HIF-1α表達對晚期非小細胞肺癌患者化療敏感性的影響*

王勝德危芬蘭

（1. 江西省鷹潭市人民醫院鐵路分院腫瘤科 鷹潭 335000；2. 江西省鷹潭市人民醫院腫瘤科 鷹潭 335000）

HIF-1α表達對晚期非小細胞肺癌患者化療敏感性的影響*

王勝德1**危芬蘭2

（1. 江西省鷹潭市人民醫院鐵路分院腫瘤科 鷹潭 335000；2. 江西省鷹潭市人民醫院腫瘤科 鷹潭 335000）

目的：探討HIF-1a表達對晚期非小細胞肺癌（NSCLC）患者的化療敏感性。方法：選取我院收治的晚期NSCLC化療患者92例，采用免疫組織化學法檢測HIF-1a的表達，分析HIF-1a表達與化療療效的關系。結果：HIF-1a主要表達于肺癌細胞胞核及胞質，呈明顯的異質性；HIF-1a不同表達患者間化療有效率和疾病控制率比較差異無統計學意義（P＞0.05）。結論：HIF-1a的表達狀態與化療近期療效無明顯相關性，尚不能確定為晚期NSCLC患者化療療效的預測因子。

缺氧誘導因子-1a 非小細胞肺癌 化療 敏感性

肺癌是全球累積危險性最高的惡性腫瘤，其在所有的惡性腫瘤中預后最差，而其中超過80%的肺癌為非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）[1]。惡性腫瘤細胞生長迅速、代謝快，腫瘤組織血流灌注相對減少，造成腫瘤內局部組織有顯著的缺氧區域 ，且腫瘤細胞缺氧程度可在一定程度上反應惡性程度及局部復發情況[2]。本研究通過檢測晚期NSCLC患者缺氧誘導因子-1a（hypoxia induction factor-1a，HIF-1a）表達水平，探討其與化療療效的相關性。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取我院2009年4月-2011年4月收治的非小細胞肺癌患者92例，按2003年第六版美國癌癥聯合委員會（American Joint Committee on Cancer，AJCC）對非小細胞肺癌的分期法[3]均為Ⅳ期，經支氣管鏡取組織病理確診，入組前未行放療及化療。排除低氧性疾病，如慢性阻塞性肺病、肺心病、哮喘急性發作、呼吸衰竭等。其中男58例，女34例；年齡39~75歲，平均（55.8±6.2）歲；中鱗癌48例，腺癌38例，大細胞癌6例；肺內轉移42例，肝臟轉移22例，腎上腺轉移12例，遠處淋巴結轉移12例，軟組織轉移4例。

1.2 方法

所有患者化療采用吉西他濱聯合順鉑的方案：吉西他濱1000 mg/m2，靜脈滴注30~60 min，第l、8、15天；順鉑100 mg/m2，靜脈滴注，30~60 min，每28 d重復。化療期間常規給予水化和止吐治療，并嚴密觀測患者血常規，若白細胞降低至（1.0~2.0）×109/L和（或）血小板降低至（50~75）×109/L時，則將吉西他濱劑量減少25%。根據患者情況順利給予6~8個療程后判定療效。

1.3 觀察指標

采用免疫組化法檢測患者非小細胞肺癌組織中HIF-1a的表達情況，鼠抗人HIF-1a單克隆抗體和免疫組化檢測盒均購自福州邁新生物技術開發公司。以PBS代替一抗為陰性對照，已知陽性切片作為陽性對照，實驗操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。判定標準[4]：綜合染色強度和陽性細胞數量進行評定：① 著色強度根據無著色、淺黃色、棕色、棕褐色分別為0~3分；② 陽性細胞數量：觀察10個高倍鏡視野（10×40倍）陽性細胞所占比例，≤5%為0分，6%~25%為1 分，26%~50% 為2分，51%~75%為3分，≥76%為4分。表達強度為兩項計分乘積：陰性（－）：0~1分，弱陽性（＋）：4~7分，陽性（＋＋）：5~8分，強陽性（＋＋＋）：＞8分。

