銀杏酚酸在土壤中的殘留動態

摘要： 采用高效液相色譜法測定銀杏酚酸在土壤中的殘留動態，研究晴天、人工模擬降雨2種情況下銀杏酚酸在土壤中的殘留量，分析了銀杏酚酸在土壤中的殘留動態。結果表明，銀杏酚酸在施入土壤后可迅速降解，施藥5 d后基本降解完畢。晴天和人工模擬降雨條件下在土壤中的降解半衰期分別為0 42、0 37 d。按施藥劑量2 000 g/hm2施藥4、5次，銀杏酚酸在晴天和人工模擬降雨條件下5 d后的殘留量分別為0 21～0 23 mg/kg和未檢出，7 d后的殘留量都為未檢出；按施藥劑量4 000 g/hm2施藥4、5次，銀杏酚酸在晴天和人工模擬降雨條件下5 d后殘留量分別為009～0 11 mg/kg和未檢出至0 06 mg/kg，7 d后的殘留量都為未檢出。人工模擬降雨條件下銀杏酚酸在土壤中降解更快一些。

關鍵詞： 高效液相色譜法；銀杏酚酸；土壤

中圖分類號： X592 文獻標志碼： A

文章編號：1002-1302（2015）08-0374-02

銀杏酚酸（ginkgolic acids，簡稱GA）存在于銀杏外種皮、果肉、葉中。銀杏外種皮中銀杏酚酸含量最高。銀杏酚酸屬漆樹酸類化合物，具有殺蟲抑菌作用。銀杏酚酸是6-烷基或6-烯基水楊酸的衍生物，含有5種銀杏酸（C13 ∶ 0、C15 ∶ 0、C15 ∶ 1、 C17 ∶ 1、C17 ∶ 2），這類化合物對很多酶及微生物有抑制作用 [1-5]，外種皮作為植物源農藥開發應用前景較好。大量使用農藥必然會對土壤生物化學過程產生一定影響，這將給環境尤其是土壤帶來污染，農藥活性成分在自然界中的殘留動態是研究農藥對農產品和環境影響的重要依據。本研究探討不同濃度銀杏酚酸水劑在土壤中的殘留動態，旨在為安全合理使用評估藥劑提供依據。

1 材料與方法

1 1 儀器與試劑

Thar CO2超臨界萃取儀，UltiMate 3000型高效液相色譜儀，Dionex C18 250 mm×4 6 mm色譜柱，D2025W攪拌器，320-S 型精密酸度計，AB204-S型電子天平。其他均為常規儀器。銀杏外種皮購自江蘇省泰興市。銀杏酚酸標準品為上海順勃生物工程有限公司產品（純度≥98 5%）。試劑甲醇為色譜純，石油醚、乙醇、氯化鈉等均為分析純。

1 2 方法

1 2 1 消解動態試驗 精確稱取經清洗去雜及粉碎干燥的銀杏外種皮，置于超臨界CO2萃取裝置中，在設定的萃取條件下進行萃取（萃取壓力250 bar，萃取溫度40 ℃，萃取時間 5 h，CO2流量20 g/min，夾帶劑為乙醇），降壓進入分離器中，將銀杏酚酸分離出來。萃取物經UltiMate 3000型高效液相色譜儀檢測，萃取物中銀杏酚酸總含量為91 3%，得率為427%。供試土壤采自揚州市農戶田塊。將取自0～10 cm土層的土壤搗碎、過篩，自然風干后備用。風干后用無底瓷罐盛裝土壤，將瓷罐埋入土中，罐口高于地面5 cm，整個試驗過程中確保土壤保持一定水分，設3次重復，采用銀杏酚酸水劑 2 000 g/hm2 對土壤進行施藥，以不施藥作為空白對照，分別在施藥后0 5、1 0、2 0、3 0、5 0 d進行采樣，每罐3個點的樣品混合。采用四分法對土壤樣品進行縮分，縮分后不少于1 kg，過200目篩，將不能及時分析測試的樣品置于-20 ℃冰柜中保存備用。人工模擬降雨的土壤第1次施藥后，每天每罐土壤噴灑100 mL水作為人工降雨，取樣測量方法同上。

1 2 2 最終殘留試驗 對設施栽培白菜進行藥劑處理，設3次重復，以銀杏酚酸水劑2 000 g/hm2及4 000 g/hm2劑量4、5次噴霧施藥，共3個處理（包括空白對照），9個小區，每處理重復3次，每小區面積10 m2，對白菜施藥，施藥間隔期為 3 d，分別距末次施藥1、3、5、7 d隨機采集土壤樣品，縮分后不少于1 kg，將不能及時分析測試的樣品置于-20 ℃冰柜中保存備用。人工模擬降雨的土壤最后1次施藥后，用瓷罐盛裝，每天每罐噴灑100 mL水作為人工降雨，取樣測量方法同上。

