急性應激對大鼠胸腺指數和血清CORT、胸腺肽濃度的影響

崔春紅 孫兆霞 李偉 姜鶴

[摘要] 目的 研究急性應激對大鼠胸腺指數和血清糖皮質激素（CORT）和胸腺肽濃度的影響。方法 大鼠隨機分為對照組和應激組。應激組大鼠給予急性束縛應激6 h。應激結束后取材，計算胸腺指數，酶聯免疫吸附測定法檢測血清CORT和胸腺肽的含量。 結果 應激組大鼠胸腺指數為（1.99±0.15）mg/g，與對照組（2.06±0.24）mg/g比較差異有統計學意義（P<0.05）；應激組大鼠血清CORT濃度為（89.05±4.30）pg/mL，與對照組（67.82±4.76）pg/mL比較，差異有統計學意義（P<0.05）；應激組大鼠血清胸腺肽的含量為（0.66±0.06）×103pg/mL，與對照組（1.46±0.08）×103pg/mL比較差異有統計學意義（P<0.05）。結論 急性應激會降低大鼠胸腺指數，抑制胸腺肽的分泌功能。

[關鍵詞] 急性應激；胸腺；ACTH；胸腺肽

[中圖分類號] R4 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2015）08（c）-0079-02

Effects of Acute Stress on Thymus Index and Concentration of Serum CORT and Thymopeptide in Rats

CUI Chun-hong1， SUN Zhao-xia2， LI Wei1， JIANG He1

1. Department of Histology and Embryology， Shandong Wanjie Medical School， Zibo， Shandong Province， 255213 China；

2. Department of Anatomy， Shandong Wanjie Medical School， Zibo， Shandong Province， 255213 China

[Abstract] Objective To study the influence of acute stress on thymus index and concentration of serum CORT and thymopeptide in rats Methods Rats were randomly divided into control group and stress group. Acute restraint stress was imposed 6h in the stress group， and then the rats were killed and serum extracted for CORT and thymosin. We calculated the thymus index and determined the concentration of serum CORT and thymopeptide using enzyme-linked immunosorbent assay. Results The thymus index was （1.99±0.15）mg/g in the stress group and （2.06±0.24）mg/g in the control group， between which a statistically significant difference can be found， P﹤0.05； the CORT levels of stress group was（89.05±4.30）pg/ml in the stress group and（67.82±4.76）pg/ml in the control group， and the difference was statistically significant， P﹤0.05； the thymosin levels of serum was （0.66±0.06）×103pg/ml in the stress group and（1.46±0.08）×103pg/ml in the control group， and the difference was statistically significant， P﹤0.05. Conclusion Acute stress can affect the thymus index and inhibit the secretion of the thymosinin in rats.

[Key words] Acute Stress； Thymu； ACTH； Thymosin

應激在我們的日常生活中非常普遍，幾乎每一個人都會遇到某些應激源的作用。過強或持續時間比較長的應激對機體是有害的，影響機體的生理狀態和免疫系統[1]，應激對機體健康的影響越來越受到重視。機體在應激狀態下，多出現以交感神經-腎上腺髓質軸和下丘腦-垂體-腎上腺皮質軸反應為主的變化，使血清腎上腺糖皮質激素含量增加，這常常被視為應激的標志[2-3]。

胸腺是機體重要的中樞免疫器官，是T淋巴細胞發育、成熟的場所，對機體外周淋巴器官的發育和免疫應答的發生起著重要的調節作用[4]。應激反應可導致胸腺的退化萎縮[5]，并伴有免疫功能受損。目前，對應激反應中血清胸腺肽濃度變化的研究較少。該研究試圖通過急性應激探討應激對大鼠胸腺指數和血清CORT以及胸腺肽濃度的影響，為進一步探討應激影響機體免疫功能的機制與途徑奠定基礎。測定胸腺指數旨在了解應激對大鼠胸腺體積、重量的影響；檢測應激后血清胸腺肽濃度，旨在了解應激對胸腺肽的影響，為進一步探討胸腺肽在應激影響胸腺結構過程中的作用及其機制提供理論依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