1.4 療效判定標準[5]

完全緩解（complete response，CR）：所有病灶完全消失；部分緩解（partial response，PR）：腫塊縮小≥50%；穩定(stable disease，SD)：腫塊縮?。?0%或增大＜25%；進展（pmgressive disease，PD）：一個或多個病灶增大≥25%或出現新的病變。

1.5 統計學處理

采用SPSS 13.0軟件分析數據。計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有顯著性意義。

2 結果

HIF-1a在NSCLC組織中主要表達于胞核，表現為程度不等的染色，呈黃色或棕黃色顆粒，胞質中偶有表達。92例患者中HIF-1a陽性54例，陽性表達率為58.70%，其中化療有效率為40.74%，疾病控制率為77.78%；HIF-1a陰性38例，陽性表達率為41.30%，其中化療有效率為42.11%，疾病控制率為73.68%。不同表達患者間化療有效率和疾病控制率比較差異無統計學意義（表1）。

表1 HIF-1a在NSCLC組織中的表達[例（%）]

3 討論

目前，晚期NSCLC患者的化療藥物與腫瘤細胞基因及細胞因子之間可發生相互作用，基因和各種細胞因子的表達情況與臨床治療療效密切相關。乏氧是腫瘤細胞的基本特征，其可影響腫瘤細胞的生長、分裂、增生、增殖、轉移以及對化療、放療的敏感性。其中造成對多種化療藥物耐藥的機制為大多數抗癌藥物主要作用于快速分裂相的細胞，而缺氧使腫瘤細胞停滯在G1期，對化療藥物不敏感[6]。此外缺氧增加細胞內參與解毒和藥物代謝的酶類表達，加快化療藥物的代謝排出，從而降低了治療效果。

HIF-1a是人體細胞內的一類介導缺氧適應性反應的轉錄因子，其結構中的氧依賴性降解結構域成為細胞對生長微環境中氧變化的靈敏感受器。HIF-1a可與核內的多種基因轉錄啟動子上游的乏氧反應元件結合，其在維持腫瘤細胞的新血管生成、能量代謝、促進腫瘤增殖和轉移中具有重要作用[7-8]。HIF-1a是瘤內乏氧的內源性標記物，正常細胞中HIF-1a被泛素化蛋白水解酶降解而保持較低的穩定濃度。當細胞處于乏氧狀態時，HIF-1a泛素化降解過程減少導致其堆積在細胞漿，并進入細胞核與核內的多種基因轉錄的啟動子上游的乏氧反應元件結合，表達迅速增強，促進腫瘤細胞的局部浸潤轉移、細胞過度和永久性增殖、細胞增殖周期比率改變、腫瘤新生血管的生成等，并因氧氣與營養物質缺乏而使細胞抵抗凋亡[9-10]。相關研究證實，在NSCLC組織中，腫瘤迅速增殖引起的局部缺氧和抑癌基因突變均可能使腫瘤組織中的HIF-1a呈過度表達，而腫瘤組織內的基質細胞和鄰近的正常組織則未見HIF-1α的表達[11-12]。HIF-1a表達預示腫瘤化療抵抗，其誘導產物如血管內皮生長因子、碳酸纖酶、乳酸脫氫酶、等均直接與化療抵抗相關[13]。

本研究結果顯示，HIF-1a主要表達于肺癌細胞胞核及胞質，呈明顯的異質性。但HIF-1a不同表達患者間化療有效率和疾病控制率比較差異無統計學意義。由此表明，HIF-1a的表達狀態與化療近期療效無明顯相關性，尚不能確定為晚期NSCLC患者化療療效的預測因子?？紤]與研究樣本偏小有關，具體相關性尚有待于進一步探討。

[1] She J, Yang P, Hong Q, et al. Lung cancer in China: challenges and interventions [J]. Chest, 2013, 143(4): 1117-1126．

