兒童哮喘急性發作支氣管肺泡灌洗液病毒病原學分析＊

潘俊秀 范楚平 范如艷 陳禮娟 肖志兵 劉 嬋

南華大學附屬郴州市第一人民醫院 郴州市兒童哮喘防治技術研發中心，湖南省郴州市 423000

哮喘是當今世界最常見的慢性疾病之一，是由多種炎癥細胞參與的氣道可逆性慢性炎癥，易感者對各種激發因子具有氣道高反應性，引起氣道縮窄。表現為反復發作的喘息、呼吸困難、胸悶或咳嗽等癥狀。呼吸道病毒感染是誘發哮喘急性發作的最重要因素，病毒感染誘發哮喘急性發作的機制主要有：產生氣道炎性因子；產生特異性IgE，形成Ⅰ型變態反應；損傷氣道上皮，引起氣道高反應。本研究應用直接免疫熒光法（DIF）對哮喘急性發作患兒支氣管肺泡灌洗液進行7種病毒抗原檢測分析，探討病毒感染與兒童哮喘急性發作相關性。

1 對象與方法

1.1 對象 實驗組為2013－2014年本院住院兒童哮喘急性發作患兒，共67例，對其支氣管肺泡灌洗液進行呼吸道病毒檢測，男35例，女32例。年齡0～5歲，其中＜6個月32例，～2歲26例，～5歲9例。對照組為2013－2014年本院門診隨診兒童哮喘緩解期患兒，共73例，對其支氣管肺泡灌洗液進行呼吸道病毒檢測，男39例，女34例。年齡0～5歲，其中＜6個月33例，～2歲29例，～5歲11例。診斷依據中華醫學會兒科分會呼吸學組頒布的標準[1，2］。兩組在年齡構成、性別以及病程之間差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 兩組患兒一般資料比較（±s）

表1 兩組患兒一般資料比較（±s）

組別 例數 年齡（歲） 性別（男／女） 病程（月）對照組 73 2.73±1.05 39／34 3～26（5）實驗組 67 2.84±1.02 35／32 3～25（6）

1.2 方法

1.2.1 標本采集。實驗組患兒入院給予常規抗哮喘治療，癥狀緩解1d后進行支氣管肺泡灌洗，對照組患兒隨診當天進行支氣管肺泡灌洗，兩組皆取第二管支氣管肺泡灌洗液1～2ml然后保存于6～8ml PBS的離心管充分混合，立即送檢[3～6］。

1.2.2 病毒病原學分析。樣本懸液于2 500r／min離心5min，收集細胞做細胞涂片，應用直接免疫熒光法檢測呼吸道7種常見病毒：RSV、ADV、IFA、IFB、PIVⅠ、PIVⅡ、PIVⅢ。

1.2.3 試劑與儀器。試劑盒為美國DHI公司生產，采用日本Olympus cx21型熒光顯微鏡。

2 結果

2.1 兩組支氣管肺泡灌洗液病毒檢出率比較 見表2。實驗組病毒檢出率明顯高于對照組（P＜0.01），以RSV檢出率最高，提示病毒感染與兒童哮喘急性發作有密切相關性，RSV是引起兒童哮喘急性發作的主要病毒。

2.2 不同年齡兒童哮喘急性發作支氣管肺泡灌洗液病毒檢測分布情況 見表3。不同年齡兒童哮喘急性發作病毒檢測分布情況提示6個月以下年齡組陽性率最高，為84.4%，其中RSV陽性率高達59.4%，提示病毒感染與兒童哮喘急性發作有密切相關性，RSV是引起嬰幼兒哮喘急性發作的主要病毒。

表3 不同年齡兒童哮喘急性發作支氣管肺泡灌洗液病毒檢測分布情況（n）

3 討論

哮喘是常見的慢性疾病之一，全世界大約有3億哮喘患者。哮喘患病率在不同人群介于1%～3%，并且在大多數國家仍在上升，尤其在年幼兒童。2002年我國兒童哮喘流行病學調查顯示患病率為0.5%～3%，個別地區則高達5%，哮喘已成為嚴重的公眾衛生問題，從而引起世界各國的極大關注[7］。支氣管哮喘是由嗜酸性粒細胞、肥大細胞和T淋巴細胞等多種炎癥細胞參與的氣道可逆性慢性炎癥，這種氣道炎癥使易感者對各種激發因子具有氣道高反應性，并可引起氣道平滑肌痙攣、黏膜腫脹、分泌增加。表現為反復發作的喘息、呼吸困難、胸悶或咳嗽等癥狀。常在夜間或清晨發作、加劇，常常出現廣泛多變的可逆性氣流受限，使患者肺功能不同程度下降[8～11］。呼吸道病毒感染是誘發哮喘的最重要因素，年齡越小相關性越大，嬰幼兒高達90%的哮喘發作與呼吸道病毒感染有關。引起兒童呼吸道感染的病毒種類主要有呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒、腺病毒等，這些病毒感染與哮喘發病密切相關。病毒感染誘發哮喘的機制主要有：產生氣道炎性因子；產生特異性IgE，形成Ⅰ型變態反應；損傷氣道上皮，引起氣道高反應。Johnson等[12］研究表明RSV感染患兒呼吸道上皮細胞和炎性細胞浸潤，混合纖維素、痰液，且存在黏膜腫脹，從而導致呼吸道明顯阻塞，易導致喘息。

病毒感染與兒童哮喘急性發作有密切相關性，RSV感染是引起兒童哮喘急性發作的主要病毒，與患兒年齡、季節、地區差異、氣候有一定關系。田曼等[13］報告南京地區哮喘病毒檢出率為43.5%，RSV感染是兒童哮喘急性發作的主要病毒，1月和2月為感染高峰，嬰幼兒最常見。劉春艷等[14］報告北京地區兒童RSV感染平均年齡為4個月。趙明波等[15］報告昆明地區兒童RSV感染發病年齡1歲以下占57.05%，10～12個月為感染高峰。Lee等[16］報告臺灣地區兒童RSV感染高峰為春季和秋季。提示兒童RSV感染狀況與地區差異及各地氣候不同影響到RSV的繁殖有關。

本研究顯示實驗組支氣管肺泡灌洗液病毒檢出率明顯高于對照組，以RSV檢出率最高，提示病毒感染與兒童哮喘急性發作有密切相關性，RSV是引起哮喘急性發作的主要病毒。不同年齡兒童哮喘急性發作支氣管肺泡灌洗液病毒檢測分布情況提示6個月以下年齡組陽性率最高，為84.4%，其中RSV陽性率高達59.4%，提示病毒感染與兒童哮喘急性發作有密切相關性，RSV是引起兒童哮喘急性發作的主要病毒，特別是6個月以下兒童更為明顯。與相關文獻報道鼻咽拭子病毒檢測具有一致性[17，18］。

綜上所述，病毒感染與兒童哮喘急性發作有密切相關性，RSV感染是引起嬰幼兒哮喘急性發作的主要病毒。

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