1 3 樣品前處理

準確稱取30 0 g土壤試樣，加入60 mL甲醇，超聲處理15 min，真空抽濾（加8 g NaCl），濾渣用10 mL甲醇分2次洗滌，將濾液轉入分液漏斗中，分4次加入100 mL石油醚，每次25 mL，劇烈搖晃3 min，靜置10 min，用旋轉蒸發儀濃縮至少量（約5 mL），用甲醇溶解定容，待測。

1 4 液相色譜測定條件 [6]

色譜柱：Dionex C18 250 mm×4 6 mm色譜柱；流動相為甲醇-水溶液（85 ∶ 15）；檢測波長：310 nm；流量：1 0 mL/min；進樣量：5 μL；柱溫：25 ℃；保留時間為11 9～25 7 min，進樣量：20 μL。

2 結果與分析

2 1 檢測方法的線性范圍和回收率

2 1 1 檢測方法的線性范圍 采用外標法定量，以甲醇為溶劑，配制成質量體積比為0 25、0 50、1 0、2 0、4 0 μg/mL的銀杏酚酸標準溶液，以銀杏酚酸質量濃度為橫坐標，以相應的峰面積為縱坐標繪制標準曲線。銀杏酚酸標準曲線的線性回歸方程為y=3 517x-1 426，相關系數為0 999 93。

2 1 2 回收率與檢出限 在土壤空白樣品中分別添加銀杏酚酸標樣0 10、0 60、1 20 mg/kg，每個濃度進行5次回收試驗。結果表明，銀杏酚酸在土壤中的平均回收率為 92 51%～97 45%，變異系數為1 63%～3 59%。土壤中銀杏酚酸最低檢出限為0 01 mg/kg。此方法靈敏度、準確度、精密度均符合農藥殘留分析要求。

2 2 殘留動態

由表1可知，晴天條件下施藥后銀杏酚酸在土壤中的原始積累量是21 03 mg/kg，2 d后降解率達80%以上，隨后降解變得相對緩慢。3 d后土壤中銀杏酚酸殘留量為 0 18 mg/kg。人工模擬降雨條件下，銀杏酚酸在土壤中降解得更快，1 d后降解率達70%以上，5 d后未檢出。這可能是由于隨著土壤含水量的增加，銀杏酚酸向土壤下滲濾。同時，土壤中含水量的增加會使土壤中的微生物生長速度加快，從而加快了農藥的微生物降解。由表2可知，施藥后間隔時間與土壤中的銀杏酚酸殘留量呈指數關系，殘留動態曲線符合方程Ct=C0e -kt。式中Ct為施藥后間隔t d土壤中農藥殘留量；C0為施藥后原始沉積量；t為施藥后天數，k為消解速率常數。晴天及人工模擬降雨條件下土壤中銀杏酚酸的半衰期分別為0 42、0 37 d。endprint

2 3 銀杏酚酸在土壤中的殘留

從表3可以看出，按施藥劑量2 000 g/hm2施藥4、5次，銀杏酚酸在晴天和人工模擬降雨條件下5 d后的殘留量分別為0 21～0 23 mg/kg和未檢出，7 d后的殘留量都為未檢出；按施藥劑量4 000 g/hm2施藥4、5次，銀杏酚酸在晴天和人工模擬降雨條件下5 d后殘留量分別為0 09～0 11 mg/kg和未檢出至0 06 mg/kg，7 d后的殘留量都為未檢出。

3 結論

銀杏外種皮中的銀杏酚酸是殺蟲、驅蟲的活性物質，銀杏酚酸防治蚜蟲、菜粉蝶、薊馬、甜菜夜蛾效果良好 [7-8]。 本研究結果表明，晴天和雨天條件下使用銀杏酚酸水劑，按照使用劑量2 000 g/hm2，銀杏酚酸在土壤中的半衰期分別為0 42、0 37 d，3 d消解率可達90%以上，說明銀杏酚酸屬于易降解農藥。按施藥劑量2 000 g/hm2施藥4、5次，銀杏酚酸在晴天和人工模擬降雨條件下5 d后的殘留量分別為0 21～0 23 mg/kg和未檢出，7 d后的殘留量都為未檢出；按施藥劑量4 000 g/hm2施藥4、5次，銀杏酚酸在晴天和人工模擬降雨條件下5 d后殘留量分別為0 09～0 11 mg/kg和未檢出至0 06 mg/kg，7 d后的殘留量都為未檢出。人工模擬降雨條件下銀杏酚酸在土壤中降解更快一些，這可能是由于隨著土壤含水量的增加，銀杏酚酸向土壤下滲濾。另外，土壤中含水量增加會使土壤中微生物生長速度加快，從而加快農藥的微生物降解。土壤的物理性質、有機質含量等也影響銀杏酚酸在土壤中的降解。

參考文獻：

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