SilentCrusher M型均質(zhì)機；美國N-EVAPTM-112型氮吹儀；德國Hettich Universal 302R離心機。

乙腈、正己烷、丙酮為CNW品牌試劑（HPLC級）；NaCl為天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心生產(chǎn)的綠環(huán)牌試劑（分析純級）；農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品七氯（heptachlor）、艾氏劑（aldrin）、狄氏劑（dieldrin）、異狄氏劑（endrin）、六氯苯（hexachlorobenzene）、氯硝胺（dichloran）、敵稗（propanil）、丁草胺（butachlor）和胺菊酯（tetramethrin），濃度均為100 mg/kg，由農(nóng)業(yè)環(huán)境保護(hù)科研檢測所生產(chǎn)。

1 2 GC條件

進(jìn)樣口溫度：220 ℃；檢測器溫度：300 ℃；柱溫箱：程序升溫，起始溫度150 ℃，保持0 5 min，以20 ℃/min升至200 ℃，保持2 min，以 0 8 ℃/min升至210 ℃，保持2 min，以 50 ℃/min 升至260 ℃，保持10 min ；柱流量：2 mL/min；分流比：1 ∶ 10；進(jìn)樣量：1 μL。

1 3 樣品前處理

稱取25 g樣品于250 mL廣口瓶中，在廣口瓶中加入5～7 g NaCl，再加入50 mL乙腈，依照NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》 [9]的方法，用均質(zhì)機在8 000～12 000 r/min下均質(zhì)提取2 min，之后一并倒入2支50 mL的離心管中，放入離心機中在5 000 r/min下離心5 min，移取上層乙腈相10 mL濃縮至近干，用2 mL正己烷定容，之后用弗羅里硅土SPE小柱凈化，再次濃縮至近干，用正己烷定容至5 mL 。根據(jù)保留時間定性，用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液校正，外標(biāo)法定量，單點校正。

1 4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

分別準(zhǔn)確吸取“1 1”節(jié)中標(biāo)準(zhǔn)溶液各1 mL，置10 mL容量瓶中，用正己烷定容至10 mL，成為10 mg/kg 的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。用黃瓜樣品基質(zhì)稀釋成低濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液上機測定。

2 結(jié)果與分析

2 1 基質(zhì)效應(yīng)

9種化合物的色譜圖、用樣品空白基質(zhì)配制的標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖和黃瓜空白基質(zhì)的色譜圖分別見圖1、圖2、圖3，由圖1、圖2、圖3可以看出，黃瓜樣品基質(zhì)中存在一些干擾物，在VF-5的柱子上和六氯苯、敵稗和丁草胺分不開，從而對這3種物質(zhì)的測定存在較大的影響。其中在敵稗和丁草胺的保留時間附近均有1個較大的倒峰，對二者存在嚴(yán)重的基質(zhì)抑制效應(yīng)，基質(zhì)抑制程度隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增大而減小；在六氯苯的保留時間附近有1個較小的正峰，使六氯苯有較弱的基質(zhì)增強效應(yīng)。其他幾種農(nóng)藥也存在不同程度的基質(zhì)增強效應(yīng)，有待于進(jìn)一步研究。

2 2 回收率和精密度試驗

分別稱取25 g黃瓜空白樣品，添加9種農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液和單標(biāo)，使添加后六氯苯、氯硝胺、七氯、艾氏劑、狄氏劑、異狄氏劑、胺菊酯的濃度分別為0 02、0 04、0 08 mg/kg，使敵稗和丁草胺的濃度分別為0 04、0 08、0 16 mg/kg，按照“13”節(jié)中的步驟進(jìn)行樣品前處理，每個水平的試樣重復(fù)測定12次，根據(jù)測定結(jié)果計算添加回收率，在12個添加回收中棄去2個離群值，結(jié)果見表1。試驗結(jié)果（表1）表明，本方法的回收率范圍為57 1%～134 8%，精密度為2 4%～130%。六氯苯、氯硝胺、七氯、艾氏劑、狄氏劑、異狄氏劑、胺菊酯的檢出限在0 08 mg/kg的水平下，敵稗和丁草胺在 0 16 mg/kg 的水平下來計算，計算公式為：