[2] Furrukh M, Burney IA, Kumar S, et al．Improving outcomes in advanced lung cancer：maintenance therapy in non-smallcell lung carcinoma[J]. Sultan Qaboos Univ Med J, 2013, 13(1): 3-18．

[3] Pugh CW. Oxygen sensing in cancer[J]. Ann Med, 2003, 35(6): 380-390．

[4] 奚蕾, 沈偉生, 曹向明. 非小細胞肺癌患者化療前后血清腫瘤標志物、HIF-1α、VEGF的變化及相關性研究[J]. 成都醫學院學報, 2014, 9(2): 139-142．

[5] Park S, Ha SY, Cho HY, et al. Prognostic implications of hypoxia-in-ducible factor-1α in epidermal growth factor receptor-negative non-small cell lung cancer [J]. Lung Cancer, 2011, 72(1): 100-107.

[6] 趙航, 劉東屏. HIF-1α與實體性腫瘤發生及臨床關系的研究進展[J]. 現代腫瘤醫學, 2013, 21(9): 2134-2137．

[7] 谷依學, 李漢賢, 王漢群, 等. 缺氧誘導因子1α及血管內皮生長因子的表達與胃癌生物學行為的關系[J]. 南華大學學報（醫學版）, 2005, 33(1): 13-15.

[8] Singh-Gupta V, Joiner MC, Runyan L, et al. Soy isoflavones augment radiation effect by inhibiting APE1/Ref-1 DNA repair activity in non-small cell lung cancer [J]. J Thorac Oncol, 2011, 6(4): 688-698．

[9] Jackson AL, Zhou B, Kim WY. HIF, hypoxia and the role of angiogenesis in non-small cell lung cancer[J]. Expert Opin Ther Targets, 2010, 14(10): 1047-1057．

[10] Kuo WH, Shih CM, Lin CW, et al. Association of hypoxia inducible factor-1α polymorphisms with susceptibility to nonsmall-cell lung cancer[J]. Transl Res, 2012, 159(1): 42-50.

[11] 沈紅, 崔進, 秦湧, 等. 晚期非小細胞肺癌患者化療前后血清HIF-1α和VEGF的變化及臨床意義[J]. 現代腫瘤醫學, 2015, 23(6): 791-793.

[12] 夏冬平, 曾玉蘭, 宋松林, 等. 非小細胞肺癌患者介入治療前后血清HIF-1a、VEGF的變化及相關性研究[J]. 現代腫瘤醫學, 2012, 20(6): 1201-1203．

Effect of HIF-1α expression on the chemotherapeutic sensitivity of patients with advanced non small cell lung cancer*

WANG Shengde1**, WEI Fenlan2
(1. Department of Oncology, Railway Branch, The People’s Hospital of Yingtan City, Jiangxi Province, Yingtan 335000, China;
2. Department of Oncology, The People’s Hospital of Yingtan City, Jiangxi Province, Yingtan 335000, China)

Objective: To investigate the effect of the expression of HIF-1a on the chemotherapeutic sensitivity of patients with advanced non-small cell lung cancer (NSCLC). Methods: Ninety-two cases of patients with advanced NSCLC chemotherapy in our hospital were selected. The expression of HIF-1a was detected by immunohistochemistry and the relationship between the expression of HIF-1a and the efficacy of chemotherapy was analyzed. Results: HIF-1a was mainly expressed in the cytoplasm and nucleus of lung cancer cells, and its expression showed significant heterogeneity. There was no significant difference in the effective rate and the disease control rate between patients with different expression (P>0.05). Conclusion: The status of HIF-1a expression was not correlated with the short-term efficacy of chemotherapy, and is not a predictor for the efficacy of chemotherapy in patients with advanced NSCLC.

hypoxia inducible factor-1a; non small cell lung cancer; chemotherapy; sensitivity

醫藥論壇

R730.23; R734.2

B

1006-1533(2015)17-0041-02

2015年江西省衛生計生委科技計劃（項目編號：20151555）

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王勝德，主治醫師。研究方向：非小細胞癌。E-mail：wsd20021290@163.com

2015-04-26）