實驗于2014年7—8月間以12只Wistar雄性大鼠（山東大學動物實驗中心提供）為研究對象，大鼠體重180±10 g，6只一籠合養（籠子尺寸為約為500 mm×400 mm×300mm）。在實驗室中在環境適應5 d，晝/夜周期為12 h/12 h（光照時間為08：00～20：00），室內溫度為（23±2）℃，濕度為50%左右。適應期內所有動物自由攝食和飲水。適應期后對大鼠進行分組，采用隨機數表法選取6只作為正常對照組，不作任何實驗處理；另6只作為應激組。

1.2 方法

室溫下將大鼠置入帶有通氣孔但可以限制其各個方向活動的束縛器中，應激刺激持續6 h。應激結束后2%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，后剖開腹腔，自腹主動脈抽取血液5 mL，室溫靜置30 min后3500 r·min-1離心15 min取上層血清，-20 ℃保存；剖開胸腔取出胸腺，清除表面附著的脂肪等其他組織，用濾紙吸干凈其表面的血液，后用電子天平稱量其重量。

1.3 觀察指標

①胸腺指數胸腺指數=胸腺重量/體重，胸腺重以mg為單位，體重以g為單位。

②血清CORT和胸腺肽的濃度酶聯免疫吸附測定法檢測血清CORT和胸腺肽的含量。

1.4 統計方法

采用SPSS19.0統計軟件對數據進行統計學處理，計量資料以據以均數±標準差（x±s）表示，采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 大鼠胸腺指數

應激后大鼠胸腺指數與對照組比較要低，但差異無統計學意義（P>0.05），見表1。

表1 急性應激對大鼠胸腺指數的影響[（x±s），mg/g]

2.2 大鼠血清CORT和胸腺肽的濃度

應激后大鼠血清CORT的濃度明顯增高，與對照組比較差異有統計學意義（P<0.05）；胸腺肽的濃度與對照組比較顯著性減低，差異有統計學意義（P<0.05），見表2。

表2 急性應激對大鼠血清CORT和胸腺肽濃度的影響[（x±s），pg/mL]

注：與對照組比較#P<0.05。

3 討論

胸腺是機體主要的免疫器官，為T淋巴細胞的成熟和選擇提供微環境，在免疫功能的執行與維持中發揮重要的作用。胸腺隨著年齡的增長而退化萎縮，受性激素的影響[6-7]，因此本實驗中研究對象選擇的是青春期雄性Wistar大鼠。

各種應激刺激均可導致胸腺退化，這種退化是在機體應激時，通過下丘腦-垂體-腎上腺軸的作用而發生的[8]。這與該實驗的結果類似，大鼠急性應激6 h后血清CORT的濃度（89.05±4.30）pg/mL明顯增高，與對照組（67.82±4.76）pg/mL比較差異有統計學意義。

胸腺退化萎縮意味著在細胞免疫功能中起主導作用的T淋巴細胞的數目減少，從而導致細胞免疫功能下降甚至抑制。胸腺指數是反映機體胸腺免疫功能的重要指標之一，其數值高低的變化可以反映機體免疫功能的狀態[9-10]。該實驗中，我們觀察到大鼠急性應激6 h后，胸腺指數出現降低（1.99±0.15）mg/g，但與對照組（2.06±0.24）mg/g比較差異無統計學意義，這可能是急性應激對胸腺體積、重量的影響需要一個反應過程，可以通過延長觀察時間點來予以驗證；或者是短暫應激對胸腺體積、重量的影響較小，需要一定的時間積累；也可能是應激強度相對較小，對胸腺的影響有限，可以加大應激的強度來進行驗證。

研究表明，胸腺激素在胸腺細胞的發育和成熟過程中發揮重要的作用[11-12]，胸腺肽可以增加T細胞的產生、刺激T細胞分化與成熟、減少T細胞凋亡以及產生T細胞介導抗體等[13]。該實驗中，急性應激6 h后大鼠血清胸腺肽的濃度（0.66±0.06）×103 pg/mL明顯下降，與對照組（1.46±0.08）×103 pg/mL比較差異有統計學意義。可能在應激誘導胸腺退化萎縮的過程中起到一定的作用。但血清胸腺肽濃度降低的機制以及其與胸腺細胞凋亡間是否有關系尚不明確，需進一步研究。

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（收稿日期：2015-05-24）