DL=[SX（]3NC[]h[SX）] [10]。

式中：DL代表方法的檢測限（方法可檢測到的最小樣品量）；N代表基線噪聲；C代表樣品濃度；h代表相應(yīng)的農(nóng)藥的峰高。

計算結(jié)果表明，9種化合物的檢測限為0 000 9～0 027 4 mg/kg， 本方法的回收率、精密度和檢測限均滿足多種農(nóng)藥殘留檢測分析的要求。

2 3 檢測限和線性范圍

筆者在試驗中分別用正己烷配制了0 001、0 01、0 1、1、10 mg/kg 5個濃度水平的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，9種農(nóng)藥的線性回歸方程、線性范圍和相關(guān)系數(shù)見表2 。 因為敵稗和丁草胺的響應(yīng)較低，在0 001 mg/kg濃度水平下幾乎可以視為沒有響應(yīng)，它們在0 01～10 mg/kg的范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)分別是0 998 8 和0 999 3，其他7種農(nóng)藥在0 001～10 mg/L范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)均小于0 01～10 mg/L的相關(guān)系數(shù)，線性均不如在0 01～10 mg/L的范圍內(nèi)的線性好，在0 001～1 mg/kg的范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)均大于0998 5；另外用黃瓜空白基質(zhì)配制了0 01、002、0 04、008、0 16 mg/kg 5個濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)品，同樣，敵稗在001、0 02 mg/kg 的濃度水平下，因為基質(zhì)效應(yīng)，可以視為沒有響應(yīng)，在0 04～0 16 mg/kg的范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)是0991 2，其他8種農(nóng)藥在0 01～0 16 mg/kg的范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)均大于0993 5。可見，用黃瓜空白基質(zhì)作為介質(zhì)配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液的線性范圍不如用正己烷試劑作為介質(zhì)配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液，但在一定的范圍內(nèi)其線性可以滿足多種農(nóng)藥殘留分析的要求；同時，在日常檢測工作中為了避免基質(zhì)效應(yīng)帶來的影響，可以用相近濃度的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液來進(jìn)行校正。

3 結(jié)論

本方法采用固相萃取的前處理技術(shù)，建立了氣相色譜-電子捕獲檢測器測定黃瓜中多種有機氯農(nóng)藥殘留量的方法，獲得了滿意的分離效果和檢測靈敏度，方法的準(zhǔn)確度、精密度、線性范圍、相關(guān)系數(shù)、檢出限等均能滿足多種農(nóng)藥殘留分析的要求。但是黃瓜基質(zhì)在VF-5的柱子上對敵稗和丁草胺的影響較大，建議在檢測工作中用相近濃度的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液來進(jìn)行校正。

參考文獻(xiàn)：

[1] 郝麗麗，薛 健 銀杏葉中18種有機氯農(nóng)藥的多殘留分析[J] 分析化學(xué)，2006，34（2）：231-234

[2]申中蘭，蔡繼寶，高 蕓，等 基質(zhì)固相分散-加速溶劑萃取-氣相色譜法測土壤中有機氯農(nóng)藥殘留[J] 分析化學(xué)，2005，33（9）：1318-1320

[3]苗建材，王淑英，張作芳，等 最新農(nóng)藥使用技術(shù)手冊[J] 哈爾濱：黑龍江科學(xué)技術(shù)出版社，1992：12

[4]石 杰，楊 靜，劉慧民，等 超聲波提取-固相萃取凈化-氣相色譜法分析煙草中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥及氟節(jié)胺殘留[J] 分析試驗室，2010，29（4）：22-24

[5]朱學(xué)良，戚向陽，岳晶念，等 基質(zhì)固相分散氣相色譜電子捕獲檢測器測定葡萄酒中5種農(nóng)藥殘留[J] 分析化學(xué)，2007，35（2）：259-262

[6]萬益群，陳宗保 土壤中多種有機氯及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的 GC-ECD 測定[J] 分析試驗室，2006，25（9）：60-63

[7]周相娟，趙玉琪，許 華 氣相色譜-質(zhì)譜法測定化妝品中16種有機氯農(nóng)藥[J] 分析試驗室，2013，32（12）：74-78

[8]顏鴻飛，黃志強，張 瑩，等 氣相色譜-質(zhì)譜法測定茶葉中29種酸性除草劑的殘留量[J] 色譜，2009，27（3）：288-293

[9]劉長武，劉瀟威，劉鳳芝，等 NY/T 761—2008 蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定[S] 2008

[10] 劉虎威 氣相色譜方法及應(yīng)用[J] 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2000：29